郝喜燕
- 作品数：3 被引量：0H指数：0
- 供职机构：内蒙古大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家基础科学人才培养基金内蒙古自治区自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 细粒棘球蚴特异性抗原基因P-29的原核表达及免疫学鉴定
- 细粒棘球蚴病(echinooocoosis)又称囊性包虫病(cystic echinooocoosis,CE),是因棘球绦虫的幼虫寄生于人体组织而引起的人兽共患性寄生虫病,呈全球性分布,在我国内蒙古、新疆、甘肃、宁夏、青...
- 李洁郝喜燕陈献威王红霞李树裕王媛媛王志钢
- 文献传递
- 细粒棘球蚴特异性抗原基因P-29的原核表达及免疫学鉴定
- 2010年
- 目的对细粒棘球蚴P-29基因进行克隆、表达和免疫反应性分析。方法以细粒棘球蚴总RNA为模板,反转录PCR扩增P-29基因,将其克隆至原核表达载体pET44a(+)中,构建重组原核表达载体pET-P-29,转入大肠埃希菌BL21(DE3)中,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)观察重组蛋白的表达情况,用蛋白纯化试剂盒纯化蛋白,蛋白质印迹(Western blotting)分析重组蛋白与细粒棘球蚴病患者血清的免疫反应性。结果PCR、双酶切和DNA测序结果表明,重组质粒pET-P-29构建成功。SDS-PAGE结果显示,重组蛋白Nus-P-29的相对分子质量(Mr)约为93000,纯化后的蛋白浓度为0.78mg/ml。重组蛋白Nus-P-29能被细粒棘球蚴病患者血清识别。结论细粒棘球蚴P-29基因表达成功,纯化后的重组蛋白Nus-P-29具有较强的免疫反应性。
- 李洁王志钢郝喜燕陈献威王红霞李树裕杨娇馥杨军
- 关键词：细粒棘球蚴原核表达
- 内蒙古白绒山羊TSC2基因克隆与表达模式分析
- 2012年
- 旨在克隆内蒙古白绒山羊TSC2基因cDNA并分析其特性及基本表达模式。利用RT-PCR分段克隆TSC2基因cDNA片段并测序,将得到的cDNA各片段核苷酸序列拼接后获得绒山羊TSC2基因编码区全长序列(HQ684023)并进行生物信息学分析。半定量RT-PCR方法检测TSC2基因在不同组织中的表达特异性。结果表明内蒙古白绒山羊TSC2基因cDNA编码区核苷酸序列为5 184 bp,包含了编码1 727个氨基酸残基的全长ORF。核苷酸序列与牛、猪、马、大熊猫、犬、恒河猴、人、小鼠及大鼠的同源性分别为97%、90%、89%、88%、87%、87%、87%、86%和86%。NCBI CDD程序预测该基因编码的蛋白质有一个Tuberin结构域和一个Rap-GAP结构域;Psite程序分析有5个N糖基化位点、2个cAMP和cGMP依赖蛋白激酶磷酸化位点、16个蛋白激酶C磷酸化位点、25个酪蛋白激酶磷酸化位点。PSORT程序预测其定位于胞内体膜。TSC2基因在内蒙古白绒山羊的睾丸、脑、肝脏、肺、乳腺、脾和肾脏等组织中都有表达,mRNA丰度在睾丸中较高,乳腺中较低。
- 史偈君杨娇馥张涛秦毅谢鸿云李树裕郝喜燕王志钢
