魏涛 作品数:7 被引量:52 H指数:4 供职机构: 广东省中医院 更多>> 发文基金: 广东省医学科学技术研究基金 珠海市软科学研究计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
实时荧光重组酶聚合酶扩增快速检测临床常见曲霉菌方法的建立 被引量:2 2020年 目的:针对曲霉菌属转录间隔区ITS1设计引物、探针,利用实时荧光重组酶聚合酶扩增(Real-time RPA)技术建立一种快速、准确、经济的临床常见曲霉菌检测鉴定方法。方法:利用建立的实时荧光重组酶聚合酶扩增体系对标准菌株及临床标本提取的DNA进行扩增,验证该方法的性能。结果:本研究针对曲霉菌属转录间隔区ITS1设计引物、探针利用RPA试剂盒(荧光型)建立了Real-time RPA扩增体系,在15分钟内即可检测出临床常见的四种曲霉菌;特异性试验结果显示反应体系只对烟曲霉、黄曲霉、土曲霉、黑曲霉四种曲霉呈现出明显的扩增曲线,而其它细菌和真菌均无扩增曲线。灵敏性试验显示最低检出限为10-3 ng/μL。临床验证试验的12份曲霉菌均有较高的扩增效应。结论:本研究建立的Real-time RPA方法能快速、特异、灵敏地检出烟曲霉、黄曲霉、土曲霉、黑曲霉等临床常见曲霉菌,为曲霉菌的快速、现场检测提供了一种新的思路。 龙炫辉 杨永强 魏涛 邓宁波 桑晔 唐文志 曾朱君关键词:曲霉菌 生物素链霉亲和素系统基因芯片检测ApoE基因多态性 被引量:3 2016年 目的建立一种准确、简便、低成本的临床实用型Apo E基因多态性芯片检测技术。方法通过基因文库获取Apo E基因全序列;以Primer Primer 5.0设计探针和引物,oligo6验证。摸索PCR扩增条件,产物测序确认;质粒构建并测序确认。探针点样在含链亲蛋白的基因芯片(专利技术)上,待检样品以生物素d UTP标记3'端进行扩增,然后与基因芯片杂交洗脱,阳性结果为纳米金紫红色的圆点状,肉眼即可判断实验结果。以本法检测160例临床样本,并进行测序验证。结果基因芯片检测完毕后通过肉眼识别紫色点状(生物素-链霉亲和素系统biotin-streptavidin systems,BSAS)分布位置,由此可准确分辨Apo E基因型。临床样本实测结果与测序结果具高度一致性(kappa=0.971,P<0.001)。结论在具备标准基因实验室的条件下即可应用此技术进行Apo E基因多态性分析,可临床常规应用。 许睿 宋家武 乔薇 黄小燕 郭国威 魏涛 杨永强关键词:载脂蛋白E 基因芯片 基因型 基因多态性 重组酶聚合酶等温扩增快速检测肺炎支原体方法的建立和初步应用 被引量:4 2021年 目的:建立基于重组酶聚合酶扩增技术(RPA)技术快速检测肺炎支原体的方法。方法:本研究以肺炎支原体编码P1黏附蛋白为靶基因,利用Primer Premier 5软件进行引物、探针的设计,最终筛选出最佳引物。同时设计相应的实时荧光定量PCR(RT-PCR)引物用于后续的验证试验。对反应体系试剂比例、反应时间、反应温度、引物探针浓度进行确定。肺炎支原体、解脲支原体、人型支原体、肺炎克雷伯菌、肺炎双球菌、大肠杆菌和链球菌作为对照评估RPA检测肺炎支原体的特异性及敏感度。结果:RPA快速检测肺炎支原体方法仅需14 min,检测灵敏度达200 copies/mL;6种非肺炎支原体均不能扩增,特异性较高。结论:本研究建立了肺炎支原体的RPA快速检测方法,具有迅速、简便、经济等优势,为肺炎支原体的快速检测提供一个新的有利工具。 杨永强 龙炫辉 魏涛 邓宁波 桑晔 唐文志关键词:肺炎支原体 罗氏cobas c702全自动生化分析仪检测系统性能验证 被引量:4 2016年 目的对新的检测系统罗氏cobas c702全自动生化分析仪的分析性能进行验证。方法按美国临床实验室标准化协会(CLSI)指南文件EP5-A2、EP15-A2、EP6-A2的要求,对罗氏cobas c702全自动生化分析仪的精密度、准确度、线性范围等3个性能进行验证,并与厂商声明的性能或公认的质量标准进行比较。结果该全自动生化分析仪检测的批内精密度小于1/4允许总误差(TEa),日间精密度和总精密度小于1/3 TEa,符合《医学实验室质量和能力认可准则在临床化学检验领域的应用说明》中对分析性能的要求;对卫生部20份室间质控品检测结果与靶值进行比对,结果全部满分,显示准确度良好;线性范围与厂商提供的性能指标相符。结论罗氏cobas c702生化分析仪检测系统精密度、准确度及线性范围等主要性能在该实验室均达到了相关标准的要求。 魏涛 钟志娟 许坚锋 孔伟圣关键词:全自动生化分析仪 精密度 血脂、总胆红素、尿酸及超敏C反应蛋白联合检测在冠心病诊断中的应用价值 被引量:5 2021年 目的了解联合检测血脂、总胆红素(TBil)、尿酸(UA)及超敏C反应蛋白(hs-CRP)对冠状动脉粥样硬化性心脏病(CHD)的诊断价值。方法检测80例CHD(试验组)、80例健康体检者(对照组)血脂、TBil、UA、hs-CRP水平,应用受试者工作特征曲线(ROC曲线)比较各指标联合检测时的灵敏度、特异度及ROC曲线下面积(AUC)的差异。结果CHD组血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、UA及hs-CRP水平高于对照组,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、TBil水平则低于对照组(P<0.01或0.05)。血脂4项联合检测的AUC和灵敏度明显高于单项检测;TG-HDL-LDL-UA-TBil-hs-CRP联合检测的灵敏度最高。结论血脂、TBil、UA、hs-CRP联合检测的诊断效能明显高于单项检测,可作为CHD危险性指标。 许坚锋 钟志娟 郭国威 李慎果 魏涛关键词:冠心病 血脂 胆红素 尿酸 超敏C反应蛋白 分级检验在肾脏生化中的应用 被引量:34 2011年 目的探讨分级检验在肾脏生化检验中的应用。方法对299例标本进行分级检验及传统的拉网式检验,检验项目包括尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、胱抑素C(CysC)。结果在299例病例中共有297例病例与传统拉网式检验结果及临床相符。结论分级检验在肾脏生化检测中与传统的拉网式检验有很好的相关性。 廖春盛 戴小波 魏涛 郭国威 陈锦文 温小平 唐文志关键词:肾疾病 尿素氮 肌酐 胱抑素C SysmexCA-1500自动凝血分析仪的性能 2018年 目的评价Sysmex CA-1500自动凝血分析仪检测系统的分析性能。方法按美国临床实验室标准化协会(CLSI)的指南文件EP5-A2,EP15-A2,EP6-A2的要求以及中国行业标准文件等对Sysmex CA-1500自动凝血分析仪的精密度、准确度、线性范围、可报告范围、携带污染率等主要性能进行验证,并与厂商声明的性能或公认的质量标准进行比较。结果批内精密度小于1/4 TEa,日间精密度和总精密度小于1/3 TEa(CLIA 88);对卫生部10份室间质评物检测结果与靶值进行比对全部满分,显示准确度良好;线性范围与厂商提供的性能指标相符;携带污染率影响很小,完全可以满足实验要求。结论 Sysmex CA-1500自动凝血分析仪检测系统精密度、准确度、线性范围、可报告范围、携带污染率等主要性能均达到了相关标准的要求。 李慎果 钟志娟 许坚锋 魏涛关键词:精密度 携带污染率