陈丽 作品数:43 被引量:30 H指数:3 供职机构: 江苏省农业科学院 更多>> 发文基金: 公益性行业(农业)科研专项 江苏省农业科技自主创新基金 江苏省自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 化学工程 生物学 更多>>
伪狂犬病毒在BHK-21悬浮细胞中的增殖特性 被引量:1 2022年 为考察BHK-21悬浮细胞增殖伪狂犬病毒(Pseudorabies virus, PRV)工艺参数及病毒增殖过程中代谢动力学,将PRV接种于BHK-21悬浮细胞,考察接毒时细胞密度、病毒感染复数(MOI)及收毒时间对病毒效价的影响,测定培养过程中葡萄糖(Gluc)、乳酸(Lac)和谷氨酰胺(Gln)浓度,计算病毒增殖过程中各参数代谢速率。结果显示,将MOI为0.01的PRV病毒接种BHK-21悬浮细胞,其病毒滴度在42 h达最高8.5 lgTCID;/mL。代谢参数检测结果表明,BHK-21细胞在接毒36 h后细胞开始出现死亡。PRV在BHK-21悬浮细胞中的增殖特性为伪狂犬病毒的规模化培养及疫苗开发提供了技术基础。 陈丽 倪敏舒 徐悦 徐悦 鲍熹 冯磊 冯磊关键词:BHK-21细胞 伪狂犬病毒 H5亚型禽流感病毒HA亚单位疫苗的制备方法 本发明涉及H5亚型禽流感病毒HA亚单位疫苗的制备方法,属于生物技术领域。利用Sf9和HiFi两种昆虫细胞,分别对H5亚型禽流感病毒HA亚单位疫苗的种毒和接种有种毒的疫苗进行高效增殖,从而克服了当前以鸡胚组织苗为基础的疫苗... 吴培培 唐应华 冯磊 陈丽 恽君雯 侯继波文献传递 MDCK单细胞悬浮生长的驯化筛选及其在AIV增殖上的初步应用 被引量:11 2015年 采用逐步降低培养基中血清含量的方法获得可悬浮生长的MDCK-Sus细胞株,对其生长代谢情况、细胞膜表面病毒受体丰度,以及在生物反应器中悬浮培养该细胞对禽流感H9亚型病毒增殖进行了初步应用研究。结果表明,MDCK-Sus细胞株可完全适应无血清营养条件并呈单细胞悬浮生长状态,细胞生长旺盛,平均比生长速率达到0.556 d-1,最大活细胞密度达到2.42×106cells·m L-1,并可检测出其细胞膜表面具有正常丰度的唾液酸-α-2,3-半乳糖糖链受体。在MOI为0.05,TPCK处理的胰蛋白酶作用浓度为1μg·m L-1的条件下,AIV-H9亚型病毒JS03株可在MDCK-Sus细胞中获得较好的增殖HA效价,达到8log2·25μL-1。 冯磊 吴培培 褚轩 王伟峰 陈丽 侯继波关键词:MDCK细胞 禽流感病毒 适应H9亚型禽流感病毒增殖的MDCK悬浮细胞株的驯化及其生物学特性 被引量:9 2016年 本研究通过筛选驯化的MDCK细胞获得无血清悬浮生长MDCK细胞(命名为MDCK-sus),测定该细胞的比生长速率、细胞活力及细胞最大生长密度等生长特性,采用间接免疫荧光法和流式细胞仪检测法比较母本MDCK细胞与MDCK-sus细胞流感病毒受体[唾液酸-α-2,3-半乳糖糖链受体(SAα2,3Gal)和唾液酸-α-2,6-半乳糖糖链受体(SAα2,6Gal)]的丰度,用荧光定量PCR检测比较细胞中α-2,3唾液酸转移酶(ST3Gals)基因与α-2,6唾液酸转移酶(ST6Gals)基因表达水平的差异,通过测定流感病毒血凝HA效价比较母本MDCK细胞与MDCK-sus细胞对流感病毒的增殖能力。结果表明,经驯化获得的适合无血清悬浮培养的MDCK-sus细胞,细胞密度最高可达1ml 3.6×106个细胞,最大比生长速率可达1 d 0.56。MDCK-sus细胞表面流感病毒受体SAα2,3Gal的丰度明显高于母体MDCK细胞,ST3Gal转移酶基因表达水平也明显高于母本MDCK细胞。MDCK细胞驯化后增殖禽流感病毒的能力增强,其中H9亚型禽流感病毒AH1102株在MDCK-sus细胞中HA效价达到9lg2(25μl)。MDCK-sus细胞各种生长特性表明,其适于H9亚型禽流感的繁殖,可以为采用悬浮细胞培养禽流感疫苗的大规模工业化生产提供技术支持。 吴培培 唐应华 褚轩 王伟峰 陈丽 侯继波 冯磊关键词:MDCK细胞 无血清 生物学特性 用于提高猪圆环病毒2型感染效率的组合物及其应用 本发明提供用于提高猪圆环病毒2型感染效率的组合物及其应用,属于生物技术领域。用于提高猪圆环病毒2型感染效率的组合物,活性成分为甲基-β-环糊精和吐温-80。本发明还提供制备猪圆环病毒2型病毒液的方法,宿主细胞在接种猪圆环... 华涛 侯继波 张雪花 冯磊 陈丽 吴培培 张道华 唐波IFN-β1编码基因缺失的MDCK细胞株及其构建方法和应用 本发明涉及IFN‑β1编码基因缺失的MDCK细胞株及其构建方法和应用,属于生物技术及兽用生物制品工程技术领域。该名称为MDCK‑Sus‑KO‑IFN‑β1的细胞株于2016年11月22日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会... 冯磊 恽君雯 吴培培 陈丽 侯继波文献传递 一株幼地仓鼠肾细胞低免疫力细胞株及其构建方法和应用 本发明涉及生物技术领域,特别是涉及生物医学技术领域,更为具体的说是涉及一株幼地仓鼠肾细胞低免疫力细胞株及其构建方法和应用。本发明公开的幼地仓鼠肾细胞株BHK21‑IRF3‑KO‑Sus,该细胞株于2020年7月16日保藏... 陈丽 冯磊 鲍熹 徐悦 恽君雯高效增殖杆状病毒的昆虫细胞株及其构建方法和应用 本发明公开了一种高效增殖杆状病毒的昆虫细胞株,该昆虫细胞株名称为Sf9‑op‑BmBDV‑NS1,于2016年12月7日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC),保藏编号为CGMCC NO.13... 吴培培 冯磊 唐应华 陈丽 恽君雯 侯继波文献传递 多拷贝毕赤酵母表达猪胰岛素前体的动力学模型 以携带多拷贝猪胰岛素前体(PIP)基因的毕赤酵母(Pichia Pastoris)为供试菌株,对分批补料发酵PIP 合成动力学模型进行研究.建立了不同拷贝数毕赤酵母发酵合成PIP 的菌体生长、产物合成和底物消耗的动力学模... 陈丽 王玥 郭美锦 储炬 庄英萍关键词:重组毕赤酵母 拷贝数 动力学模型 响应面法优化大肠埃希菌生产PCV2 Cap蛋白的诱导条件 为提高重组大肠埃希菌发酵生产PCV2 Cap蛋白的产量,优化宿主菌的表达条件。在单因素试验基础上,以接种量、诱导时间和诱导温度为自变量,目的蛋白产量为响应值,根据响应面法的Box-Behnken中心组合设计原理,研究各自... 陈丽 乔绪稳 冯磊 郑其升 吴培培 褚轩 王伟峰 侯继波关键词:响应面法 大肠埃希菌