成国祥
- 作品数：35 被引量：186H指数：7
- 供职机构：上海市肿瘤研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金“八五”国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生化学工程更多>>
- 携带xylE的转基因小鼠的制备被引量：3
- 1999年
- 建立了一种新的转基因小鼠致突变检测模型．选用ｘｙｌＥ基因作为诱变的靶基因，以ｐＥＳｎｘ穿梭质粒作为载体，通过显微注射法将线状ｐＥＳｎｘ导入ＩＣＲ小鼠制备Ｇ０小鼠．将显微注射后存活的３５２／５４９枚受精卵分别移入２４只受体雌鼠的输卵管中，共产生４１只仔鼠，存活３０只（Ｇ０），经过整合检测，检测出转基因小鼠１７只，阳性率为５７％．从中筛选出２只完整整合了ｐＥＳｎｘ的转基因小鼠作为首建鼠（ｆｏｕｎｄｅｒｍｏｕｓｅ）进行繁育，目前已繁殖到第三代（Ｇ３）．经过逐代整合检测，证明转入的基因可稳定地遗传．上述结果表明已成功地制备了在基因组中整合了ｐＥＳｎｘ质粒携带ｘｙｌＥ的转基因小鼠．
- 黄建印木泉陈耀富陈耀富成国祥陈建泉邱信芳成国祥
- 关键词：小鼠转基因
- 山羊同步发情和超排后取卵时间的研究被引量：3
- 1994年
- 间隔９～１４ｄ分２次进行ＰＧＦ＿（２α）处理，以调整母羊的性周期。处理后的同步率分别为４７．６４％和６５．８８％。用ＰＭＳＧ或ＦＳＨ对４１９只母羊进行超排，总有效率７５．８１％，有效羊平均每只获卵７．６４枚。超排母羊发情后２０～３０ｈ回收的卵母细胞，可用率８５．９３％。用于山羊细胞核移植中的受体卵母细胞，适宜的回收时间为超排母羊发情后（２７±１）ｈ。在进行山羊原代细胞核移植时，以８～１６细胞期、桑椹期至囊胚期的分裂球或内细胞团细胞作供核的胚胎，适宜的获取时间为超排母羊发情交配后９６～１４４ｈ。
- 穆宗尧王杏龙邹贤刚杜福良成国祥王玉阁李光三徐少甫杜淼成勇
- 关键词：山羊同步发情超数排卵卵母细胞
- 突变靶基因xylE转基因小鼠被引量：4
- 1997年
- 本研究以ｐＥＳｎｘ穿梭质粒为载体，选用恶臭假单孢杆菌ＴＯＬ质粒上的ｘｙｌＥ基因作为突变靶基因组构建的重组构件，经微注射导入ＩＣＲ小鼠５４９枚受精卵雄原核，将存活的３５２枚卵移入２４只假孕鼠输卵管内，７只妊娠，共产仔４１只，其中７只死胎，出生后死亡４只，３０只存活。注射卵存活率为６４％（３５２／５４９），出生率为１１．６％（４１／３５２）。存活鼠经ＰＣＲ－Ｓｏｕｔｈｅｒｎ检测，整合率为５７％（１７／３０）。在整合阳性鼠中选择了杂交信号较强的２只当代公鼠，通过回收载体和转化试验，结果表明整合基因完整，具有转化的功能，由此，建立了突变靶基因ｘｙｌＥ转基因小鼠模型。
- 陈建泉成国祥成勇徐少甫黄建印木泉
- 关键词：靶基因突变E基因转基因小鼠孕鼠假孕
- 由胎儿成纤维细胞而来的克隆山羊(Capra hircus)被引量：55
- 1999年
- 哺乳动物的克隆是国内外科学家研究的热点问题 .用体外培养的胎儿成纤维细胞作供体细胞不仅可以研究发育生物学中发育与分化的理论问题 ,而且与早期胚胎细胞作供体细胞相比 ,大大增加了供体细胞的数量 .初步实验结果如下 :( 1 )分别用早期胚胎细胞分裂球和体外培养传 6代的山羊胎儿成纤维细胞作供体细胞 ,进行核移植 ,重构卵体内培养 5d后 ,其分裂率前者为 5 5 % ,后者为 77% ;发育率前者为 35 % ,后者为 31 % ,经统计分析 ,无显著差异 .( 2 )得到了由传代培养的山羊胎儿成纤维细胞而来的克隆山羊 ,这是我国首次获得的胎儿体细胞克隆哺乳动物 .为今后进行成年动物的体细胞克隆 ,从而深入研究动物发育过程中的核质关系创造了条件 。
- 王玉阁邹贤刚成国祥成勇陈建泉刘洁张靖溥张旭晨劳为德张锁林徐少甫杜淼
- 关键词：山羊胎儿成纤维细胞转基因动物
- 抗病毒药物抑制转基因小鼠中HBV的复制被引量：3
- 1999年
- 张萍萍万大方顾健人李劲松徐少甫成勇成国祥
- 关键词：抗病毒药物转基因小鼠HBV病毒复制
- Digoxigenin标记核酸探针分子杂交技术探讨被引量：1
- 1992年
- Dig标记和检测试剂盒中的封阻试剂配制成0.05%、0.1%、0.3%、0.5%、0.7%、0.9%六种浓度,65～68℃温度时,溶解时间分别为10、15、20、35、40、45分钟;预杂交,在免疫测定中进行封阻,背景反应最小,其次是不预杂交,在免疫测定中进行封阻,再次是预杂交,在免疫测定中不封阻;标记探针保存在-20℃,至少可稳定18个月,同一探针重复使用三次可获得满意效果.以上结果表明,DigDNA标记和检测系统将代替^(32)p标记及其检测系统.
- 成国祥崔治中徐少甫陈光辉
- 关键词：DNA杂交技术核酸探针
- 人乙肝病毒转基因小鼠肝脏形态观察和DNA图象分析初报被引量：3
- 1995年
- 观察了３２例２３～５５日龄人乙肝病毒转基因小鼠的肝脏形态，发现１７例小鼠的部分肝细胞巨大，核呈圆形、椭圆形或不规则形，核膜厚，核染色质粗大、浓染，核仁大而明显，核质比例大，肝小叶结构基本完整。其中的７例异常肝细胞所占比例较高，但未见典型的肝炎病变。ＤＮＡ图象分析显示，异常细胞核内ＤＮＡ含量增加，ＤＮＡ含量大于五倍体的细胞占各期细胞总数的比例达１２％～５６％。
- 万曙光励雁峰张萍萍万大方钱耕荪顾健人成国祥徐少甫
- 关键词：乙型肝炎病毒转基因小鼠
- 乳腺特异性基因转基因山羊表达特性的研究被引量：3
- 1999年
- 采用胚胎显微注射的方法，将牛乳酪蛋白（αｓｌｃａｓｅｉｎ）基因作为乳腺定位表达调控序列与人乙型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ／ａｙｗ）基因组成的两个融合构件（λ１０６和λ２０７）导入山羊原核期受精卵。产出的Ｇ０代羊用ＨＢｘ和ｃａｓｅｉｎ８００两个探针进行ＰＣＲ＋Ｓｏｕｔｈｅｒｎ整合检测，分别获得λ１０６和λ２０７构件整合阳性羊１６和２４只。用ＥＬＩＳＡ／ＨＢｓＡｇ试剂盒检测转基因羊乳汁中的重组人乙型肝炎表面抗原（ｒＨＢｓＡｇ），在Ｇ０代转基因羊中，λ１０６乳腺表达率是４７２％（１７／３６）；λ２０７是６８６％（２４／３５）。Ｇ０代转基因母羊与正常公羊交配，所产的４１只Ｇ１代羊中有１３只整合阳性（３１７％），其中６只Ｇ１代整合羊中，乳腺表达率为６６６７％（４／６）。表达阳性羊乳免疫注射６只成年兔，结果在它们的血清中全部检测到ＨＢｓＡｂ（６／６）。试验表明，由αｓｌｃａｓｅｉｎ和ＨＢｓＡｇ／ａｙｗ基因组成的λ１０６和λ２０７两个融合基因构件导入山羊原核期受精卵后均可获得乳腺特异性表达转基因羊，最高表达量达１３０７μｇ／ｌｉｔｅｒ，由此证明通过牛αｓｌ酪蛋白调控序列作为定位基因来指导ＨＢｓＡｇ／ａｙｗ基?
- 成勇成国祥王杏龙穆宗尧陈建泉徐少甫劳为德张靖溥张旭晨魏允影
- 关键词：乙肝表面抗原乳腺转基因山羊基因表达山羊
- 转基因动物与生殖内分泌学研究
- 1995年
- 转基因动物与生殖内分泌学研究成国祥（扬州大学农学院）１９８０年前，有关生殖内分泌的研究都需切除部分组织或细胞，以便在体外对切除的组织或细胞进行细胞学或分子生物学分析，以及对切除后机体体内的生理后果进行分析。而通过特殊的操作系统，可在体内复杂环境下分析...
- 成国祥
- 关键词：转基因动物基因工程生殖生理学内分泌学
- “八五”畜牧生物技术研究进展
- 1997年
- 一、山羊胚胎细胞经继代核移植后其发育能力的研究 1、建立山羊细胞核移植技术体系:应用鱼、家兔移植的工作基础,在山羊探索卵母细胞的去核、供核胚胎分裂球和细胞的分散、移核、融合和激活等技术参数和方法,并予组合成一套山羊细胞核的技术体系。1991年首次试验就获得了2头细胞核移植山羊。2、建立山羊连续细胞核移植技术体系:确立了供质、供核、寄母、受体的同步发情和供质与供核羊的超排规程、卵母细胞的回收适期、去核适期和方法、移植卵的融合和激活条件、不同发育期胚胎的分裂球或细胞作供核其组成的重构卵的可能性和重构卵的培养方法,并在继代过程中比较了G0、G1世代重构卵的分裂和发育能力。
- 成国祥成勇杜淼劳为德钱耕荪万大方
- 关键词：卵母细胞转基因生物技术研究同步发情发育能力
