赵晓军
- 作品数：8 被引量：18H指数：3
- 供职机构：四川大学华西医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生一般工业技术理学生物学更多>>
- 新型纳米自组装短肽KVDV-16作为生物支架材料的可行性被引量：1
- 2009年
- 背景:设计合成和构建纳米生物材料如纳米自组装短肽是以一种"从下而上"的方式完成,其在生物医学工程方面潜在的应用价值引起了众多研究团队越来越广泛的兴趣。目的:初步探讨纳米自组装短肽KVDV16水凝胶在细胞三维培养方面的可行性。设计、时间和地点:体外观察实验,于2007-11/2008-11在四川大学纳米生物医学技术与膜生物学研究所纳米生物实验室进行。材料:短肽KVDV16(纯度为95%,为了保护肽的两端,对其N端和C端分别进行乙酰化和酰胺化);人肝细胞系L-02和肝癌细胞系SMMC7721。方法:圆二色谱仪和傅里叶红外光谱检测短肽KVDV16水凝胶在不同理化条件下的二级结构;原子力显微镜检测其水凝胶形成的纳米级结构特征;扫描电子显微镜观察其形成的纳米三维支架。主要观察指标:β折叠二级结构,纳米纤维结构特征,细胞在肽支架材料中的生长、增殖情况。结果:短肽KVDV16形成的β折叠二级结构在高温下很稳定。在不同的pH(3,7,10)甚至变性剂1%十二烷基磺酸钠的作用下,β折叠二级结构也只发生轻微的变化。原子力显微镜证实其由纳米纤维结构组成。L-02和SMCC7721细胞进入了KVDV16支架材料,镶嵌在纳米纤维网中,并很好地在此三维环境中生长。结论:实验设计的短肽KVDV16是对自组装系统的一个补充,此短肽表现出来的性质使其能发展成为组织工程中细胞培养的三维支架材料。
- 王顺康赵晓军
- 关键词：Β折叠纳米纤维水凝胶生物支架
- 大鼠脂肪间充质干细胞诱导为类肝细胞及其细胞片的制备被引量：1
- 2009年
- 成体多能干细胞,如来自骨髓和脂肪组织的间充质干细胞等具有多向分化的潜能。虽然自体干细胞移植已经发展成为器官移植的有效代替疗法之一,但是由于移植位点细胞的流失和分化条件的限制等问题使得这种疗法的效率大大降低。本研究目的是将由脂肪干细胞分化而来的类肝细胞制备成具有稳定细胞性状的可移植的肝细胞片。首先在体外分离扩增脂肪干细胞,并通过控制严格地分化条件获得类肝细胞。然后将此细胞接种到聚N-异丙基丙烯酰胺(PNIPAAm)结合的细胞培养皿表面,通过调节培养温度到20oC,使细胞成片脱离培养皿形成细胞片。对细胞片进行了常规HE染色和免疫组化观察,结果显示:这类细胞片中平均含有2～3层细胞,并且保持了细胞外基质的完整。同传统的胰酶消化收集移植用细胞相比,细胞片方法极大地减少了对移植用细胞的细胞膜和细胞外基质的损伤,这将大大促进细胞片和原位组织的相互作用,增加细胞利用效率,从而有望提高治疗效果。
- 卢永波邱峰陈咏竹赵晓军
- 关键词：脂肪间充质干细胞肝细胞
- 自组装纳米短肽RADA16-Ⅰ水凝胶在肿瘤细胞三维培养中的应用被引量：3
- 2009年
- 背景：已有研究表明培养在三维环境中的细胞,其基因表达模式和生物学活动更接近生命有机体。目的：拟采用自组装纳米短肽RADA16-Ⅰ水凝胶建立乳腺癌细胞MDA-MB-231的三维培养体系以揭示自组装纳米短肽在肿瘤细胞三维培养中的作用。设计、时间及地点：体外观察实验,于2006-09/2007-12在四川大学华西医院纳米生物医学技术与膜生物学研究所细胞学实验室完成。材料：RADA16-Ⅰ由美国BD公司提供;人乳腺癌细胞株MDA-MB-231由中国科学院上海细胞生物学研究所提供。方法：利用圆二色谱仪、原子力显微镜、流变仪对三维培养基质RADA16-Ⅰ水凝胶进行材料表征。通过F-肌动蛋白及细胞核的荧光复染来揭示细胞在三维环境中的细胞形貌。利用钙黄绿素AM对活细胞进行荧光染色,观察细胞在三维基质中的存活力。主要观察指标：①RADA16-Ⅰ的二级结构,纳米纤维网络,凝胶流变性质。②MDA-MB-231在三维培养中的细胞表型,细胞活性。结果：①自组装短肽RADA16-Ⅰ形成了纳米纤维网络结构,纤维直径20-50nm,具有类似体内细胞外基质的结构,形成基质凝胶后可模拟体内的细胞微环境,用于细胞的三维培养。②MDA-MB-231细胞在三维基质中生长呈现出纺锤状的细胞形貌,在基质中的生存状态均较好,细胞与材料具有较好的生物相容性。结论：自组装纳米短肽RADA16-Ⅰ有良好的结构与性能,能充分支持MDA-MB-231细胞的三维培养。
- 刘子佳米坤王贵侠黄奔赵晓军
- 关键词：乳腺癌细胞
- 楔形短肽表面活性剂A_3V_3D纳米自组装结构的表征及机理研究被引量：4
- 2009年
- 通过对传统短肽表面活性剂氨基酸序列的改良,设计了具有楔形几何结构的新型短肽表面活性剂A3V3D.圆二色谱(CD)分析表明,该短肽的二级结构为无规则卷曲,透射电子显微镜(TEM)和原子力显微镜(AFM)表征发现,该短肽在水溶液中能够发生有序的自组装,形成稳定的光滑平直的纳米纤维.芘探针荧光光谱分析显示,该短肽形成了疏水区并将芘分子包裹其中.由此推测A3V3D在其楔形几何结构的影响下,以柱状胶束的形式发生自组装,是一种新型的自组装短肽材料,说明了几何形状效应在控制短肽的自组装行为中起着关键作用.
- 陈咏竹邱峰赵晓军
- 关键词：自组装纳米纤维
- 聚N-异丙基丙烯酰胺改性聚苯乙烯培养皿:以温度变化控制细胞的分离被引量：3
- 2010年
- 背景:在组织工程研究中,最常用的细胞分离方法是胰蛋白酶消化,但是这种方法可能破环细胞外基质蛋白造成细胞活性降低,因此研制一种避免酶消化的细胞分离技术将有重要的意义。目的:利用聚N-异丙基丙烯酰胺能够随温度变化疏水性的特性,建立一种基于温度敏感性控制细胞分离技术。方法:配制质量浓度为55%的异丙基丙烯酰胺异丙醇溶液,均匀涂抹在聚苯乙烯培养皿表面,然后通过电子束照射的方法接枝于培养皿表面。用原子力显微镜观察接枝前后聚苯乙烯培养皿表面微观结构,静滴法测量不同温度下接枝前后聚苯乙烯培养皿表面的水接触角,聚N-异丙基丙烯酰胺接枝后培养皿在不同温度下细胞分离能力变化。结果与结论:原子力显微镜观察发现聚苯乙烯培养皿表面上形成薄层致密的聚N-异丙基丙烯酰胺聚合物;在37℃时聚N-异丙基丙烯酰胺接枝培养皿与未接枝培养皿水接触角差异无显著性意义,在20℃时聚N-异丙基丙烯酰胺接枝培养皿的水接触角明显低于未接枝培养皿;在37℃时细胞能正常的在温度敏感性培养皿上贴壁生长,在20℃时大量细胞从培养皿底面脱离悬浮在培养基中。结果说明聚N-异丙基丙烯酰胺接枝培养皿表面可以利用温度的改变控制细胞的分离,此技术有望在组织工程中发挥重要的作用。
- 刘敬平张兰兰赵晓军
- 关键词：细胞分离聚N-异丙基丙烯酰胺温度敏感性水接触角
- 自组装纳米短肽基质在肿瘤细胞三维培养中的应用被引量：1
- 2010年
- 目的研究人肺癌细胞A549在自组装纳米短肽RADA16三维基质材料中培养时的细胞学行为,揭示肿瘤细胞在三维环境与传统二维环境中培养的差异。方法用透射电子显微镜对材料进行表征;MTT检测细胞对5-氟尿嘧啶的敏感性;黏附性实验分析二维及三维培养的细胞对胞外基质蛋白(Ⅳ型胶原、层粘连蛋白、纤粘连蛋白)黏附率的差异。结果RADA16形成了类似体内细胞外基质的纳米纤维网络。A549在三维基质中的状态较好,随着时间增加、抗药性增加,药物敏感性降低。对不同的胞外基质蛋白黏附率揭示,与二维培养的细胞相比,RADA16三维培养的细胞克隆对不同胞外基质蛋白的黏附性有显著性差异。结论细胞在RADA16三维培养中,细胞的生长、形貌、药敏性及对胞外基质黏附性等细胞行为与二维培养的细胞具有显著性差异,展示了纳米短肽材料在细胞三维培养研究中的应用前景。
- 王贵侠米坤刘子佳黄奔赵晓军
- 关键词：肺癌细胞胞外基质细胞行为
- 自组装短肽系统及其材料学应用被引量：5
- 2009年
- 模仿天然蛋白质的氨基酸序列设计自组装短肽作为纳米材料近年来引起了人们极大的兴趣。本文介绍了几个发展较为成熟的自组装短肽材料以及它们在纳米医学和纳米生物技术等领域的应用,阐述了自组装短肽作为新型纳米材料的巨大潜力。
- 陈咏竹邱峰赵晓军
- 氨基酸序列和时间对短肽纳米纤维形成的影响被引量：2
- 2009年
- 蛛丝蛋白非结晶区不同基序插入RADA16-Ⅰ,短肽分别为R1(n-RADARADAGGASRADARADA-c)和R2(n-RADARADAGPGGYRADARADA-c)。采用傅立叶红外光谱(FTIR)、原子力显微镜(AFM)和透射电子显微镜(TEM)技术研究氨基酸序列和组装时间对短肽的二级结构和自组装成的纳米结构的影响。结果表明,随着时间的延长,R1和R2形成的β-折叠片含量升高,纤维变长变宽。R1形成数量少但长达几十微米的纤维,R2形成长约一微米但数量多的纤维。通过改变氨基酸序列,控制组装时间可以达到控制自组装形成的纳米结构的目的。
- 孙丽娟赵晓军
- 关键词：氨基酸序列
