鲜成玉
- 作品数：17 被引量：58H指数：6
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- IGF-1剪接变构体:力生长因子被引量：5
- 2005年
- 力刺激与基因表达之间的联系是生理学研究中一个新的重要领域。从基因表达水平研究力学信号的影响有着特殊的重要意义,生物有机体的存在是基因表达的结果,而力在生命活动的整个过程发挥着作用。在骨骼肌中,力刺激诱导胰岛素样生长因子-1(IGF-1)发生选择性剪接,产生能够激活卫星细胞而使细胞增殖的力生长因子(mechano growth factor,MGF),以及能促使细胞分化而形成肌管的肌肉型IGF-1(IGF-1Ea),这两种自分泌的局部生长因子在肌肉修复与再生中起着重要作用。
- 鲜成玉王远亮唐丽灵
- 关键词：胰岛素样生长因子-1力生长因子卫星细胞
- miRNA-20a作为哺乳动物宿主细胞凋亡调控靶标的应用
- 本发明公开了miRNA-20a作为哺乳动物宿主细胞凋亡调控靶标的应用，通过基因工程技术提高miRNA-20a在哺乳动物宿主细胞中的表达，可以间接抑制与细胞凋亡密切相关的转录因子E2F1的表达，进而提高细胞抗凋亡能力。
- 张兵兵鲜成玉侯汝涛徐洪记
- 文献传递
- 力生长因子
- 2005年
- 力学刺激能调控肌肉、骨骼等组织的基因表达,从而引起这些组织结构和功能的变化,如肌肉肥大、骨骼强壮等。在这些组织中,胰岛素样生长因子-1(IGF-1)是力学敏感因子。对骨骼肌进行的力学拉伸实验发现,力学刺激导致肌肉肥大的同时伴有2种IGF-1变构体的产生。这2种变构体是由于IGF-1基因插入突变和选择性剪切产生,分别命名为力生长因子(mechanogrowthfactor,MGF),肌肉型IGF-1(IGF-1Ea)。MGF能激活卫星细胞而使成肌细胞增殖,IGF-1Ea则促使成肌细胞分化形成肌管。进一步研究发现,在萎缩的肌肉中,这2种因子的产生发生障碍。
- 鲜成玉王远亮唐丽灵
- 关键词：胰岛素样生长因子-1力生长因子卫星细胞
- 应力作用下成骨细胞内IGF-1的剪接变异及表达被引量：9
- 2006年
- IGF-1能够促进成骨细胞的分化和骨的形成,应力刺激会促进其表达,因此认为IGF-1是联系力刺激与组织局部效应的效应分子.通过设计应力拉伸装置,对成骨细胞施加生理范围内静态和周期性动态拉伸刺激,应用不同的引物,通过RT-PCR扩增IGF-1mRNA,发现受到拉伸刺激的成骨细胞会有选择性剪接的IGF-1变构体产生,该变构体和肌肉中发现的力生长因子(mechano growth factor,MGF)序列一致.进一步通过半定量RT-PCR研究了应力刺激对L.IGF-1(liver-type)和MGF表达的调控.结果显示,拉伸刺激促进了IGF-1的表达,无论是L.IGF-1还是MGF周期性拉伸比静态拉伸具有更大的促进作用.MGF是拉伸刺激敏感的,仅在应力作用的细胞中发现,而且MGF比L.IGF-1更早地达到表达高峰.
- 鲜成玉王远亮张兵兵唐丽灵潘君罗彦凤江鹏李大军
- 关键词：胰岛素样生长因子力生长因子选择性剪接
- 流体剪应力对成骨细胞OPG和ODF表达的影响被引量：7
- 2007年
- 通过平板流动腔装置对大鼠成骨细胞施以流体剪应力,研究剪应力作用对成骨细胞中骨保护因子(osteoprotegerin,OPG),破骨细胞分化因子(osteoclast differentiation factor,ODF)基因表达的影响.分别考察了剪应力大小和作用时间,以及单一水平和梯度变化的剪切力加载方式的影响.运用RT-PCR和蛋白质印迹技术检测OPG、ODFmRNA和蛋白质表达的变化,结果显示,剪切力作用下OPG的表达得到促进,ODF的表达受到抑制,mRNA与蛋白质表达的变化一致,这种影响与剪切力的大小和作用时间有关.1.0和1.5N/m2的剪应力作用效果比0.5N/m2明显,梯度变化的作用方式在作用效果上与最后一个梯度水平相当的恒定剪应力单独作用没有显著差异,在加载的24h内剪应力对OPG、ODF表达的影响始终存在.这种影响使得OPG/ODF的平衡向着OPG占优的方向发展,这种变化意味着骨吸收会受到抑制,提示力学刺激可能通过OPG/ODF调控系统对骨代谢平衡进行调控.
- 张兵兵潘君王远亮鲜成玉向燕辛娟李永刚王喜云
- 关键词：流体剪应力成骨细胞骨保护因子破骨细胞分化因子
- 力生长因子E肽与应力刺激对成骨细胞基因表达的影响被引量：3
- 2012年
- 目的应用基因芯片技术分析在力生长因子E肽(MGF-Ct24E)和应力作用下成骨细胞基因表达的差异。方法体外培养原代成骨细胞,分别对细胞施加周期性拉伸刺激(应变12%,频率0.5 Hz)和MGF-Ct24E(50 mg/L)直接作用,基因芯片技术分析力学刺激和MGF-Ct24E作用对原代成骨细胞基因表达谱的影响,并用定量PCR验证基因芯片实验结果。结果与对照组相比,力学加载组共发现差异表达基因1 866个,其中上调基因1 113个,下调基因753个;MGF-Ct24E处理组共发现差异表达基因1 178个,其中上调基因796个,下调基因382个。GO分析发现两者的差异基因表达谱具有一致性,并且差异表达基因主要涉及细胞增殖与分化调节、细胞对应力刺激的响应和力学转导通路等。定量PCR实验结果验证的差异表达基因与芯片实验结果一致。结论基因表达谱分析显示应力刺激和MGF-Ct24E作用对成骨细胞的基因表达具有类似的调控效应,为后续使用MGF-Ct24E治疗骨修复以弥补应力刺激不足的研究提供了新的思路。
- 林福春张兵兵辛娟向燕鲜成玉邓墨渊彭琴王远亮
- 关键词：成骨细胞力生长因子应力刺激基因芯片基因表达细胞培养
- 拉伸刺激下MGF在成骨细胞中的表达及亚细胞定位分析被引量：8
- 2009年
- 力生长因子(mechano-growth factor,MGF)是在成肌细胞中发现的一种对拉伸刺激敏感的生长因子,该生长因子也可能在其他的力效应细胞中由力学刺激产生.通过设计细胞拉伸装置,对成骨细胞施加不同时段的周期性动态拉伸刺激.定量分析mRNA和蛋白质表达显示,周期性拉伸刺激下成骨细胞中的MGF mRNA和蛋白质水平快速提高,mRNA的水平在加载6h达到最高峰,与静态对照组相比提高5倍,而MGF的蛋白表达需要加载12h达到最高,与对照相比提高了5.2倍,随后二者分别降低,在24h达到本底水平.荧光免疫细胞化学技术检验MGF在细胞中的分布发现,MGF具有核分布的特点.因此得出结论,周期性拉伸刺激能刺激成骨细胞快速表达,MGF核分布的特点暗示MGF可能是一种自分泌作用因子.
- 张兵兵鲜成玉罗彦凤王远亮
- 关键词：力生长因子胰岛素样生长因子-1成骨细胞亚细胞定位
- 力生长因子在大肠杆菌中的表达及活性分析被引量：12
- 2008年
- MGF(Mechano-growth factor)是一种IGF-1变体形式,研究发现该因子具有应力敏感性,并且具有促进肌肉肥大、再生以及神经损伤修复的功能。通过RT-PCR从拉伸刺激的人成骨细胞中克隆MGF cDNA序列,并去除5'端9bp的序列,使N端缺少对肠激酶(Enterokinase,EK)具有抑制作用的脯氨酸,将截短型MGF(des(1-3)MGF)cDNA序列克隆入pET32a(+)质粒,构建重组表达质粒。重组质粒转化E.coli BL21(DE3),在30oC培养下以可溶形式表达融合蛋白Trx/des(1-3)MGF,采用离子交换层析和Ni2+金属亲和层析,获得纯度95%以上的融合蛋白。再对融合蛋白EK酶切,rpHPLC分离获得纯度达98%的des(1-3)MGF,SDS-PAGE及质谱分析蛋白分子量与理论值相符。生物活性实验显示,所制备的des(1-3)MGF比des(1-3)IGF-1更显著的促进MC3T3-E1细胞的增值和迁移。
- 张兵兵江鹏鲜成玉李玉筱李大军唐丽灵王远亮
- 关键词：胰岛素样生长因子-1力生长因子原核表达增殖
- 机械拉伸对大鼠成骨细胞生理活性及IGF-1、力生长因子表达的影响
- 本文采用生物力学、细胞生物学、分子生物学等方法，研究机械拉伸刺激对成骨细胞生理活性和生长因子表达的影响，重点就力学信号——基因表达关系进行了初步探索。主要工作和结论如下：
① 采用消化法从初生大鼠的颅盖骨中分离...
- 鲜成玉
- 关键词：成骨细胞机械拉伸生理活性IGF-1力生长因子
- 文献传递
- 力生长因子在制备无血清培养耐受型哺乳动物工程细胞中的应用
- 本发明属于细胞工程和基因工程重组技术领域，涉及力生长因子（Mechanogrowthfactor,MGF）在制备无血清培养耐受型哺乳动物工程细胞中的应用，通过将MGF编码基因转入哺乳动物细胞，可以构建出能自主表达MGF的...
- 张兵兵鲜成玉王远亮徐洪记赵源
- 文献传递
