牛卫东
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
- 供职机构：北京工业大学生命科学与生物工程学院更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- HIV-1 P24人源化单克隆抗体的制备及鉴定
- 2014年
- 目的 通过建立新型人源化抗HIV-1 P24单克隆抗体制备技术平台,研制1～2种抗HIV-1 P24抗体.方法 使用连接P24的磁珠分选特异性分泌P24抗体的B细胞,有限稀释后,提取总mRNA,采用逆转录和巢式PCR扩增免疫球蛋白重链和轻链基因,经测序鉴定后克隆到真核表达载体Cloning vector AbVec-hIgG1、Cloning vector AbVec-hIgKappa、Cloning vector AbVec-hIgLambda中;通过瞬时转染293T细胞得到重组抗体;使用proteinA亲和层析纯化抗体.结果 成功筛选到5对抗HIV-1 P24的人源单克隆抗体基因.结论 本研究初步成功地建立了人源化HIV-1 P24单克隆抗体的制备及纯化方法,为HIV早期诊断以及筛选其他人源化单克隆抗体奠定了基础.
- 崔佳雯毛怡心马晶贾润清余双庆张晓梅常占军戴蕾李喜英牛卫东梁世杰刘征刘建勋徐兰英曾毅张晓光
- 关键词：HIV-1逆转录聚合酶链反应抗体单克隆酶联免疫吸附测定
- EV71 VP1人源单克隆抗体筛选
- 2014年
- 目的 通过建立新型人源化单克隆抗体制备技术平台,筛选抗EV71 VP1单克隆抗体.方法 使用耦联EV71 VP1抗原的磁珠对EV71感染者外周血淋巴细胞进行分选,得到分泌EV71VP1特异性抗体的B淋巴细胞.有限稀释后,低渗裂解细胞,采用逆转录和巢式PCR扩增免疫球蛋白重链和轻链基因,经测序鉴定后克隆到真核表达载体Cloning vector AbVec-hIgG1、Cloning vectorAbVec-hIgKappa、Cloning vector AbVec-hIgLambda中.通过瞬时转染293T细胞得到重组抗体.结果 成功筛选到1对抗EV71 VP1的人源单克隆抗体基因.结论 本研究初步成功地建立了人源化单克隆抗体的筛选方法,为手足口病早期诊断、治疗以及筛选其他人源化单克隆抗体奠定了基础.
- 毛怡心崔佳雯马晶贾润清余双庆张晓梅常占军戴蕾李喜英牛卫东梁世杰刘征刘建勋徐兰英曾毅张晓光
- 关键词：肠道病毒属单克隆聚合酶链反应
