肖君华
- 作品数：179 被引量：296H指数：8
- 供职机构：东华大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金上海市科学技术委员会资助项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学文化科学更多>>
- 特异区段替换小鼠性发育表型的研究被引量：1
- 2013年
- 目的了解性发育相关数量性状基因座(quantitative trait locus,QTL)(DXMit68-rs29053133)在近交系小鼠A/J和C3H/HeJ(C3H)中是否存在影响表型的序列差异,以帮助对候选基因进行筛选。方法利用A/J和C3H构建了针对该区段的特异区段替换系小鼠,并对其雌鼠的性发育相关性状进行研究。结果 A/J和C3H在这一QTL中染色体的序列差异,没有引起相关性状的明显差异。结论研究结果显示,A/J和C3H小鼠中该QTL区段中存在序列差异的基因并不是引起性发育表型产生差异的候选基因。
- 张婷婷仝莉肖君华李凯周宇荀
- 关键词：性发育表型
- 病原体微生物分型检测与耐药芯片研究(中科院)
- 曹慧敏赵建龙朱利平肖君华周文明肖振贤唐子圣赵淑娟张为赵辉
- 本成果利用芯片的工作原理，结合分子生物学、临床医学、材料科学和表面化学等学科技术，研制出用于多目的临床样本检测的多款DNA寡核苷酸芯片。这些芯片临床可用于包括：临床15种真菌的检测分型、临床18种曲霉菌的检测分型；淋病奈...
- 关键词：
- 关键词：芯片病原体核酸
- 一组引物及其设计方法和在单核苷酸多态性检测中的应用
- 本发明提供了一组用于扩增基因片段的引物，该组引物包括两对引物，两对引物或者是引物对中的上下游引物和模板完全配对；或者是引物对的上游引物或者下游引物之一和模板DNA完全配对，而另外一条和模板DNA不完全配对。如此设计而成的...
- 辛秀娟肖君华肖振贤魏东芝栾晓辉
- 文献传递
- MicroRNA-29b过表达慢病毒载体的构建及其生物学特性的研究被引量：1
- 2017年
- 目的:构建针对小鼠microRNA-29b过表达的慢病毒载体,研究其在小鼠神经元GT1-7细胞系中的生物学特性。方法:化学合成两条寡聚核苷酸单链,通过搭桥互补延伸成DNA双链,形成miR-29b的前体结构,将酶切后的慢病毒载体FUGW通过同源重组的方法与miR-29b的前体结构进行连接,构建相应microRNA-29b过表达慢病毒载体,并包装成病毒颗粒后转染小鼠神经元细胞系GT1-7,通过博来霉素药物筛选获得稳转株,RT-PCR检测相关基因在mRNA转录水平上表达量情况。结果:测序图谱证实重组慢病毒表达质粒f-F-miR-29b构建成功,GT1-7细胞稳转株中,miR-29b的表达量与对照组相比提高了约28倍,其靶基因DCX,Vdac1,Pten的表达量有所抑制,性发育相关基因LH-β,kiss-1,Inshulin,IGF-I,GPR54,GnRH,leptin-R没有明显变化。结论:利用慢病毒筛选的方法,成功在小鼠神经元GT1-7细胞中获得microRNA-29b过表达稳转株,为以后microRNA-29b的生物学特性的研究奠定了基础。
- 李文文曲妍佳肖君华李凯周宇荀
- 关键词：靶基因
- GPR54及其配体与青春期发育被引量：1
- 2005年
- 青春期的启动始于下丘脑脉冲性GnRH分泌的提高,kisspeptin-GPR54信号通路是最近发现能够调节GnRH分泌和正常青春期启动的重要因素,GPR54和它的配体kisspeptin在青春早期表达明显提高,活化下丘脑GnRH神经元,刺激垂体大量释放LH和FSH,引起性激素分泌增加和青春期出现。 kisspeptin的表达受性类固醇的调控,然而性类固醇不太可能是启动青春期前kisspeptin表达提高的关键因素。
- 甘晓红肖君华洪华珠
- 关键词：青春期GNRHGPR54KISSPEPTIN
- 一种在哺乳动物细胞系中敲除mir-505的方法
- 本发明涉及一种在哺乳动物细胞系中敲除mir-505的方法，通过体外合成sgRNA的核苷酸单链，再经过处理得到插入片段，随后将sgRNA利用同源重组或T4连接插入到41824载体中或42230载体中，转化至大肠杆菌的感受态...
- 邓倩云周宇荀常雪莹王斯佳肖君华李凯
- 文献传递
- miR-505-3p对GT1-7细胞株基因表达谱的影响
- 2016年
- 目的了解微小RNA 505-3p(miR-505-3p)对下丘脑GnRH神经元GT1-7稳转细胞株表达谱的影响。方法用慢病毒转染GT1-7细胞获得稳定表达miR-505-3p的细胞株,感染实验分为3组:空白对照组(未经处理的GT1-7细胞),阴性对照组(感染pLenti6.3-nc空病毒),实验组(感染pLenti6.3-miR-505-3p病毒)。采用实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,qRT-PCR)技术检测稳定细胞株中miR-505-3p的表达丰度,并进一步利用芯片检测对照组和实验组细胞的表达谱结合生物信息学方法探寻差异表达基因。采用GO分析和Pathway分析差异表达基因,解析miR-505-3p的功能。结果在稳定表达miR-505-3p的GT1-7细胞中,165个基因的表达量变化在2倍以上,这些基因主要参与细胞粘附、GTP分解代谢、神经系统发育等生物过程。结论 miR-505-3p可能通过影响下丘脑GnRH神经元中相应靶基因的表达调控细胞粘附、GTP分解代谢、神经系统发育等生物过程,和间隙连接、轴突导向和胃酸分泌等信号通路。
- 仝莉李雨王茂春周宇荀肖君华
- 关键词：表达谱
- 一种检测农田生态环境的高通量多重LDR分型试剂盒
- 本发明涉及一种检测农田生态环境的高通量多重LDR分型试剂盒，包括：农田16种物种的线粒体COI基因通用引物，上游：5′-GGTCAACAAATCATAAAGATATTGG-3′；下游：5′-TAAACTTCAGGGTGA...
- 赵丽亚李凯田俊策叶恭银陈强周宇荀肖君华
- 文献传递
- 基于RNA-seq的脂代谢相关基因Tmem176a功能分析
- 2022年
- 探讨在Hepa1-6细胞中过表达、敲低Tmem176a基因对脂质代谢途径的影响。将构建成功的Tmem176a慢病毒过表达载体、siRNA分别转染进Hepa1-6细胞中,将过表达或敲低Tmem176a后的Hepa1-6细胞进行RNA-seq、生物信息学分析、Real-Time PCR验证。与对照组相比,Tmem176a在Hepa1-6细胞中过表达182倍(P<0.05)和敲低0.2倍(P<0.05),OE-Tmem176a相较于OE-Vector差异表达基因共计424个,其中下调基因192个,上调基因共233个;KD-Tmem176a相较于KD-Scramble差异表达基因共计405个,其中下调基因248个,上调基因共157个,部分差异基因富集在脂肪的消化吸收、胆固醇代谢、甘油酯代谢、脂肪酸合成等代谢途径,Real-Time PCR验证部分差异表达的基因,差异基因表达水平的变化趋势与RNAseq一致。RNAseq结果提示Tmem176a基因会影响脂质代谢基因响应。Tmem176a表达水平改变会促进小鼠肝癌Hepa1-6细胞中脂质代谢基因表达水平发生显著变化。
- 崔茂生段维旺李晓宁汤晨李凯周宇荀肖君华
- 关键词：脂质代谢RNA-SEQ
- 利用慢病毒介导的shRNA在GT1-7细胞中敲低Srsf1及其对GnRH、Kiss1的影响
- 2018年
- 目的:探讨慢病毒介导短发夹RNA(shRNA)敲低丝氨酸/精氨酸富集剪接因子1(Srsf1)基因对小鼠GT1-7细胞中性发育相关基因促性腺激素释放激素(GnRH)、Kiss1的影响。方法:实验分为3组,即空白对照组、阴性对照组及shRNA干扰组。用Srsf1 shRNA慢病毒稳转GT1-7细胞,Real-time PCR和Western blot检测GT1-7细胞中Srsf1在mRNA和蛋白水平的变化,并检测稳转株中GnRH、Kiss1基因的表达情况。结果:慢病毒介导的shRNA成功感染了GT1-7细胞,与空白对照组及阴性对照组相比,shRNA干扰组中Srsf1在mRNA水平降低了45%(P<0.001),在蛋白水平敲低了42%(P<0.05)。在稳定低表达Srsf1的GT1-7细胞中,GnRH、Kiss1基因在mRNA水平也显著降低(P<0.05)。结论:成功的构建了Srsf1基因敲低的细胞株。在GT1-7细胞中敲低Srsf1基因会抑制GnRH、Kiss1基因的表达。
- 陈利李雨李凯周宇荀肖君华
