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谷延敏
作品数:
1
被引量:3
H指数:1
供职机构:
北京军区总医院
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
隋志甫
北京军区总医院
王驰
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常冬青
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杨蓉娅
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赵志力
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谷延敏
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中华医学杂志
年份
1篇
2009
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血管内皮细胞氧化应激损伤对骨髓间质干细胞趋化作用的体外观察
被引量:3
2009年
目的探讨氧化应激损伤血管内皮细胞定向趋化人骨髓间质干细胞(hMSC)的可能性。方法体外分离和培养hMSC,分别加入不同条件培养基进行成脂肪细胞、成骨细胞和成血管内皮细胞诱导分化;以免疫组织化学染色和流式细胞仪检测hMSC抗原表达。利用人脐静脉内皮细胞系ECV-304细胞建立氧化应激损伤趋化hMSC的细胞模型:在Transwell培养板下腔接种5×10^5ECV-304细胞并用3%H2O2(终浓度为0.01ml/ml)处理1h后,上腔内接种1×10^5hMSC,为损伤细胞+hMSC组;同时设未损伤细胞+hMSC组(Transwell板下腔接种未经H2O2处理的ECV-304细胞,上腔内接种hMSC)和单纯hMSC组(Transwell板下腔不接种ECV-304细胞)作为对照。培养12h后苏木精染色,倒置相差显微镜下计数各组细胞Transwell上腔迁移的hMSC数。另以酶联免疫吸附试验检测H2O2处理1h的ECV-304细胞(H2O2处理组)和未予H2O2处理ECV-304细胞(对照组)培养上清液中单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)和血管细胞黏附分子1(VCAM-1)浓度。结果hMSC经加入不同条件培养基诱导后可以分化为脂肪细胞、成骨细胞和血管内皮细胞。免疫组织化学染色和流式细胞仪检测显示hMSCCD29、CD44、CD90和CD106抗原呈阳性表达,CD31、CD34、CD45和CD49b抗原呈阴性表达。损伤细胞+hMSC组发生迁移的hMSC数为(8.00±0.22)个/高倍视野,明显高于未损伤细胞+hMSC组[(0.20±0.05)个/高倍视野,P〈0.01]和单纯hMSC组[(0.00±0.00)个/高倍视野,P〈0.01]。H2O2处理组细胞培养上清液中MCP-1和VCAM-1浓度分别为(69.2±3.5)、(114.0±7.5)ng/nd,均明显高于对照组[(62.5±3.6)ng/ml,P〈0.05;(97.2±5.0)ng/ml,P〈0.01]。结论血管内皮细胞氧化应激损伤可趋化hMSC定向迁移到损伤血管,其机制可能与氧化应激损伤导致的趋化因子MCP-1和VCAM-1浓度升高有关�
赵志力
杨蓉娅
谷延敏
王驰
隋志甫
常冬青
关键词:
间质干细胞
血管内皮细胞
氧化性应激
趋化作用
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