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赵忠鹏: 作品数：67 被引量：252H指数：10; 供职机构：病原微生物生物安全国家重点实验室更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>; 相关领域：农业科学医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>

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犬细小病毒核酸疫苗、重组活载体疫苗与弱毒疫苗免疫犬实验研究被引量：9: 2008年; 分别用犬细小病毒(CPV)核酸疫苗(pVCPV-VP2)、CPV重组活载体疫苗(CAV2/CPV)与CPV弱毒疫苗对犬进行了免疫试验,以检测不同CPV疫苗的免疫原性。采用CPV ELISA、CPV HI与CPV微量中和试验检测免疫犬的体液免疫水平,采用淋巴细胞转化试验检测犬的细胞免疫水平。结果,pVCPV-VP2和CAV2/CPV均能诱导机体产生抗CPV ELISA抗体与抗CPV中和抗体,但是pVCPV-VP2不能诱导机体产生可检测的抗CPV HI抗体,而CAV2/CPV能够诱导机体产生抗CPV HI抗体。淋巴细胞转化试验结果,pVCPV-VP2和CAV2/CPV免疫犬的外周血淋巴细胞对ConA与CPV的刺激均出现明显的增殖反应。结果表明,pVCPV-VP2和CAV2/CPV免疫犬均能诱导机体产生抗CPV的特异性体液免疫反应和细胞免疫反应,两者所表达的VP2蛋白均具有较好的免疫原性。CAV2/CPV以及pVCPV-VP2和CAV2/CPV联合免疫犬的抗CPV体液免疫水平和细胞免疫水平均比用pVCPV-VP2单独免疫犬的体液免疫水平和细胞免疫水平高。但CAV2/CPV诱导机体产生的抗CPV特异性免疫反应仍然比CPV弱毒疫苗诱导机体产生的抗CPV特异性免疫反应弱。另外,CAV2/CPV还能诱导机体产生抗CAV-2的特异性免疫反应。; 谢之景杨松涛夏咸柱闫芳赵忠鹏高玉伟邹啸环黄耕; 关键词：犬细小病毒核酸疫苗重组活载体疫苗

布鲁氏菌毒力、免疫相关分子的筛选研究: 布鲁氏菌病(Brucellosis)(简称布病)是由布鲁氏菌(Brucella)引起的人畜共患传染病,在我国被列为二类传染病,是一种重要的生物战剂和生物恐怖剂。近年来,疫情反弹,死灰复燃,给畜牧业和人类健康带来严重危害。...; 赵忠鹏; 关键词：布鲁氏菌蛋白质组学新型疫苗双向电泳

犬细小病毒基因型的调查被引量：42: 2004年; 采用 PCR方法扩增了 13株犬细小病毒 ( canine parvovirus,CPV) VP2基因的 2个片段 ,通过序列测定和 DNAS-tar软件分析 ,结果显示 ,我国的 CPV分离株也存在基因变异现象 ,除发现 CPV- 2、CPV - 2 a、CPV- 2 b突变株外 ,还发现在 CPV- 2 a基础上进一步进化产生的 2个新的变异株。在我国 ,CPV- 2曾在 2 0世纪 80年代早期流行 ,但 1986年后分离到的 CPV以 CPV- 2 a为主 ,在 2 0 0 2年送检的 8份病料中分离到 4株 CPV- 2 a和 4株 CPV- 2 b。PV/貉 / CC/ 1/ 86在CPV- 2 a的基础上 VP2发生氨基酸 30 0 G→ S替换 ,PV/犬 / JL / 1/ 0 2在 CPV- 2 a的基础上 VP2发生氨基酸 5 6 4 S→ N替换 ,其确切的生物学意义尚不清楚。我国的 CPV分离株与参考毒株的核酸同源性超过 98% ,没有形成明显的中国CPV分支。; 谢之景夏咸柱扈荣良赵忠鹏高玉伟黄耕; 关键词：犬细小病毒基因型进化

犬冠状病毒S蛋白主要抗原区基因片断的表达及免疫原性被引量：1: 2004年; 应用 Pichia pastoris 酵母表达了犬冠状病毒大熊猫野毒株(CCV DXMV) S 蛋白主要抗原区基因片断。用特异性引物扩增出 CCV DXMV 株 S1 基因片断,并将其克隆到 pGEM-T 载体中得到 pTS1。用 Kpn I 和 NotI 双酶切pTS1 回收目的基因 S1 定向克隆到 pPICZαA 中,构建出重组质粒 pPICZαAS1。将 pPICZαAS1 用 Sac I 内切酶线性化后,电转化感受态 GS115 酵母细胞,用 PCR 法筛选阳性重组子。用 1%的甲醇诱导重组酵母菌,取培养物上清进行重组蛋白的检测。结果重组酵母菌培养物上清用 SDS-PAGE 电泳可检测到相对分子量为 106kDa 大小的重组蛋白, Western-blot 证实该重组蛋白可以与 CCV 多克隆抗体发生特异性血清学反应。凝胶薄层扫描分析表明,3 株重组酵母菌在 1%甲醇诱导 144h 后,重组蛋白 S1 表达量约占培养物上清总蛋白量的 6.6-8.6%左右。用重组蛋白 S1 免疫 BALB/C 小鼠 3 次后,小鼠血清 CCV 中和抗体可达 1:8-1:16,表明重组 S1 蛋白具有一定的免疫原性。; 乔军夏咸柱夏咸柱胡桂学杨松涛赵忠鹏谢之景; 关键词：犬冠状病毒免疫原性

犬细小病毒基因型的调查研究: 前言:犬细小病毒(canine parvovirus,CPV)是细小病毒科细小病毒属成员,主要引起犬的出血性肠炎和幼犬心肌炎;自1978年分离成功以来,已传遍所有养犬国家和地区,为了与犬极小病毒(MCV)相区别而命名为C...; 谢之景夏咸柱扈荣良赵忠鹏高玉伟黄耕; 关键词：犬细小病毒 FPV 宿主范围种间传播抗原位点基因型; 文献传递

犬细小病毒基因型的调查研究: 本研究对13株CPV进行了VP2基因的扩增、序列测定和比较,并对CPV-IM的VP2基因进行了比较分析.; 谢之景夏咸柱扈荣良赵忠鹏高玉伟黄耕; 关键词：犬细小病毒出血性肠炎; 文献传递

金黄色葡萄球菌肠毒素B精制免疫球蛋白对小鼠中毒模型的免疫救治效果研究: 2019年; 目的:研制金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)精制免疫球蛋白,即马抗SEB免疫球蛋白F(ab′)2制品,为SEB中毒的救治提供候选药。方法:利用传统的发酵和纯化工艺制备天然SEB纯品,并建立小鼠实验动物模型;利用分子克隆和蛋白质纯化技术,克隆、表达、纯化重组SEB,加入适量弗氏佐剂充分乳化,免疫马匹,测定免疫马匹血清中和抗体效价后采血,分离血清,按照成熟的生产工艺制备治疗性抗体成品;对成品进行安全性检测及免疫救治效果评价。结果:纯化的天然SEB经SDS-PAGE和HPLC法测定纯度大于90%,对小鼠腹腔注射的半数致死量为0.5μg/kg;纯化的重组SEB表达量超过2 mg/mL,经SDS-PAGE和HPLC法测定纯度大于90%,对小鼠腹腔注射的半数致死量为50μg/kg;免疫马匹血清中和抗体效价达2000 U/mL以上时,采血并制备F(ab′)2成品,经SDS-PAGE和HPLC法测定纯度在80%以上,中和抗体效价超过2500 U/mL;安全性符合现行《中国药典》要求;对SEB中毒动物模型有很好的免疫救治效果。结论:建立了SEB精制免疫球蛋白制品生产工艺,制备的成品符合现行《中国药典》要求,为SEB中毒的救治提供了候选药。; 韩慧李敏杨晓岚段跃强谷宏婧范铁炯李鑫杨鹏辉刘媛闫芳郑源强石艳春赵忠鹏; 关键词：金黄色葡萄球菌肠毒素B 免疫球蛋白动物模型

表达狂犬病毒糖蛋白抗原的重组犬2型腺病毒的构建及鉴定: 通过常规分子生物学方法,先将狂犬病毒糖蛋白(Rgp)基因从含有狂犬病毒SRV9株糖蛋白基因的pGT质粒克隆至pVAX1,再通过E3缺失穿梭质粒pVAX△E3,构建成pVAX△E3Rgp,然后再通过酶切连接将其克隆入犬2型...; 赵忠鹏夏咸柱扈荣良张守峰袁慧君谢之景闫芳黄耕杨松涛; 关键词：狂犬病毒犬2型腺病毒; 文献传递

表达犬瘟热病毒H基因的重组犬2型腺病毒免疫原性测定被引量：4: 2007年; 为测定表达犬瘟热病毒(CDV)H基因的重组犬2型腺病毒(CAV-2/CDVLPH)免疫原性,25只45-50日龄犬(抗CDV中和抗体小于1∶2,CAV-2 HI抗体效价小于1∶2)随机分为5组进行免疫犬试验,第1组为CAV-2/CDVLPH免疫组,第2组为pVAXLPH免疫组,第3组为pVAXLPH和CAV-2/CDVLPH联合免疫组,CDV弱毒疫苗组和pVAX1空载体组分别作为阳性和阴性对照组。利用间接ELISA和CDV中和试验检测免疫犬的抗CDV体液免疫水平、CAV-2 HI试验检测免疫犬的抗CAV体液免疫水平、淋巴细胞转化试验检测免疫犬的抗CDV和抗CAV-2细胞免疫水平,分析CAV-2/CDVLPH的免疫性。结果,能够在各试验组免疫犬血清中检测到抗CDV ELISA抗体和抗CDV中和抗体,同时在第1组和第3组免疫犬的血清中检测到抗CAV-2的HI抗体,免疫犬的外周淋巴细胞对特异性和非特异性抗原刺激均有明显增殖,第2组的免疫应答水平低于第3组,第1组又高于第3组,但低于CDV弱毒疫苗免疫组,试验表明CAV-2/CDVLPH可同时诱导免疫犬产生抗CDV和CAV特异性免疫,CAV-2/CDVLPH与pVAXLPH相比能诱导犬产生较高的特异性免疫应答,然而低于CDV弱毒疫苗。; 闫芳夏咸柱扈荣良谢之景赵忠鹏高玉伟黄耕; 关键词：犬瘟热 H基因

Serological survey on canine coronavirus antibodies in giant pandas by virus neutralization test被引量：2: 2004年; In order to survey the infectious situation of canine coronavirus (CCV) in giant panda population, a virus neutralization test detecting specific antibodies against CCV in giant panda抯 sera was established by using two-fold dilutions of serum and 100 TCID50 of the virus. The 62 sera samples of giant pandas, which were gathered from zoos and reserve region of Sichuan Province, China were detected. The neutralization antibody titer of 1:4 was recognized as the positive criterion, 8 sera samples were detected to be positive, and the positive rate was 12.9%. The titers of neutralizing antibody ranged from 1:8 to 1:32. It was the first comprehensive investigation on neutralization antibodies against CCV in giant panda population in China. The results of study showed that the infection of CCV in giant panda population was universal, which has posed a threat to the health of giant panda. Therefore, it is incumbent on us to study safe and effective vaccines to protect giant panda against CCV infection.; 乔军夏咸柱夏咸柱杨松涛胡桂学胡桂学高玉伟孙贺廷赵忠鹏谢之景闫芳贺文琦

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