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蓝舌病、口蹄疫、小反刍兽疫和水泡性口炎多重PCR检测方法的建立被引量：5: 2015年; 为建立一种检测并鉴别蓝舌病病毒、口蹄疫病毒、小反刍兽疫病毒和水泡性口炎病毒感染的方法,针对蓝舌病病毒NS3基因、口蹄疫病毒3D基因、小反刍兽疫病毒N基因和水泡性口炎病毒N基因序列设计引物,优化反应体系和扩增条件,建立了一种同时检测4种病毒的多重PCR方法。对建立的多重PCR检测方法的特异性及敏感性进行检验,结果表明建立的多重PCR检测方法敏感性强、特异性良好,对4种病毒的最低检出限分别为PPRV 103 copies/μL、BTV 103 copies/μL、VSV 103 copies/μL和FMDV 102 copies/μL。本方法的建立对临床感染蓝舌病等4种病毒的病畜进行快速检测具有十分重要的意义。; 秦敏邹丰才杨云庆祝贺聂福平王煜杨俊叶玲玲周晓黎艾军; 关键词：蓝舌病口蹄疫小反刍兽疫水泡性口炎多重PCR

四种猪呼吸道疾病综合征病原多重PCR检测方法的建立及应用被引量：6: 2015年; 为建立同时检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、胸膜肺炎放线杆菌(APP)和猪肺炎支原体(M.hyo)的多重PCR方法,分别针对PRRSV的ORF1a基因、PCV2的ORF2基因、APP的OMLA基因和M.hyo的P46基因的保守区域设计4对特异性引物,优化反应体系及条件,建立了可同时扩增PRRSV(225bp)、PCV2(337bp)、APP(107bp)、M.hyo(176bp)相应基因的四重PCR方法。结果显示,该方法能单管同时特异地鉴别检测PRRSV、PCV2、APP、M.hyo 4种病原体,对猪瘟病毒、副猪嗜血杆菌、猪呼吸道冠状病毒、猪流感病毒、猪细环病毒及猪细小病毒等无特异性扩增,说明该PCR具有良好的特异性;方法的灵敏度分别为195、272、241、321pg/μL。应用该方法对重庆市的61份样品进行检测,其中PRRSV、PCV2、APP、M.hyo的阳性率分别为22.9%(14/61)、18.0%(11/61)、8.2%(5/61)和18.0%(11/61)。该方法的建立为临床上4个病原的快速鉴别诊断提供了有力的技术手段。; 陈玉燕杨俊聂福平王昱张姜琳秦敏肖进文王国民李应国蔡家利; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒猪圆环病毒2型胸膜肺炎放线杆菌猪肺炎支原体

施马伦贝格病毒核蛋白在昆虫细胞中的表达被引量：1: 2016年; 参照NCBI公布的施马伦贝格病毒(SBV)的N基因开放阅读框序列,设计了一对含特异性酶切位点的引物,扩增SBV N基因,将其克隆于昆虫杆状病毒表达载体p Fast Bac HTB,然后以该重组质粒转化DH10Bac感受态细胞,得到重组穿梭质粒Bacmid-SBV-N,将该重组穿梭质粒在脂质体介导下转染Sf 9昆虫细胞,得到表达SBV重组N蛋白的杆状病毒。通过SDS-PAGE和Western blot对重组N蛋白进行鉴定,表明该蛋白得到表达。本研究为以SBV核蛋白为基础的相关检测方法的建立提供了物质基础。; 秦敏郝俊虎祝贺邹丰才杨云庆杨素叶玲玲张永宁周晓黎艾军; 关键词：施马伦贝格病毒核蛋白杆状病毒昆虫细胞

云南某警犬基地犬肠道寄生虫病的调查与防控建议被引量：2: 2013年; 警犬感染寄生虫后,消耗大量营养物质,造成犬只生长发育受阻,导致消瘦、贫血、继发感染其他病原体,严重的引起死亡,某些人犬共患寄生虫,对犬和带犬民警的健康造成威胁。目前,尚未见关于云南地区警犬寄生虫病的报道。为此,本调查选择了云南某警犬基地开展警犬肠道寄生虫病的调查。; 杜晓鹏袁飞洲缪强秦敏樊雅婷邹丰才曹景锋; 关键词：肠道寄生虫病警犬继发感染发育受阻病原体

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秦敏