马普
- 作品数：10 被引量：20H指数：3
- 供职机构：大连海洋大学水产与生命学院更多>>
- 发文基金：国家海洋公益性行业科研专项大连市科技计划项目辽宁省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学环境科学与工程更多>>
- 红鳍东方鲀干扰素γ基因的原核表达被引量：3
- 2015年
- 旨在探究一种简单高效的获取重组红鳍东方鲀IFNγ蛋白的方法。提取红鳍东方鲀(Takifugu rubripes)肾脏组织的总RNA,并以其为模板进行RT-PCR扩增干扰素γ(IFNγ)基因序列。将IFNγ成熟肽序列与表达载体p ET-32a(+)相连,成功构建了重组表达载体PET-32a-IFNγ。将其转化入E.coli BL21(DE3)感受态细胞后获得了重组表达IFNγ的基因工程菌。经IPTG诱导,p ET-32a-IFNγ在BL21中得到了表达。通过对表达产物的纯化和Western blotting检测,结果显示红鳍东方鲀IFNγ基因在大肠杆菌中的表达准确,且目的蛋白表达量较高。
- 马普孙赛红王玉芳李慧刘海映姜志强仇雪梅刘洋张涛王秀利
- 关键词：红鳍东方鲀干扰素Γ原核表达
- 重组红鳍东方鲀干扰素γ蛋白的制备方法
- 本发明公开一种操作简便、成本低廉、重组蛋白纯度好、得率高、适应于工业化生产的重组红鳍东方鲀干扰素γ蛋白的制备方法，按照如下步骤进行：提取新鲜红鳍东方鲀肾脏总RNA并反转录进行第一链的cDNA的合成；以上述第一链的cDNA...
- 王秀利马普刘洋姜志强仇雪梅
- 文献传递
- 从固定液保存的刺参样品中提取基因组DNA的改进方法
- 2014年
- 刺参（A postichopus japonicus）分类学上隶属于棘皮动物门、游走亚门、海参纲、楯手目、刺参科，是重要的经济海参物种［1］。刺参含有丰富的蛋白质、酸性黏多糖、维生素、氨基酸、海参皂苷以及多种微量元素和生理活性物质，具有很高的营养、保健和药用价值。其中以产于我国辽宁、山东沿海的刺参营养、药用价值最高。随着人们生活水平的提高，刺参市场需求量显著增加。20世纪80年代以来，随着海洋经济快速发展，我国刺参增养殖随之迅猛发展，已经形成了产业化。据不完全统计，我国刺参产量产值每三至五年翻一番。目前，刺参的年产量已接近20万吨，产值达到300亿元以上，刺参已经成为我国水产业单种产值最高的经济物种之一。
- 王祖哲王利顾晨雷马普王秀利
- 关键词：刺参基因组固定液DNA生理活性物质
- 红鳍东方鲀干扰素调节因子2基因的克隆及原核表达
- 干扰素调节因子(Interferon Regulatory Factor,IRF)是一种多功能的转录因子.本研究采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和cDNA末端快速扩增(RACE)技术克隆了红鳍东方鲀干扰素调节因子...
- 孙赛红马普孙鹤孔德荣李慧周晓旭仇雪梅姜志强刘海映刘洋刘圣聪孟雪松王秀利
- 关键词：红鳍东方鲀基因克隆原核表达
- 红鳍东方鲀(Takifugu rubripes)干扰素调节因子2基因的克隆及原核表达
- 2016年
- 干扰素调节因子(Interferon regulatory factor,IRF)是一种多功能的转录因子。采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和c DNA末端快速扩增(RACE)技术克隆了红鳍东方鲀干扰素调节因子2(Interferon regulatory factor 2,IRF2)基因的全长c DNA。该基因全长为1 552 bp,其中5'非编码区(5'-UTR)187 bp,3'非编码区(3'-UTR)429 bp,编码区(CDS)为936 bp,共编码311个氨基酸。将IRF2的编码区序列连接到原核表达载体p ET32a(+),成功构建了重组体p ET32a(+)-IRF2。将重组体p ET32a(+)-IRF2转入大肠杆菌感受态细胞BL21(DE3)中,获得了重组表达IRF2的基因工程菌。经IPTG诱导,p ET32a(+)-IRF2在BL21中得到了融合表达。通过对表达产物的纯化和Western blotting检测,结果显示红鳍东方鲀IRF2基因在大肠杆菌中的表达效果较高,目的蛋白准确。
- 孙赛红马普孙鹤孔德荣李慧仇雪梅姜志强刘海映刘洋刘圣聪孟雪松王秀利
- 关键词：红鳍东方鲀原核表达
- 重组红鳍东方鲀干扰素调节因子2蛋白及制备方法
- 本发明公开一种重组红鳍东方鲀干扰素调节因子2（IRF2）蛋白及制备方法，提取新鲜红鳍东方鲀肾脏总RNA，并反转录进行第一链的cDNA的合成；以所得到的第一链的cDNA为模板、设计引物扩增该基因的蛋白编码序列并与pMD19...
- 王秀利孙赛红马普姜志强刘洋仇雪梅
- 文献传递
- SNPs在水产动物中的研究进展被引量：11
- 2013年
- 单核苷酸多态性(Single nucleotide polymorphisms,SNPs)是在基因组上分布最为广泛的分子标记,已成为分子生物学的研究热点。综述SNPs在水产动物疾病、生长性状和繁殖性能等方面的研究进展,以期为水产动物养殖及分子标记辅助育种提供参考。
- 张晓萌马普王洪迪王秀利
- 关键词：SNPS分子标记水产动物
- 红鳍东方鲀白介素15的原核表达及其活性测定被引量：2
- 2015年
- 为了开发红鳍东方鲀Takifugu rubripes免疫基因及其重组表达,生产重组免疫因子蛋白,通过提取红鳍东方鲀肾脏组织总RNA,利用RT-PCR技术扩增得到白介素15(interleukin15,IL15)基因序列,将IL15成熟肽序列与原核表达载体p ET-32a(+)连接,成功构建重组表达载体(重组子)p ET-32a(+)-IL15,并将其重组子转化至Escheria coli BL21(DE3)感受态细胞中获得重组表达IL15的基因工程菌,再经IPTG诱导,p ET-32a(+)-IL15在BL21中得到了融合表达。结果表明:通过对表达产物的纯化和Western Blotting检测,红鳍东方鲀IL15在大肠杆菌中的表达量较高,蛋白浓度为294.6μg/m L;用MTT法对该蛋白进行活性鉴定显示,加入稀释10倍和100倍的重组红鳍东方鲀IL15蛋白时,CTLL-2细胞的增殖率相对较高,分别为71%和73%。研究表明,重组红鳍东方鲀IL15蛋白具有体外促进CTLL-2细胞增值的能力。
- 孙赛红马普李慧孙鹤孔德荣李凤华仇雪梅姜志强刘海映刘圣聪王秀利
- 关键词：红鳍东方鲀白介素-15原核表达活性鉴定
- 刺参C型凝集素(AJL)基因的克隆及原核表达分析被引量：3
- 2015年
- 为了开发海参免疫基因,生产重组免疫因子蛋白,利用cDNA末端快速扩增技术(Rapid-amplification of cDNA ends,RACE)获得了刺参凝集素基因(Apostichopus japonicus Lectin,AJL)的编码区序列(Coding sequence,CDS),CDS的长度为492 bp,编码163个氨基酸,其中成熟肽由143个氨基酸组成。将成熟肽的基因克隆并连接至载体p ET-32a(+)中,成功构建了原核表达的重组体p ET-32a(+)-AJL,进一步将重组体转化至大肠杆菌感受态细胞BL21(DE3)中,经诱导表达、分离纯化,获得了融合表达蛋白。本研究结果为进一步研究重组刺参C型凝集素在刺参健康养殖上的应用奠定了基础。
- 薛壮李慧孙鹤孔德荣马普周玮仇雪梅刘洋王秀利
- 关键词：刺参凝集素基因克隆原核表达
- 红鳍东方鲀IFNγ基因和CCL19基因的原核表达及重组IL15的活性鉴定
- 红鳍东方鲀（Takifugu rubripes）是一种重要的经济鱼类，然而，水环境中存在的大量细菌和病毒使鱼类的皮肤和黏膜不断受到侵袭，这些病原微生物侵入鱼体后会使鱼体发生病变甚至死亡，给红鳍东方鲀的大规模养殖造成严重损...
- 马普
- 关键词：红鳍东方鲀原核表达活性鉴定
- 文献传递
