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一种基因治疗用载体蛋白及其制备方法和用途: 本发明提供一种基因治疗用载体蛋白及其制备方法和用途，提供了人源H4<Sup>67-103</Sup>作为DNA结合结构域，用于构建基因载体的用途，同时本载体利用人源组蛋白H4的部分DNA结合域（H4<Sup>67-103...; 艾永兴吴山力邓晨郑海南赵程程于佩峰王梦云郝林琳于浩张玉静; 文献传递

Intein融合表达鸡IL-2蛋白的多克隆抗体制备被引量：4: 2015年; 鸡白介素-2(chIL-2)是一种对T淋巴细胞、B淋巴细胞和自然杀伤细胞复制与分化起重要作用的细胞因子,并在机体天然免疫和获得性免疫的发生与维持中发挥重要作用。本研究中,将去除去了N-端信号肽的chIL-2基因(366bp)克隆连接到pTYB1原核表达载体,将chIL-2基因与1 362bp的Intein基因融合在同一开放阅读框内,编码相对分子质量约为71 000的chIL-2-Intein融合蛋白。诱导表达chIL-2-intein融合蛋白,应用chitin-sepharose亲和层析进行融合蛋白纯化。用纯化的chIL-2-intein融合蛋白免疫大白兔制备多克隆抗体。应用昆虫细胞表达系统纯化出的chIL-2-6His蛋白作为抗原,包被ELISA板用于抗体效价的检测,Western blot分析抗体特异性。结果,应用纯化的chIL-2-intein融合蛋白成功制备特异性chIL-2抗体,效价高达4 096 000,且该抗体也能用于Intein标签蛋白的检测。; 邓晨郑海南于佩峰张鑫吴山力王梦云吕岩艾永兴; 关键词：INTEIN CHICKEN IL-2 多克隆抗体

融合蛋白SUMO3-PLA2及制备方法和医用用途: 本发明提供一种融合蛋白SUMO3-PLA2及制备方法，本发明还提供了该SUMO3化融合蛋白的医用用途，解决了PLA2在大肠杆菌不溶性表达的技术难题；利用pColdTF冷诱导表达载体高效制备融合蛋白SUMO3-PLA2，克...; 艾永兴于佩峰邓晨吴山力郑海南王梦云赵程程郝林琳于浩张玉静; 文献传递

应用Intein融合的鸡IL-2蛋白制备多克隆抗体被引量：3: 2015年; 研究Intein标签与目的蛋白chIL-2融合作为抗原,进行高效价兔抗chIL-2蛋白多克隆抗体的制备,将去除去了N-端信号肽的chIL-2基因(366 bp)克隆连接到p TYB1原核表达载体,将chIL-2基因与1 362 bp的Intein基因融合在同1开放阅读框内,编码分子量约为71 ku的chIL-2-Intein融合蛋白。诱导表达chIL-2-Intein融合蛋白,应用Chitin-Sepharose亲和层析进行融合蛋白纯化。用纯化的chIL-2-Intein融合蛋白免疫大白兔制备多克隆抗体。应用昆虫细胞表达系统纯化出的chIL-2-6His蛋白作为抗原,包被ELISA板用于抗体效价的检测,Western Blot分析抗体特异性。结果表明:应用纯化的chIL-2-Intein融合蛋白成功制备特异性chIL-2抗体,效价高达4 096 000,且该抗体也能用于Intein标签蛋白的检测。; 邓晨于佩峰张鑫王梦云吕岩艾永兴; 关键词：内肽酶多克隆抗体

融合蛋白SUMO1-PLA2及制备方法和医用用途: 本发明提供一种融合蛋白SUMO1-PLA2及制备方法，本发明还提供了该SUMO1化融合蛋白的医用用途，解决了PLA2在大肠杆菌不溶性表达的技术难题；利用pColdTF冷诱导表达载体高效制备融合蛋白SUMO1-PLA2，克...; 艾永兴于佩峰邓晨吴山力郑海南王梦云赵程程郝林琳于浩张玉静; 文献传递

林蛙皮多肽对HaCaT细胞增殖及凋亡的影响被引量：5: 2014年; 将本室自制的林蛙皮多肽进行SDS-PAGE和紫外扫描检测,并将其以不同质量浓度作用于人永生化表皮细胞(HaCaT细胞),利用MTS法、Annexin V-FITC/PI法分别检测林蛙皮多肽对HaCaT细胞增殖及其凋亡的影响。结果显示,林蛙皮多肽在20%SDS-PAGE条件下呈现弥散状态,灰度分析表明相对分子质量在10 000以下的多肽占总多肽的67.1%。林蛙皮多肽在(50~800)mg/L条件下,随着多肽质量浓度的升高,对HaCaT细胞促进增殖的作用逐渐增强,当林蛙皮多肽质量浓度为800mg/L时,MTS检测HaCaT细胞活力D值是正常对照细胞D值的2.5倍(P<0.01);此时,细胞凋亡率比正常对照细胞降低了(2.7±0.03)%,(P<0.01)。以上结果表明,林蛙皮活性多肽对HaCaT细胞的增殖有显著的促进作用,并对其凋亡有显著的抑制作用。; 张鑫李思明邓晨张昕陆超程云云郝林琳卢可; 关键词：HACAT 细胞增殖细胞凋亡

鸡SUMO1的HIS/GST双融合纯化标签载体的构建及表达分析被引量：2: 2015年; SUMO(small ubiquitin-related modifier,小泛素样相关修饰物)是一种重要的蛋白翻译后修饰物,对调节蛋白质的活性、功能和细胞定位都起着至关重要的作用。虽然SUMO和泛素的空间结构很相似,但是发挥的功能却有很大的不同,SUMO不像泛素那样介导蛋白质的降解,反而可以增强蛋白质的稳定性。近年来,研究发现人的SUMO作为一种融合标签和分子伴侣来可以显著增加一些难溶解蛋白的可溶性表达。本研究以原核表达载体pET-28a为基础构建了鸡SUMO1重组质粒HIS-SUMO1-GST-pET28a,并在SUMO1和GST之间插入IL2得到重组质粒HIS-SUMO1-IL2-GST-pET28a,经IPTG诱导表达,并分别使用Ni-NTA及Glutathione-sepharose 2次亲和层析纯化,获得了纯度较高的融合蛋白。活性分析发现去SUMO化酶人的SENP1可完全切开纯化融合的蛋白经。结果表明,此SUMO融合的HIS/GST双标签表达载体不但可以用于提高难溶蛋白的溶解度,而且表达产物也作为去SUMO化酶研究的底物。; 于佩峰郑海南邓晨张鑫吴山力王梦云吕岩艾永兴; 关键词：原核表达蛋白纯化融合蛋白

MDV编码的UL36基因在MDCC-MSB1细胞中表达情况的鉴定: <正>马立克氏病(MD)是目前已知的致死率最高的鸡的传染病之一,由马立克氏病毒(MDV)感染引发,MDV属于疱疹病毒科疱疹病毒亚科,对淋巴细胞有很强的致瘤性。泛素调节系统是细胞内最重要的蛋白质修饰调节系统之一,它能通过对...; 王梦云邓晨于佩峰吕岩杨德才于子洋艾永兴; 文献传递

鸡马立克氏病毒UL36^(USP)的pTYB1表达载体的构建及表达分析: 2016年; UL36USP是马立克氏病毒UL36基因编码的蛋白UL36上具有去泛素化酶活性的N-端部分片段(UL36USP),为获取无冗余氨基酸残基的纯净UL36USP蛋白。试验采用p TYB1表达载体与目的基因UL36USP构建重组表达质粒,并诱导融合蛋白表达,在含有还原剂DTT的缓冲液中利用Intein发挥内含肽的剪切活性,将UL36USP从融合蛋白上分离出来,实现目的蛋白UL36USP的单柱纯化,纯化后的蛋白不带有冗余的氨基酸残基,并利用UL36和Intein的特异性抗体进行了Western Blot鉴定。该研究尝试了一种能有利于难表达蛋白的可溶性表达的方法,并利用Intein标签的剪切活性分离产生纯净的目的蛋白,如一些难表达的病毒蛋白,为抗病毒和抗肿瘤疫苗的研究提供材料。; 金雯王梦云余致君郑海南邓晨艾永兴; 关键词：P 病毒蛋白

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邓晨