小剂量糖皮质激素治疗进展期白癜风疗效及副作用观察 目的 观察糖皮质激素治疗进展期白癜风的疗效和副作用,探索合适的甲泼尼龙用量,寻找快速进展期白癜风疗效与副作用间的平衡点.方法 甲泼尼龙组予患者口服甲泼尼龙0.24mg.kg-1.d-1,1月,前三天加倍,其后每月减半,至... 朱龙飞 田军 高天文过表达NF-E2相关因子2对白癜风黑素细胞PIG3V线粒体生物合成和功能的影响 被引量:7 2015年 目的 探讨过表达NF-E2相关因子2(Nrf2)对黑素细胞线粒体合成和功能的影响.方法 构建含有人Nrf2基因全长的过表达质粒Nrf2-pEX-1,用该质粒瞬时转染白癜风患者表皮黑素细胞系(PIG3V).实验分为空白组(不含质粒)、对照组(转染pEX-1空质粒)、过表达组(转染pEX-1-Nrf2过表达质粒).过表达Nrf2后,RT-PCR和Western印迹法检测PIG3V线粒体生物合成相关的Nrf2、核呼吸因子1(NRF1)、线粒体转录因子A(TFAM)mRNA和蛋白水平的变化;RT-PCR检测线粒体DNA(mtDNA)拷贝数.流式细胞仪检测线粒体膜电位(MMP);荧光素酶报告系统检测细胞ATP含量.采用两样本t检验进行统计学分析.结果 Nrf2过表达质粒转染PIG3V细胞后24 h,Nrf2 mRNA、NRF1 mRNA水平较对照组明显升高,差异有统计学意义(均P<0.001),而TFAM mRNA水平与对照组比较差异无统计学意义;48 h后Nrf2 mRNA、TFAM mRNA水平较对照组升高,差异均有统计学意义(P<0.05),而NRF1 mRNA水平与对照组差异无统计学意义.Western印迹法显示,转染后24 h,过表达组Nrf2、NRF1、TFAM蛋白表达与对照组比较差异均无统计学意义,48 h后过表达组Nrf2、NRF1、TFAM蛋白表达升高(P<0.05).过表达组MMP在转染24 h后较对照组升高2.313%(t=5.546,P=0.005),48 h后升高14.872%(t=8.537,P=0.001).线粒体合成指标相对mtDNA拷贝数,在转染24 h后两组间差异无统计学意义(P>0.05),48 h后过表达组明显高于对照组(t=5.760,P=0.005);细胞ATP含量在转染后24 h两组间差异无统计学意义(P>0.05),48 h后过表达组ATP含量较对照组明显升高(t=22.040,P=0.008).结论 过表达Nrf2可以促进黑素细胞线粒体生物合成相关基因和蛋白的表达,进而促进线粒体生物合成,上调线粒体功能相关的指标. 朱龙飞 田军 坚哲 刘邦民 肖茜 李春英 高天文关键词:白癜风 黑素细胞 腺苷三磷酸 黄芩素对氧化应激状态下白癜风黑素细胞线粒体超微结构和功能的影响 被引量:5 2017年 目的:明确黄芩素对氧化应激状态下白癜风黑素细胞(PIG3V)线粒体超微结构和功能的影响。方法:常规培养白癜风黑素细胞系PIG3V细胞,分为空白对照组、黄芩素组、H_2O_2组及黄芩素+H_2O_2组。电镜观察线粒体超微结构;MTT法检测线粒体活性;流式细胞术检测线粒体膜电位;荧光素酶报告系统检测细胞ATP含量;RT-PCR检测线粒体DNA拷贝数。结果:与H_2O_2组比较,黄芩素+H_2O_2组线粒体结构损害轻,线粒体活性率、膜电位、ATP含量及DNA拷贝数高。结论:黄芩素减轻氧化应激状态下白癜风黑素细胞线粒体结构和功能损害,增强细胞抗氧化能力。 朱龙飞 田军 坚哲 张伟刚 刘邦民 李春英 高天文关键词:黄芩素 白癜风 黑素细胞 线粒体 氧化应激 277例晕痣的临床回顾性分析 被引量:10 2015年 目的:总结晕痣的临床特点,初步探讨晕痣与白癜风的临床相关性。方法:对277例晕痣患者的临床特点进行分析,并对部分患者进行随访。结果:277例行晕痣切除术的患者中,皮损单发219例(79.06%),多发58例(20.94%)。好发于面颈部(54.86%)与躯干(37.03%)。106例患者(38.27%)并发白癜风,其平均发病年龄小于未并发白癜风者(P=0.041)。随访110例未并发白癜风的晕痣患者术后转归,17例继发白癜风,其中11例于半年内发生。比较未并发白癜风的晕痣患者与继发白癜风的晕痣患者,后者多发晕痣的比例高于前者(P=0.003)。结论:晕痣皮损以单发多见,面颈部好发。晕痣发病年龄小、皮损多发是白癜风发病的危险因素。手术切除是治疗晕痣的一种有效方法,晕痣切除术后半年可能是白癜风发生的高风险期,应密切随访。 张倩 李舒丽 张伟刚 戴维 朱龙飞 田军 柳琳 曹天宇 高天文 李春英关键词:晕痣 白癜风 糖皮质激素治疗进展期白癜风疗效分析 被引量:17 2017年 目的:评价糖皮质激素治疗进展期白癜风的疗效及不良反应。方法:甲泼尼龙组进展期白癜风185例(VIDA评分4分,皮损面积>1%),予甲泼尼龙片0.48 mg/kg·d口服3日,后0.24 mg/kg·d口服27日,第2个月减为0.12 mg/kg·d,第3个月减为0.12 mg/kg·d;复方倍他米松注射液组107例(VIDA评分3分或4分,皮损面积<1%),成人予复方倍他米松注射液1.0 m L,儿童予0.015 m L/kg肌肉注射,1次/月,连用3次。结果:治疗3个月后,甲泼尼龙组和复方倍他米松注射液组有效率分别为93.0%和82.3%(P<0.05)。甲泼尼龙组不良反应发生率为82.7%,显著高于复方倍他米松注射液组62.6%(P<0.05)。结论:系统使用甲泼尼龙治疗进展期白癜风疗效优于复方倍他米松肌肉注射,但不良反应发生率相应增高。 田军 朱龙飞 李强 李舒丽 刘邦民 李春英 高天文关键词:糖皮质激素 白癜风 过氧化氢诱导人黑素细胞氧化应激损伤模型的建立 被引量:9 2014年 目的建立不同浓度的H2O2诱导人黑素细胞系PIG1产生氧化应激状态的模型,为进一步研究白癜风氧化应激发病机制奠定基础。方法分别以不同浓度的H2O2处理人黑素细胞系PIG1 24 h,光学显微镜观察黑素细胞形态学变化,流式细胞仪检测细胞凋亡情况及细胞内活性氧簇(ROS)水平,CCK-8法检测处理后细胞活性,硫代硫酸巴比妥法检测细胞脂质过氧化代谢产物丙二醛(MDA)产生情况。结果随着作用浓度的增加,黑素细胞体积变小,树突数量减少,长度缩短,凋亡及坏死逐渐增加;以0 mmol/L浓度作为对照,0.50、0.75、1.00、1.25、1.50、2.00 mmol/L的H2O2分别处理人黑素细胞系PIG1 24 h后,细胞凋亡率分别为6.8%、11.5%、15.6%、22.7%、38.7%和57.5%;细胞活性随着作用浓度的增加而逐渐降低,细胞内ROS水平及MDA含量随着作用浓度的增加而逐渐升高,1.00 mmol/L浓度处理24 h后开始与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论该文摸索出了H2O2引起人黑素细胞氧化应激损伤的最佳实验浓度,并成功建立了人黑素细胞氧化应激损伤模型。 田军 朱龙飞 坚哲 刘邦民 李强 李春英 高天文关键词:黑素细胞 氧化应激 H2O2