郭雅洁
- 作品数：2 被引量：15H指数：2
- 供职机构：复旦大学附属肿瘤医院乳腺癌研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 趋化因子CCL28过表达对人乳腺癌细胞增殖的影响被引量：6
- 2013年
- 背景与目的:CCL28,又称为黏膜相关上皮趋化因子(mucosa-associated epitheliachemokine,MEC),是趋化因子CC家族中的一员。研究表明,CCL28与肿瘤发生、发展有关,但对其在乳腺癌中的功能还知之甚少。本文旨在探讨CCL28过表达在体外对乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖的影响。方法:构建CCL28过表达载体pBabe-CCL28表达质粒,将重组的pBabe-CCL28基因和空载体pBabe转染细胞Phoenix,利用逆转录病毒感染乳腺癌细胞MDA-MB-231,通过嘌呤霉素药物筛选获得稳定表达CCL28的MDA-MB-231/CCL28细胞系和感染空载体的MDA-MB-231/vector细胞系,利用半定量RT-PCR、实时荧光定量PCR及蛋白质印迹法(Western blot)检测CCL28的基因表达和蛋白质水平;利用CCK8、软琼脂克隆培养及流式细胞术检测CCL28过表达后细胞增殖、克隆形成能力及凋亡的变化;利用Western blot检测CCL28过表达后凋亡相关蛋白的变化。结果:成功建立了稳定表达CCL28的细胞系MDA-MB-231/CCL28,与空载体对照组相比,pBabe-CCL28质粒感染入细胞后CCL28基因表达水平明显增高,说明CCL28 cDNA重组质粒构建成功。CCK8及软琼脂克隆实验结果显示,MDA-MB-231/CCL28的增殖能力明显高于MDA-MB-231/vector,差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞术结果显示,MDA-MB-231/CCL28细胞凋亡比例减少,差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot结果显示,抗凋亡蛋白Bcl-2的表达增加。结论:CCL28过表达可以显著促进人乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖能力,抑制乳腺癌细胞凋亡,后者可能与Bcl-2上调有关。CCL28有望成为临床治疗乳腺癌的潜在基因靶点。
- 林凤娟杨小利郭雅洁邵志敏欧周罗
- 关键词：乳腺肿瘤趋化因子基因表达增殖
- IFN-γ通过JAK-STAT1通路诱导乳腺上皮细胞表达趋化因子CXCL1被引量：9
- 2015年
- 背景与目的:趋化因子在白细胞浸润、免疫调节和肿瘤转移等病理生理过程中发挥着广泛而重要的作用,但人们对其调控机制了解甚少。研究表明,细胞因子可刺激趋化因子的表达,从而发挥其生物学功能。CXC趋化因子配体17(CXC chemokine ligand 17,CXCL17)是2006年发现的CXC趋化因子中新的一员。CXCL17具有抗炎、抗菌、抗肿瘤免疫和促血管生成等作用。通过研究其上游调控机制可为其用于临床诊断与治疗提供线索。本研究旨在探讨何种细胞因子可以影响CXCL17的表达。方法:实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,q RT-PCR)检测多种细胞因子(TNF-α、IL-1β、IFN-γ)及细菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)作用于MCF-10A正常乳腺上皮细胞12 h后,CXCL17的m RNA表达水平改变。蛋白[质]印迹法(Western blot)检测IFN-γ作用于MCF-10A细胞后JAK-STAT通路的活化情况。结果:多种细胞因子及LPS可不同程度地促进CXCL17基因转录,IFN-γ作用最为显著,其通过增加STAT1蛋白的表达水平和磷酸化水平,极大地提高了CXCL17基因转录水平。结论:IFN-γ通过激活JAK-STAT1信号通路使CXCL17在乳腺上皮细胞MCF-10A中表达上调。作为IFN-γ的靶基因,CXCL17很可能是IFN-γ发挥抗炎、抗癌作用的重要环节之一。
- 郭雅洁欧周罗
- 关键词：细胞因子趋化因子IFN-Γ乳腺上皮细胞
