谢卫兵
- 作品数：24 被引量：63H指数：4
- 供职机构：南方医科大学更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金公安部部级科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学政治法律艺术更多>>
- EBV病毒全基因组cDNA探针的设计与制备(英文)被引量：2
- 2005年
- 目的设计和克隆所有EB病毒(EBV)已知和预计的编码基因作为cDNA探针用于构建EBV微阵列,以促进研究EBV在其相关疾病中的发病学作用.方法cDNA探针首先由Oligo6.0,Blast和Primer Primier软件设计和筛选全 EBV基因组探针,它们的长度被定在300～600 mer并且具有高度特异性.从B95-8细胞和NPC组织的基因组DNA和 RNA中,通过PCR和RT-PCR方法扩增这些探针,之后克隆入T/A克隆载体.所有的探针被测序鉴定.结果除LF1和LF3基因在B95-8细胞的EBV基因组中不存在外,其余85个基因片段(BWRFl基因有7个重复阅读框架)和两个EBERs基因被成功克隆.结论EBV cDNA探针的设计和克隆为制备EBV微阵列和进一步研究EBV基因组在其相关疾病中的作用奠定了基础.
- 方唯意郑文岭马文丽刘腾飞王爽谢卫兵李虹任彩萍姚开泰
- 关键词：CDNA探针基因克隆
- 可视化人鼻咽癌细胞模型5-8F-EGFP的建立
- 2009年
- 目的:利用pEGFP-N1质粒转染鼻咽癌细胞株,建立稳定表达绿色荧光蛋白的鼻咽癌细胞株5-8F-ECFP,为整体鼻咽癌可视化研究提供良好的试验材料。方法:利用脂质体转染法,将pEGFP-N1质粒转染鼻咽癌细胞株,通过G418抗性筛选、亚克隆扩增获得GFP稳定表达的人鼻咽癌细胞株5-8F-EGFP。结果:成功获得稳定表达GFP的人鼻咽癌细胞5-8F-EGFP细胞株,比较5-8F和5-8F-EGFP发现,两者生长曲线、细胞周期分布、裸鼠成瘤能力等都没有显著性差异。结论:我们建立了非G418依赖、稳定表达GFP且保持母株细胞特性的人鼻咽癌细胞株5-8F-EGFP,为鼻咽癌整体可视化研究打下了坚实基础。
- 刘腾飞谢卫兵刘莉姚开泰
- 关键词：鼻咽癌绿色荧光蛋白脂质体转染
- Caspase-11在甲基苯丙胺的毒性作用中诱导多巴胺能神经元的凋亡
- 目的：研究caspase-11介导的凋亡通路是否参与甲基苯丙胺损伤多巴胺能神经元的过程.方法：采用体外细胞模型以及体内动物模仿分别进行验证.其中细胞模型使用大鼠源性肾上腺嗜铬细胞瘤NGF诱导高分化的PC12细胞,而动物模...
- 黄伟业徐静涛王爱枫谭晓辉兰江维李丽增谢卫兵王慧君
- 关键词：甲基苯丙胺神经毒性凋亡
- TGFBR2表达下调可能是鼻咽癌的恶性生物标志被引量：4
- 2008年
- 目的该研究拟探索在鼻咽癌发病过程中起着重要作用的关键癌基因或抑癌基因。方法利用基因芯片比较了混合的鼻咽癌细胞株与混合的非癌人鼻咽组织之间的差异表达基因。利用MILANO在线分析程序,寻找已知的癌基因和抑癌基因。免疫组化分析鉴定重要癌基因或抑癌基因表达结果的可靠性。结果MI-NANO分析所有差异表达基因后发现,在鼻咽癌细胞中表达下调比较明显的TGFBR2基因是一个重要的抑癌基因,该基因在TGFβ抑制性信号通路中起着重要的作用,参与了许多肿瘤的发病过程,而且该基因在鼻咽癌的研究中尚未见报道。在免疫组化共检测了56个非癌鼻咽组织和49个鼻咽癌组织后,Mann-Whitney test统计分析发现,与非癌鼻咽组织相比,TGFBR2在鼻咽癌组织中表达明显下调(P<0.001)。结论TGFBR2参与了鼻咽癌发病过程,其表达下调可能促进了鼻咽癌的发生发展,但是否与转移、预后及复发等临床参数相关还有待进一步研究。
- 方唯意江庆萍刘真李欣刘求真王爽谢思明鲁娟刘腾飞谢卫兵涂露霞黄静姚开泰
- 关键词：鼻咽癌基因芯片免疫组化
- 鼻咽癌淋巴结转移动物模型的建立及其转移相关标签基因的筛选被引量：9
- 2008年
- 目的建立稳定的鼻咽癌(NPC)淋巴结转移模型,筛选鼻咽癌淋巴结转移的候选标志基因。方法我们用鼻咽癌5-8F-EGFP细胞株建立了稳定淋巴结转移可视化裸鼠模型,筛选获得具有淋巴结转移潜能的5-8F-LN鼻咽癌细胞。通过文献数据挖掘获得乳腺癌,头颈部鳞癌等肿瘤的转移标签基因和淋巴结转移标签基因,结合鼻咽癌5-8F和6-10B细胞株约307个差异性表达基因得到21个重叠的基因,最终分析得到3个可能促进恶性肿瘤转移的高表达基因:ADM,IRF1和CAV1。通过荧光定量PCR验证在5-8F-EGFP,6-10B-EGFP,5-8F-LN和NP69细胞中的表达情况。结果IRF1在5-8F-EGFP、6-10B-EGFP和5-8F-LN中的表达远高于在NP69中的表达,且差别有统计学意义(P=0.008、0.022、0.006);CAV1在5-8F-EGFP中的表达高于其在6-10B-EGFP中的表达(P=0.014);ADM在4种细胞中的表达无明显差别。结论IRF1可能在鼻咽癌演进过程中起着重要作用,而CAV1在5-8F-EGFP中的相对高表达可能和其高转移特性有关。
- 冷雷刘腾飞黄仲曦谢卫兵姚开泰
- 关键词：鼻咽癌荧光定量PCR
- 氨基酸浓度对昆明小鼠胚胎体外发育的影响(英文)被引量：4
- 2005年
- 目的探讨培养液中氨基酸成分对植入前昆明小白鼠胚胎发育的影响,摸索植入前胚胎体外培养氨基酸的最佳浓度。方法从超排昆明小鼠输卵管中取出的630枚受精卵均分为7组,分别在经添加不同浓度Eagle's氨基酸的去牛血清白蛋白KSOM培养液(mKSOM、mKSOM+1/16AA、mKSOM+1/8AA、mKSOM+1/4AA、mKSOM+1/2AA、mKSOM+ AA、mKSOM+2AA)中培养,对比观察各组胚胎体外发育的过程。用卡方检验分析添加各浓度氨基酸的培养液培养效率的差别,并将8细胞发育率和囊胚发育率分别与相应的氨基酸浓度进行曲线拟合分析。结果与未添加氨基酸组对比,添加氨基酸组胚胎发育率高,8细胞胚和囊胚的形成率与培养液中氨基酸的浓度关系均符合三次模型,在氨基酸为1/2浓度时8细胞胚和囊胚的形成率均达到最高。结论氨基酸对胚胎的体外发育有促进作用,但含有高浓度氨基酸的培养液培养效果反而有所下降,可能是由于高浓度的氨基酸影响胚胎的代谢和渗透压的改变,且氨基酸分解及胚胎代谢所产生的铵对胚胎有毒性作用。
- 邓星王爽黄吴键刘求真谢卫兵张庆凌方唯意刘腾飞韩春杜莎莎吴丽莎丁彦青姚开泰
- 关键词：小鼠植入前胚胎发育氨基酸
- mCD99L2基因沉默对小鼠B淋巴瘤细胞系A20细胞转化为H/RS样细胞的影响被引量：12
- 2007年
- 目的探究mCD99L2基因沉默对小鼠B淋巴瘤细胞系A20细胞转化为H/RS样细胞的影响。方法重组SiRNA表达质粒LV-mCD99L2,体外转染内源性mCD99L2表达阳性的A20细胞,筛选出稳定表达LV质粒的细胞株并扩增培养;采用免疫荧光技术和流式细胞仪检测转化前后两组细胞鼠源CD30表达;透射电镜观察转化后细胞超微结构的形态特点;细胞计数方法动态观测培养细胞干扰组A20-LV-mCD99L2和未经干扰组A20细胞的H/RS样细胞(直径≥25μm)转型率,以人霍奇金淋巴瘤细胞系L428作为对照;采用流式细胞仪检测细胞周期变化。结果获得了稳定表达LV质粒的单克隆细胞株A20-LV-mCD99L2;免疫荧光标记显示转化细胞CD30(+);流式细胞仪检测A20-LV-mCD99L2细胞CD30阳性率为54.4%;透射电镜观察转化后细胞核增大,可见单核、双核及多核,核仁明显的H/RS样细胞;干扰组H/RS样细胞的转型率明显高于未经干扰组(P<0.01)。两组处于S期的细胞无明显差异,两组细胞均未见凋亡峰。结论mCD99L2基因沉默可诱导小鼠B淋巴瘤细胞系A20细胞转化为H/RS样细胞。
- 何滢沈丽佳李祖国谢卫兵谢思明刘芳刘腾飞蒋会勇赵彤
- 关键词：肿瘤细胞转化H/RS细胞
- 甲基苯丙胺所致的大鼠神经毒性损伤及nNOS抑制剂的保护作用被引量：6
- 2014年
- 目的探讨神经元型一氧化氮合酶(nNOS)在甲基苯丙胺(METH)所致大鼠中枢神经系统氧化应激损伤中的作用机制。方法建立METH中毒动物模型,并给予nNOS抑制剂7硝基吲唑(7-NI)预处理,观察各组间动物行为学的变化,并检测nNOS表达、多巴胺(DA)含量、硝基化蛋白表达及凋亡等指标。结果 METH组大鼠纹状体中nNOS蛋白表达水平明显升高,而METH+7-NI组nNOS表达水平较METH组明显降低。METH组DA明显降低(P<0.01),而METH+7-NI组、7-NI组与对照组比较,DA无差异(P>0.05)。METH组硝基化蛋白含量明显升高(P<0.01),而METH+7-NI组硝基化蛋白表达较METH组明显降低(P<0.05)。METH组与对照组相比,凋亡细胞数明显升高(P<0.01),而7-NI对凋亡的增高表现出明显的保护作用(与METH组相比P<0.01)。METH组和METH+7-NI组的动物刻板行为评分均明显高于7-NI和对照组(P<0.01),METH、METH+7-NI组间差异无显著性(P>0.05)。结论METH可导致大鼠大脑纹状体nNOS蛋白表达水平增高、DA含量的降低、硝基化蛋白水平升高及细胞凋亡增多等多种神经毒性表现,7-NI能部分减轻其神经毒性作用。METH明显增加大鼠的不自主刻板运动,而应用7-NI预处理后,对刻板行为的改善并不明显。
- 徐静涛张付杨幸怡谢卫兵李丽增刘超王慧君
- 关键词：甲基苯丙胺神经毒性神经元型一氧化氮合酶7-硝基吲唑
- 利用cDNA微阵列鉴定鼻咽癌生物标志物
- 鼻咽癌发病是一个极复杂的过程,其中涉及了遗传易感性,EB病毒感染的诱导和遗传上的改变。虽然基因谱表达的改变,特别是癌基因和抑癌基因在鼻咽癌研究上已经有报道,但这些基因的表达改变不能完全阐明鼻咽癌的发病机制。为了更好的理解...
- 方唯意王安娜谢卫兵刘腾飞李欣刘真王爽刘求真江庆萍谢思明姚开泰
- 关键词：鼻咽癌MILANO癌基因抑癌基因
- 文献传递
- A20诱导沉默对鼻咽癌细胞生物学行为的影响被引量：2
- 2018年
- 目的观察A20基因表达下调对鼻咽癌细胞体内外增殖、侵袭及转移能力的影响。方法筛选并建立Tet－on基因表达系统诱导A20沉默的鼻咽癌肝转移亚系5－8F－H3细胞系，实时荧光定量PCR、Western印迹检测干扰效率；CCK8法、平板克隆形成实验检测A20对5－8F－H3增殖能力的影响；流式细胞仪检测细胞周期；侵袭小室检测A20对5－8F－H3侵袭能力的影响；裸鼠皮下成瘤实验和体内转移实验检测经强力霉素（DOX）诱导A20基因表达沉默对5－8F－H3在体内增殖及转移能力的影响。结果可诱导沉默A20的鼻咽癌细胞5－8F－H3/A20－shRNA构建成功。5－8F－H3/A20－shRNA经DOX诱导后，A20基因mRNA及蛋白的表达均下调（均P〈0.01）；CCK8法（F＝18.542，P＝0.003）、平板克隆形成实验（F＝40.080，P〈0.001）及流式细胞术检测实验（F＝7.398，P＝0.024）结果显示A20基因表达下调明显抑制5－8F－H3在体外增殖能力；侵袭小室检测结果显示A20基因表达下调抑制5－8F－H3在体外侵袭能力（F＝26.157，P〈0.001）。裸鼠皮下成瘤实验和体内转移实验结果显示A20基因表达下调明显抑制5－8F－H3在裸鼠体内的成瘤和转移能力。结论A20与鼻咽癌多种恶性生物学行为密切相关，有望成为鼻咽癌潜在治疗靶点。
- 刘芳谢卫兵周来勇柳玉红方唯意姚开泰
- 关键词：鼻咽肿瘤A20基因基因表达调控肿瘤侵润
