黄刚
- 作品数：50 被引量：122H指数：6
- 供职机构：生物化学与分子生物学教研室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金重庆市科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- 人类乳头瘤病毒18 E7原癌蛋白对宫颈癌细胞系中组蛋白去乙酰化酶1表达的下调作用被引量：5
- 2010年
- 目的研究宫颈癌中人类乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)感染与组蛋白去乙酰化酶1(histone deacetylase1,HDAC1)表达之间的关系。方法运用RT-PCR和Western blot方法检测3株宫颈癌细胞中HDAC1表达水平。经脂质体2000介导将含有HPV18 E7基因的重组表达质粒瞬时转染人宫颈癌C-33A细胞,运用RT-PCR和Westernblot方法检测转染后C-33A细胞中HDAC1的RNA和蛋白水平改变。结果HDAC1在C-33A细胞中表达最高,CaSki细胞中次之,HeLa细胞中最少。C-33A细胞在转染HPV18 E7基因后HDAC1表达降低。结论HDAC1表达高低可能与HPV是否感染及感染亚型有关,HPV18 E7可能直接或间接下调细胞中HDAC1表达。
- 周鹏何凤田刘东擘黄刚龚薇许志臻
- 关键词：表观遗传学宫颈癌组蛋白去乙酰化酶
- B细胞活化因子与类风湿性关节炎
- 2010年
- B细胞活化因子具有刺激B细胞增殖和成熟的作用,过表达的B细胞活化因子与类风湿性关节炎等自身免疫疾病有着密切的关系,因此研究以B细胞活化因子为靶点治疗类风湿性关节炎具有一定的前景。本文对B细胞活化因子的表达、受体及其功能、BAFF在类风湿性关节炎发病机制中的作用、以B细胞活化因子为靶点治疗类风湿性关节炎等方面的研究现状及前景作综述。
- 潘志生黄刚陈斌
- 关键词：B细胞活化因子类风湿性关节炎自身免疫疾病
- 基因诊断的基本策略与临床应用被引量：1
- 2004年
- 钟小林黄刚张立何凤田
- 关键词：基因诊断疾病
- 针对单克隆抗体MGb1的重组抗独特型抗体的筛选与鉴定(英文)被引量：1
- 2006年
- 目的利用噬菌体呈现技术筛选针对抗胃癌单克隆抗体(简称单抗)MGb1的重组抗独特型抗体(抗-Id),为研制胃癌重组抗-Id瘤苗提供候选分子。方法以单克隆抗体MGb1免疫Balb/c小鼠,取脾分离mRNA。RT-PCR分别扩增抗体VL和VHcDNA,经linker DNA连接形成ScFv DNA。将ScFv DNA与载体pCANTAB5E的连接产物转化于大肠杆菌TG1,经M13KO7感染后,获得重组噬菌体抗体ScFv文库。以单抗MGb1对文库进行4轮淘选后,随机挑取克隆经ELISA筛选呈现抗-Id ScFv的噬菌体单克隆,进而经竞争ELISA对其所属抗-Id类型进行初步鉴定。结果VL和VHcDNA分别约为320和340 bp,ScFv DNA约为750 bp。抗体ScFv文库经四轮淘选后,在随机筛检的50个克隆中得到18个呈现抗-Id ScFv的噬菌体单克隆。在18个克隆中,有4个呈现β或γ型抗-Id ScFv。结论经重组噬菌体抗体技术成功地筛选到了针对单抗MGb1的噬菌体呈现型抗-IdScFv,从而为进一步获得能诱导抗胃癌免疫的抗-Id ScFv奠定了基础。
- 郑英如李蓉芬李力黄刚张立胡大强
- 关键词：胃癌抗独特型抗体噬菌体呈现技术肿瘤疫苗
- 优化生物化学教学中多媒体技术的应用被引量：9
- 2006年
- 通过介绍和总结多媒体技术在生物化学教学过程中的应用,探讨了应用多媒体技术在生化教学方法上的优化、教学组织形式的多样化、教学内容的丰富等方面的作用,提出了多媒体技术在生物化学教学中的应用的重要性。
- 黄刚何凤田李蓉芬彭家和
- 关键词：多媒体技术生物化学教学
- 以学科兴趣小组培养临床五年制学生科研思维及创新能力被引量：5
- 2013年
- 在临床医学五年制学生的培养过程中科研思维及创新能力的培养是学生基本素质和后续长远发展的关键环节,在基础课程阶段开展学科兴趣小组是达到这一目标的有效措施。在五年制学生中通过开展生物化学兴趣小组,可取得较理想的效果,开启了学生的科研思维,培养了其创新能力。
- 黄刚连继勤龚薇付晓红何凤田
- 关键词：生物化学
- 菊苣酸在HepG2细胞中对SOSC3表达的调节作用被引量：3
- 2012年
- 探讨菊苣酸(Chicoric acid,CRA)在人肝细胞系HepG2细胞中对细胞因子信号转导抑制分子3(Suppressor of cyto-kine signaling 3,SOCS3)表达的影响,用剂量为0、5和50μg.mL-1 CRA分别处理HepG2细胞24h后,经RT-PCR、Real-time PCR检测SOCS3基因的mRNA表达情况,再以上述不同剂量CRA分别处理细胞24h以及50μg.mL-1CRA分别处理HepG2细胞0、6、12、18和24h后,用Western blot法检测SOCS3基因的表达情况。研究结果显示CRA作用于HepG2细胞后,SOCS3基因的mRNA和蛋白表达水平随着CRA剂量增加而显著下降(p<0.01),且呈现一定的剂量依赖性;随着处理时间的增加,SOCS3蛋白表达水平下降更加明显,说明在翻译水平CRA不仅呈剂量依赖性,还呈时间依赖性下调SOCS3蛋白的表达。这些结果提示CRA可抑制SOCS3蛋白在HepG2细胞中的表达。
- 潘志生许志臻陈苓曦黄刚何凤田陈斌曾益军
- 关键词：菊苣酸HEPG2细胞胰岛素抵抗
- GW3965在Raji细胞中对BLyS表达的影响被引量：4
- 2011年
- 目的探讨肝X受体(liver X receptors,LXRs)的特异性激动剂GW3965在Raji细胞中对B淋巴细胞刺激因子(B lymphocyte stimulator,BLyS)表达的影响。方法 MTT法检测不同浓度的GW3965(浓度分别为0.5、5、10μmol/L)对Raji细胞活性的影响,观察时间为加入GW3965共孵育后24 h。用LXR的特异性激动剂GW3965刺激人B细胞淋巴瘤株Raji细胞,经RT-PCR检测LXR特异性靶基因三磷酸腺苷结合盒A1(ATP-binding cassette,ABCA1)mRNA的表达;经RT-PCR和Western blot检测BLyS的表达。结果对照组1‰DMSO D(492)为(0.632±0.055),0.5、5μmol/L和10μmol/L的GW3965 D(492)为(0.609±0.073)、(0.612±0.052)和(0.628±0.055)。LXR的特异性配体GW3965对细胞活性无影响(P>0.05)。GW3965作用于Raji细胞后,ABCA1 mRNA表达剂量依赖性上调,LXR活化后可在转录和翻译水平剂量依赖性下调抑制BLyS的表达。结论 LXR在Raji细胞中可抑制BLyS的表达。
- 黄艳黄刚胡长江曾益军许志臻陈岺曦何凤田宋方洲
- 关键词：B淋巴细胞刺激因子RAJI细胞
- 人可溶性TALL-2突变体的原核表达及纯化被引量：1
- 2006年
- 目的制备人可溶性(solubleTNFandapoptosisligand-relatedleukocyte-expressedligand2,sTALL-2)的3种突变体,为寻找sTALL-2的竞争抑性制剂创造条件。方法采用一步反向PCR,将编码sTALL-2第187位谷氨酰胺(Gln)的核苷酸序列分别置换为丝氨酸(Ser)、天冬氨酸(Asp)、精氨酸(Arg)的编码序列,测序正确后,亚克隆到原核表达载体pQE-80L;经IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Westernblotting鉴定表达产物,Ni2+-NTA柱层析纯化目和蛋白,进而经Sepha-dexG-75柱层析,获得同源三聚体分子。结果经一步反向PCR扩增后均得到441bp的DNA片段,测序分析表明分别为sTALL-2第187位谷氨酰胺残基置换为Ser、Asp、Arg的序列,3种突变体蛋白在大肠杆DH5α中获得成功表达,并得以有效纯化。结论成功制备了sTALL-2的3种突变体蛋白,为进一步探讨sTALL-2结构与功能的关系及寻找基于sTALL-2突变体的抗肿瘤分子奠定了基础。
- 刘宝英郑英如何凤田李蓉芬龚薇黄刚
- 关键词：突变体原核表达蛋白纯化
- 盐酸青藤碱促进EA.hy926细胞自噬机制的研究
- 目的:探讨中药单体提取物盐酸青藤碱促进EA.hy926细胞自噬的现象和机制。方法:盐酸青藤碱(终浓度分别为50、100μg/mL)处理EA.hy926细胞12 h后,Western blot检测LPS诱导下自噬标志蛋白L...
- 杨亭龚薇黄刚何凤田
- 文献传递
