石继红
- 作品数：29 被引量：264H指数：8
- 供职机构：第四军医大学更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学化学工程更多>>
- 重组胸腺素α<,1>的纯化及活性
- 将胸腺素α<,1>基因4串体克隆于pTHioHisA融合表达载体(pTHioHisA-T(α<,1>④)，转化大肠杆菌TOP10。在IPTG诱导下，融合蛋白得到了高效表达。SDS-PAGE分析确定诱导表达 的融合蛋白占菌...
- 石继红张英起赵宁赵永同颜真
- 关键词：胸腺素蛋白质纯化生物活性融合蛋白
- 文献传递
- SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析小分子多肽被引量：111
- 2000年
- 目的 研究 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS- PAGE)显示小分子多肽的方法 .方法 观察不同方法处理的样品 ,上样量对电泳结果的影响及对分子量标准 (Mr 2 5 12～ 16 949)进行直线回归分析 .结果 样品的不同处理条件未见有差异 ;在该实验系统条件下上样样品为每孔 5～ 10μg较佳 ;分子量标准直线回归系数 r=- 0 .96 2 .结论 样品处理方便 ;上样量少 ;在 16 0 g· L- 1 T,6 0 g· kg- 1 C较低的丙烯酰胺含 6 mol· L- 1脲的分离胶中能够显示 Mr为 2 5 12的多肽 。
- 石继红赵永同王俊楼韩苇颜真张英起
- 关键词：SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳小分子多肽
- 观察骨髓多染性红细胞微核的简便方法被引量：1
- 1991年
- 本文以小鼠骨髓为材料,建立了一种显示骨髓多染性红细胞微核的简便可靠方法。该法具有结果准确,误差小;且条件简单,操作方便,易于掌握等优点。
- 石继红李永顺
- 关键词：微核
- EPO模拟肽基因4串联体的构建和表达被引量：13
- 2001年
- 目的 克隆和表达 EPO模拟肽基因 4串联体 .方法 设计了特殊的基因串联方案 ,在人工合成 EPO模拟肽全基因的基础上 ,将 EPO模拟肽基因由单体逐步地连接成 4串联体 .继而将获得的正确 EPO模拟肽 4串联体插入 p BV2 2 0表达载体诱导表达 .结果 构建的 EPO模拟肽基因 4串联体经酶切和 DNA测序分析 ,结果表明该基因串联体的序列与设计的序列完全相同 .EPO模拟肽 4串联体插入 p BV2 2 0载体后 ,重组菌经 42℃诱导 4h,SDS- PAGE分析结果显示 ,该串联体得到较高水平的表达 .凝胶扫描结果表明 ,其表达量约占菌体蛋白总量的 2 0 % .结论 EPO模拟肽基因
- 韩苇颜真王俊楼赵永同石继红张英起
- 关键词：模拟肽大肠杆菌质粒构建
- 天然胸腺素α_1基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达被引量：7
- 2003年
- 目的为降低CNBr裂解融合蛋白的毒副作用 ,改进利用基因重组技术制备胸腺素α1 (Tα1 )的流程工艺。方法按大肠杆菌惯用密码合成Tα1 基因 ,克隆于质粒pGEM 3Zf的EcoRⅠ和PstⅠ位点 ,裂解位点为羟胺裂解位点Asn Gly对应的核苷酸序列 ,测序正确后用BamHⅠ和BglⅡ位点串联为Tα1 4串体 (Tα1 ④ )和Tα1 8串体 (Tα1 ⑧ ) ,经再次测序确认后克隆入pThioHisA的EcoRⅠ和PstⅠ位点 ,转化大肠杆菌TOP1 0。结果经 1mmol LIPTG诱导4h获得了硫氧还蛋白 (thioredoxin)与Tα1 ④和Tα1 ⑧的融合表达 ,用离子交换色谱可纯化出融合蛋白 ,羟胺裂解融合蛋白 ,能够释放出Tα1 单体。结论羟胺能够裂解融合蛋白释放出天然Tα1 。
- 石继红韩苇颜真张英起
- 关键词：胸腺素Α1羟胺基因克隆
- 重组胸腺素α_1的分离纯化和活性测定被引量：7
- 2001年
- 目的 利用融合表达载体 p Thio His A的重组质粒p Thio His A- Tα1 4,转化大肠杆菌 TOP10得到的工程菌 ,来分离纯化表达的胸腺素 α1 (thym osin alpha1,Tα1 ) .方法 将高效表达融合蛋白的工程菌用细胞破碎器裂解 ,经 80℃热处理 ,离心上清采用 Q- Sepharose FF阴离子交换色谱纯化融合蛋白 .融合蛋白经 CNBr裂解后用常压离子交换色谱纯化Tα1 单体 .应用 SDS- PAGE,2 L - Tricine- SDS- PAGE和 HPL C进行鉴定 .结果 SDS- PAGE分析表明菌体表达的融合蛋白占菌体总蛋白的 40 0 g· kg- 1 .经 2 L - Tricine- SDS- PAGE分析证实 ,融合蛋白可裂解出 Tα1 单体 ,裂解物经简单的离子色谱可以纯化出 Tα1 单体 ,HPL C鉴定纯化出的 Tα1 纯度可达95 0 g· kg- 1以上 .利用 3H- Td R进行的生物活性测定表明 ,在致有丝分裂原 Con A存在的条件下 ,融合蛋白和 Tα1 单体均具有刺激小鼠脾淋巴细胞分裂增殖的能力 ,与化学合成的Tα1 相比具有相似的生物活性 .结论 该方法是分离纯化Tα1 简便易行 ,经济有效的方法 ;同时也为 Tα1
- 石继红张英起赵宁颜真韩苇赵永同
- 关键词：胸腺素Α1蛋白质纯化生物活性
- 人类精液溶脲脲原体感染与生殖细胞凋亡的关系被引量：3
- 2005年
- 目的:探讨人精液溶脲脲原体(ureaplasmaurealyticum,Uu)感染与生殖细胞凋亡的关系.方法:采用PCR检测精液中Uu.用瑞姬染色和末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)介导的脱氧核苷酸原位末端标记法(TUNEL)检测凋亡的生殖细胞.结果:Uu感染组凋亡的生殖细胞体积缩小、核固缩、染色质密度增加,聚集在核膜周边形成半月形,胞质有空泡.凋亡率为(14.5±4.6)%明显高于正常对照组(4.1±1.8)%(P<0.01).结论:Uu感染能引起生殖细胞凋亡的增加.
- 杨麦贵杨阳郝晓柯张竹映郑善銮石继红郭洪
- 关键词：精液溶脲脲原体生殖细胞凋亡
- 改变部分TIR对EPO模拟肽8串联体表达的影响被引量：3
- 2001年
- 目的 通过改变部分翻译起始区序列观察对 EPO模拟肽基因 8串联体表达的影响 .方法 设计和人工合成了部分翻译起始区域 (translation initiation region,TIR) DNA序列 ,将该序列插入 p BSEPOM8(含 EPO模拟肽基因 8串联体序列 )的 Eco RI和 X ba I位点 ,经 DNA测序确定正确重组质粒 ,再将 EPO模拟肽基因 8串联体 (含改建的翻译起始区域 )克隆到 p BV2 2 0载体的 Eco RI和 Bam HI位点 ,诱导表达 .结果 DNA测序证明 ,人工合成的 DNA序列已正确插入EPO模拟肽基因 8串联体的翻译起始区域 .该串联体基因插入 p BV2 2 0载体后 ,经 42℃诱导 ,在细菌裂解上清中出现一条相对分子质量为 2 2× 10 3(Mr)的新蛋白带 ,与 EPO模拟肽基因 8串联体的理论计算分子量相符合 .经薄层扫描证明该蛋白带约占细菌蛋白总量的 15 % .结论 通过改变部分翻译起始区域起动了 EPO模拟肽基因 8串联体的翻译 ,使原来不表达的 EPO模拟肽基因
- 韩苇颜真王俊楼赵永同石继红张英起
- 关键词：SD序列基因串联体
- 应用SDS-PAGE显示小分子多肽技术的探讨被引量：62
- 2001年
- 为探讨显示小分子多肽技术 ,应用SDS PAGE寻找更简单、快捷的分析小分子多肽的方法。采用 8%T ,3%C的丙烯酰胺浓缩胶和含 6mol/L脲 (或含 2 4 %的甘油 )的 16%T ,6%C的丙烯酰胺分离胶的双层不连续SDS PAGE和三羟基甘氨酸电泳缓冲液显示蛋白分子量标准 ( 2 512～16 94 9kD)和待测样品 ,并对蛋白分子量标准在这两种分离胶中进行了回归分析。结果表明在这两种条件下均能显示分子量小至 2 512kD的多肽 ;多肽样品在含脲和在含甘油的 2L T SDS PAGE中均有较好的显带 ;蛋白分子量标准的直线回归系数分别为r =- 0 966和r =- 0 964。它们是显示小分子多肽和估测其相对分子质量及对多肽分子进行进一步分析的更为简便易行的方法。
- 石继红赵永同张英起颜真韩苇王俊楼
- 关键词：SDS-PAGE蛋白质分析方法
- 溶脲脲原体感染的精液中IL-6与生殖细胞凋亡的关系
- 目的探讨溶脲脲原体（Uu）感染的精液中自细胞介索-6（IL-6）与生殖细胞凋亡的关系.方法采用PCR检测精液中Uu.酶标双抗体夹心（ELISA）法检测IL-6.用瑞-姬染色和末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）介导的脱氧核苷酸...
- 杨麦贵杨阳郝晓柯郑善銮石继红池巍
- 关键词：精液溶脲脲原体生殖细胞凋亡白细胞介素
- 文献传递
