马益萍
- 作品数：2 被引量：14H指数：1
- 供职机构：浙江大学动物科学学院动物预防医学研究所更多>>
- 发文基金：浙江省科技攻关计划公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 抗狂犬病病毒糖蛋白单克隆抗体的制备及特性鉴定
- 用纯化的原核表达的RV G蛋白免疫6～8周龄的雌性BALB/c小鼠。经过3次免疫后。取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,通过间接ELISA方法筛选杂交瘤细胞,阳性孔经3次有限稀释法克隆,成功获得1株能稳定传代并分泌...
- 马益萍申会刚蔡月琴郭军庆周继勇
- 关键词：狂犬病毒糖蛋白单克隆抗体
- 文献传递
- 狂犬病病毒核蛋白基因在大肠杆菌中的高效表达被引量：14
- 2007年
- 为获得狂犬病病毒(RV)核蛋白抗原,采用RT-PCR方法从狂犬病病毒ERA株中扩增了RV核蛋白基因,分别亚克隆到原核表达载体pET-28a(+)和pET-32a(+)中,经PCR和双酶切鉴定以及序列测定,重组质粒构建成功。将重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达,表达的核蛋白再经Ni2+-NTA亲和层析纯化。结果显示,核蛋白在pET-32a(+)中的表达量(30.4%)高于在pET-28a(+)中的表达量(19.4%),培养物中的高纯度核蛋白产量分别为13.6和8.45 mg/L。经Western-blotting检测,不同载体表达的核蛋白均可被兔抗RV多克隆抗体特异识别,表明核蛋白具有良好的反应原性。
- 蔡月琴马益萍申会刚郭军庆周继勇
- 关键词：狂犬病病毒核蛋白蛋白纯化
