胡嘉淼
- 作品数:4 被引量:8H指数:2
- 供职机构:暨南大学生命科学技术学院生物工程学系更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学轻工技术与工程更多>>
- 基于Red重组系统构建含Flag标签标记UL23基因的重组人巨细胞病毒
- 2012年
- 利用来源于λ噬菌体的Red系统,将Flag标签及两侧带有FRT位点的卡那霉素抗性基因片段插入原HCMV TowneBAC中UL23基因3'末端区域,通过卡那抗性筛选带有抗性标记的重组菌株,并通过表达重组酶FLP的质粒pCP20去除卡那霉素抗性基因,得到带有Flag标签标记UL23基因和单一FRT位点的突变BAC。重组后的BAC分子同质粒pcDNA3.1(+)-pUL82共转染HFF细胞后重建重组HCMV。Western blotting检测证实所构建重组病毒能够表达含Flag标签标记的pUL23蛋白。此含有Flag标签标记UL23基因的重组HCMV的成功构建为了进一步研究人巨细胞病毒UL23基因及其产物的功能提供依据。
- 胡嘉淼肖静刘明亮曾宝娟李婧惠李继东周天鸿冉艳红李弘剑
- 关键词:RED同源重组
- 亚甲基蓝/光化学法对模拟受感染牛奶中大肠杆菌的灭活作用
- 2012年
- [目的]研究亚甲基蓝/光化学法对模拟受感染牛奶中大肠杆菌的灭活作用。[方法]以模拟感染了大肠杆菌的磷酸盐缓冲液(PBS)为参照系,通过平板菌落计数法观察不同浓度的亚甲基蓝(MB)和不同光照时间的溴钨灯光源对模拟感染大肠杆菌的不同浓度牛奶的光化学法灭菌效果。[结果]0.5×10-1μg/ml的亚甲基蓝在光功密度为200 mW/cm2的溴钨灯光照10 min情况下可以杀灭PBS中99%以上的大肠杆菌;而在同样光源下2,.0μg/ml的亚甲基蓝,光照10 min方可杀灭牛奶中99%以上的大肠杆菌。[结论]亚甲基蓝/光化学法对模拟受感染牛奶中的大肠杆菌具有良好的灭活作用,且溶液的光通透性可能是影响光化学法灭菌技术效果的一个重要因素。
- 胡嘉淼
- 关键词:亚甲基蓝大肠杆菌
- 人DNAJB6蛋白与人巨细胞病毒皮层蛋白pUL23相互作用的鉴定被引量:6
- 2009年
- pUL23是人巨细胞病毒(HCMV)UL23基因编码的皮层蛋白.HCMV皮层蛋白与病毒颗粒的形成、病毒转移、免疫调控等病毒生活过程相关.利用GAL4酵母双杂交系统筛选人胚肾cDNA文库,获得与人巨细胞病毒皮层蛋白pUL23相互作用的宿主蛋白分子DNAJB6[DnaJ(Hsp40)homolog,subfamily B,member 6].回复酵母双杂交、体外GST-Pull down和免疫共沉淀试验再次确认两者之间的相互作用.该结果为进一步研究pUL23蛋白在HCMV生活周期中的作用机制提供依据.
- 姚伙旺李实骞胡嘉淼陈业志邹奕张欣李月琴周天鸿李弘剑
- 关键词:人巨细胞病毒酵母双杂交蛋白质相互作用
- 利用酵母双杂交系统筛选与人巨细胞病毒皮层蛋白pUL23相互作用的病毒编码蛋白被引量:3
- 2011年
- 人巨细胞病毒(HCMV)UL23基因编码病毒皮层蛋白,该基因缺失时,病毒在人包皮成纤维细胞(HFF)中的繁殖速度加快.为进一步阐述HCMV UL23基因编码产物pUL23的功能及调控机制,采用鸟枪法构建了融合于GAL4活性区域的HCMV Towne株基因组随机表达文库.利用酵母双杂交技术,以pGBKT7-UL23为诱饵质粒,从构建的HCMV基因组表达文库中筛选到与pUL23相互作用的病毒编码蛋白pUL24.GST-pull down实验和免疫共沉淀实验进一步确认两种病毒蛋白之间的相互作用.结果表明,构建的HCMV基因组表达文库能够用于GAL4酵母双杂交系统筛选与诱饵蛋白相互作用的病毒自身编码蛋白.病毒蛋白pUL23和pUL24之间具有相互作用,这为进一步阐述pUL23在HCMV感染过程中的功能提供依据.该研究为揭示HCMV病毒感染机制奠定了基础.
- 肖静胡嘉淼肖小平员月明刘明亮曾宝娟李婧惠周天鸿冉艳红李弘剑
- 关键词:人巨细胞病毒BAC基因组文库蛋白质相互作用