高瑞娟
- 作品数：27 被引量：33H指数：4
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 沙旋覆花石油醚部位洗脱组分的体外抗肿瘤活性研究
- 2024年
- 采用CCK-8法从沙旋覆花中筛选出具有抗肿瘤活性的石油醚部位洗脱组分,研究了其对人食管癌细胞Eca109增殖的抑制作用,并通过4′,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色法探究了其对Eca109细胞抑制作用的方式。结果表明,沙旋覆花石油醚部位洗脱组分(除23^(#)外)对Eca109细胞具有不同程度的抑制作用,其中71^(#)组分的抑制作用最强,对Eca109细胞的IC_(50)值为8.19μg·mL^(-1);沙旋覆花石油醚部位洗脱组分可通过诱导细胞裂亡和凋亡发挥抗食管癌作用,为后续开展旋覆花属植物抗食管癌活性成分筛选与药效评价奠定了基础。
- 赵婷婷高瑞娟郭君婷叶斯木·塔拉甫别克刘桂花
- 关键词：石油醚部位体外抗肿瘤活性
- 抗明胶酶单链抗体联合Endostar显示协同抗肿瘤作用
- 高瑞娟李亮尚伯杨赵春燕盛唯瑾李电东甄永苏
- 一种针对间皮素的单克隆抗体及应用
- 本发明公开了一种针对间皮素的单克隆抗体及应用。本发明所提供的抗人间皮素的单克隆抗体或其抗原结合部分，含有名称为V<Sub>H</Sub>的重链可变区和名称为V<Sub>L</Sub>的轻链可变区，所述V<Sub>H</S...
- 苗庆芳周丹丹段爱军高瑞娟孙丽平张兰文谢梓慧甄永苏
- 抗明胶酶单链抗体联合Endostar显示协同抗肿瘤作用
- <正>目的探讨新型抗明胶酶单链抗体与力达霉素辅基蛋白融合蛋白Fv-LDP联合血管生成抑制剂Endostar的抗肿瘤作用。方法采用基因工程方法构建并表达抗明胶酶单链抗体融合蛋白Fv-LDP,通过固定化金属螯合层析和透析复性...
- 高瑞娟李亮尚伯杨赵春燕盛唯瑾李电东甄永苏
- 文献传递
- 微生物法测定力达霉素的效价
- 2005年
- 建立力达霉素效价测定的微生物检定法,检定菌为枯草芽孢杆菌.当力达霉素的浓度为1.85～13.51μg/ml时,其抑菌圈直径与反应剂量呈线性关系,并与HPLC法进行比较,测定结果基本一致.
- 赵春燕王玉凤炼润梅高瑞娟李电东
- 关键词：力达霉素微生物检定法HPLC效价测定
- 单链抗体与力达霉素辅基蛋白在大肠埃希菌表达的发酵工艺被引量：3
- 2009年
- 目的确定工程菌E.coli BL21(DE3)Star^(TM)/pEFL表达抗Ⅳ型胶原酶单链抗体与力达霉素辅基蛋白构成的融合蛋白Fv-LDP的摇瓶发酵工艺。方法比色法测定菌体浓度,干燥失重法测定细菌干重,SDS-PAGE-Spot Denso法测定融合蛋白Fv-LDP表达量,单因素或正交设计优化发酵工艺。结果确定了融合蛋白Fv-LDP表达的最佳培养基配方和培养条件,融合蛋白Fv-LDP表达量为830μg/ml左右,比LB培养基的产量提高5.6倍。结论优化工程菌发酵工艺大大提高了融合蛋白Fv-LDP表达水平,不仅为下一步中试研究和规模化生产奠定了基础,而且为其它生物来源的抗体和抗生素组分在基因工程大肠埃希菌的生产提供了发酵方面的实验证据。
- 高瑞娟赵春燕王玉凤李电东
- 关键词：发酵工艺
- EGFR单链抗体-力达霉素融合蛋白抑制人乳腺癌MCF-7细胞增殖与侵袭的研究被引量：4
- 2014年
- 目的研究EGFR单链抗体-力达霉素融合蛋白ER(Fv-LDP-AE)对人乳腺癌MCF-7细胞增殖和侵袭的抑制作用,探讨其作用机制。方法采用噻唑蓝(MTT)法测定ER(Fv-LDP-AE)对MCF-7细胞增殖的影响。流式细胞术、Hoechst染色和AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测细胞周期的变化以及细胞凋亡。Transwell实验测定ER(Fv-LDP-AE)对MCF-7细胞迁移和侵袭的影响。采用RT-PCR检测细胞EGFR mRNA的表达水平,Western blot分析ER(Fv-LDP-AE)对EGFR细胞信号通路的影响。明胶酶谱实验测定细胞基质金属蛋白酶(MMPs)的活性。结果 ER(Fv-LDP-AE)能显著抑制MCF-7细胞的体外增殖,其半数抑制浓度(IC50)为1.5×10-12mol/L。ER(Fv-LDP-AE)可引起细胞周期G2/M期阻滞,诱导细胞凋亡,抑制细胞的迁移和侵袭,阻碍EGFR的表达,干扰EGFR细胞信号通路,降低MMPs的活性。结论 ER(Fv-LDP-AE)通过抑制EGFR及其细胞信号通路、干扰细胞周期循环和诱导细胞凋亡,抑制乳腺癌MCF-7细胞的体外增殖,通过降低迁移能力和调节MMPs活性,阻碍肿瘤细胞的侵袭转移。
- 盛唯瑾高瑞娟甄永苏
- 关键词：单链抗体力达霉素表皮生长因子受体MCF-7细胞
- 抗明胶酶单链抗体与力达霉素融合蛋白抗肿瘤作用机制及疗效研究被引量：2
- 2014年
- 目的探讨抗明胶酶单链抗体Fv与力达霉素(LDM)融合蛋白的抗肿瘤作用机制及疗效。方法采用三联径向加压C4柱制备LDM发色团AE,体外分子重建将其装入融合蛋白Fv-LDP中,Superdex 75层析获得Fv-LDP-AE。反相HPLC测定纯度或相对含量。流式细胞术测定DNA含量;采用SA-β-gal染色、Western blot和细胞伤口愈合实验分别检测药物对细胞衰老、蛋白表达和迁移的影响;通过动物模型评价药物疗效。结果 Fv-LDP-AE承袭了LDM诱导肿瘤细胞周期阻滞、凋亡和裂亡的作用特点,并显示出更强的诱导衰老和抗迁移作用。Fv-LDP-AE诱导凋亡和抑制迁移依次与caspases通路激活和MMP-2降调节有关。Fv-LDP-AE可抑制小鼠和裸鼠移植瘤生长,抑制率分别可达到86.6%和82.5%。结论 Fv-LDP-AE对小鼠和裸鼠移植瘤有效,可能与其对细胞周期阻滞、凋亡、裂亡和衰老的诱导以及迁移的抑制有关。
- 高瑞娟尚伯杨盛唯瑾赵春燕李电东甄永苏
- 关键词：明胶酶类单链抗体肿瘤微环境力达霉素
- 基于Nrf2/HO-1信号通路调控的恰玛古多糖抗多柔比星心肌毒性的机制研究
- 2024年
- 本研究主要探讨了恰玛古多糖(polysaccharides of Brassica rapa L.,BRPs)对多柔比星(doxorubicin,DOX)心脏毒性的作用及相关机制,研究选用H9c2细胞作为研究对象,采用Cell counting kit-8(CCK-8)法检测BRPs对DOX致H9c2细胞损伤的影响;将H9c2细胞分成对照组、模型组和药物组(0.5~3 mg·mL^(-1)),对照组于正常条件下培养,其余各组在处理后进行1μmol·L^(-1) DOX诱导24 h。通过流式细胞仪检测各组细胞凋亡;分别测定各组细胞乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、细胞内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量;检测细胞内活性氧(ROS)和线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP);Western blot检测凋亡及转录因子NF-E2相关因子(NF-E2-related factor 2,Nrf2)/血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)通路相关蛋白表达。与对照组相比,DOX致H9c2细胞损伤的细胞活力下降、凋亡率增加,LDH、MDA水平升高,SOD活性降低,ROS水平显著增多,MMP显著下降;B淋巴细胞瘤-2(B cell lymphoma-2,Bcl-2)蛋白水平降低,Bcl-2关联X蛋白(Bcl associated X protein,Bax)水平显著升高;且模型组Nrf-2、HO-1、醌氧化还原酶1(quinone oxidoreductase 1,NQO1)蛋白表达水平降低,Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Kelch-like ECH-associated protein 1,Keap1)和磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶蛋白表达水平显著升高。与模型组相比,BRPs各组在0.5~3 mg·mL^(-1)对DOX致H9c2细胞损伤具有保护作用,降低细胞凋亡及LDH、MDA和细胞内ROS水平,增强SOD活性,升高MMP;同时,BRPs可上调凋亡相关Bcl-2,并下调Bax水平;而且,BRPs可使Nrf2、HO-1、NQO1蛋白表达水平升高,Keap1和磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶水平降低。本研究认为BRPs能够保护H9c2细胞,抑制细胞凋亡,可能与其调节Nrf2/HO-1通路拮抗氧化应激有关。
- 郭君婷赵婷婷叶斯木·塔拉甫别克高瑞娟刘桂花
- 关键词：多柔比星心肌毒性
- 单链抗体与lidamycin辅基蛋白融合蛋白工程菌的高密度发酵及其免疫活性被引量：1
- 2009年
- 目的实现抗Ⅳ型胶原酶单链抗体(Fv)与lidamycin辅基蛋白(LDP)结合构成的融合蛋白Fv-LDP产生菌的高密度发酵,并测定融合蛋白Fv-LDP免疫活性。方法先在5L发酵罐中进行工程菌分批发酵和补料分批发酵,再用固定化金属亲和层析从菌体中纯化融合蛋白Fv-LDP,分步透析使之复性,酶联免疫吸附试验和免疫荧光细胞化学染色检测其免疫活性。结果确定分阶段恒速补料分批发酵为工程菌最佳高密度发酵模式,融合蛋白Fv-LDP最高表达量为4g/L,A600为55左右,培养时间约14h。融合蛋白Fv-LDP对Ⅳ型胶原酶呈阳性免疫反应,能与PG细胞特异结合。结论确定了工程菌高密度发酵工艺,融合蛋白Fv-LDP免疫活性良好,为融合蛋白Fv-LDP与lidamycin烯二炔发色团(AE)构成的小型高效化抗体药物Fv-LDP-AE的研究奠定良好基础。
- 高瑞娟赵春燕王玉凤张秀敏赵宝明李电东
- 关键词：单链抗体分批发酵补料分批发酵免疫活性
