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检测胃癌患者外周血中K-ras和p53基因突变的临床价值被引量：4: 2008年; 目的探讨检测胃癌患者外周血中K-ras和p53基因突变的临床意义。方法应用聚合酶链反应-单链构象多态性分析(PCR-SSCP)法,对我院收治的73例胃癌患者外周血中的K-ras和p53基因突变进行检测,并与20例非肿瘤疾病患者作对照。结果73例胃癌患者中有7例外周血中检测出p53基因突变,阳性率为9.6%;5例检测出K-ras基因突变,阳性率为6.8%。对照组外周血中均未检出K-ras和p53基因突变。有无肝转移的胃癌患者外周血p53和K-ras基因突变阳性率间差异均有统计学意义(P<0.05),不同分化程度及临床分期的胃癌患者外周血p53和K-ras基因突变阳性率间差异无统计学意义(P>0.05)。结论PCR-SSCP法检测外周血中K-ras和p53基因DNA有助于胃癌肝转移的诊断。; 陈积贤张洁黄建武李红智豆长明余铭林道浙陈永康张仁虎吴伟力陈谦林峰; 关键词：胃肿瘤肿瘤转移 P53

基因芯片技术对乙型肝炎病毒拉米夫定耐药基因变异检测的临床应用: 2007年; 目的通过对应用拉米夫定治疗患者HBV基因耐药性变异的长期监测，验证基因芯片技术的临床应用前景。方法针对HBV3个主要的拉米夫定耐药性相关突变设计探针，制成HBV耐药寡核苷酸芯片，选取51例应用拉米夫定进行治疗的乙型肝炎患者分别采用基因芯片和传统测序的方法对其进行24个月的监测，观察HBV基因变异情况。结果39％的患者在用药2年内发生了耐药性突变，使用基因芯片与传统的测序方法得到的结果一致，并且可以在早期方便检测出混合感染。结论应用基因芯片技术可以准确，高效的检测出耐药基因变异，具有临床应用价值。; 黄希田曾爱平林峰; 关键词：突变拉米夫定

胃癌患者血浆p53、K-ras基因突变及临床意义被引量：3: 2006年; [目的]研究胃癌患者血浆中基因表达检测的可行性,探讨基因p53和K-ras突变与临床病理间的关系。[方法]应用PCR-SSCP分析技术,检测62例胃癌患者血浆中K-ras癌基因的突变情况。[结果]62例胃癌患者外周血和门静脉血中的p53、K-ras突变阳性率分别为8.06%、4.83%和38.71%、33.87%;无、有肝转移患者p53、K-ras突变阳性率分别为24.49%、22.45%和92.30%、76.92%;门静脉血p53、K-ras突变阳性率分别为38.71%、33.87%和56.45%、62.90%。[结论]胃癌的发生发展与血浆中癌基因K-ras与抑癌基因p53的突变有关。; 陈积贤张洁豆长明黄建武李红智陈永康张仁虎张洪勤李佩珍林峰; 关键词：胃肿瘤

8.浙江地区青霉素耐药肺炎链球菌PBPs基因及氨基酸序列研究: 本文揭示了对肺炎链球菌(SP)耐药机制的研究表明,三种高分子量的青霉素结合蛋白(penicillin-bindingproteinPBPs)PBP1A、PBP2B、PBP2X的变异是导致肺炎链球菌产生对青霉素耐药的主要原...; 林峰郑敏巧曾爱平丁玎文思远王升启; 关键词：肺炎链球菌青霉素耐药性; 文献传递网络资源链接

胃癌患者门静脉血中p53和K-ras基因突变的检测及其临床意义被引量：5: 2006年; 目的检测胃癌患者门静脉血中p53和K-ras基因突变,探讨其与胃癌肝转移的关系。方法应用PCR-SSCP技术检测62例胃癌手术患者门静脉血中p53和K-ras基因的突变率。结果外周血和门静脉血中的p53和K-ras突变阳性率分别为8％、5％和39％、34％;有无肝转移p53和K-ras突变阳性率分别为92％、77％和24％、22％;剖腹后探查前或胃癌探查后门静脉血p53和K-ras突变阳性率分别为39%、34％和56％、63％,上述两组指标之间相比差异均有统计学意义(P< 0．05),但与患者性别、年龄、肿瘤的分化程度之间无显著性相关(P>0．05)。结论门静脉血内微转移癌细胞的基因突变检测有助于判断胃癌临床分期,对预测胃癌肝内微小转移有一定的临床价值。; 陈积贤黄建武张洁豆长明李红智陈永康张仁虎吴伟力陈谦余铭林道浙林峰; 关键词：胃肿瘤基因突变

人博卡病毒外壳蛋白（VP3）的重组表达及间接ELISA检测方法的建立被引量：1: 2007年; 人博卡病毒（Human Bocavims）是2005年Tobias Allander等从小儿下呼吸道感染分泌物中分离到的新细小病毒，我们曾报道中国分离的人博卡病毒（WLL-1株）的全基因组序列。为了进一步检测分析人博卡病毒感染情况，我们重组表达了人博卡病毒WLL-1株的外壳蛋白（VP3）并建立了间接ELISA检测方法。; 林峰曾爱平郑敏巧金大智吴锋; 关键词：间接ELISA检测人博卡病毒外壳蛋白小儿下呼吸道感染

博卡病毒VP2基因在昆虫细胞sf9中表达及临床标本筛查被引量：2: 2009年; 目的表达人博卡病毒（HBoV）vP2蛋白，用于临床标本HBoV的筛查。方法将VP2基因重组于杆状病毒基因组，重组的杆状病毒感染昆虫细胞sf9，用HA抗体进行Western Blot鉴定重组融合vP1蛋白表达。通过电镜观察重组蛋白颗粒。以vR2蛋白作为抗原对176例临床样本进行免疫印迹筛查。结果在昆虫细胞中vB蛋白的表达量约占细胞总蛋白的60％以上，VP2蛋白相对分子质量为60×10^3。电镜观察博卡病毒vP，蛋白形成病毒样颗粒（VLP），其大小在20nm左右；采用免疫印迹技术从临床标本中筛查出4例患者HBoV阳性，阳性率达到2.28％（4／176）。结论本研究成功的在昆虫细胞中表达了博卡病毒VR蛋白；表达vP2蛋白具有一定抗原性，为开展人博卡病血清学研究方法建立提供基础。; 滕灵方林峰郑美云郑昌华吴锋曾爱平黄恩佩莫一涵郑敏巧李旭阳侯建毅; 关键词：基因表达调控免疫印迹法

利用人支气管上皮细胞系分离和培养人博卡病毒被引量：4: 2009年; 目的研究人博卡病毒（HBoV）在呼吸道感染中致病性及机理。方法利用人支气管上皮细胞系进行HBoV分离及培养，通过电镜对培养细胞中HBoV的形态及感染细胞进行研究，并采用逆转录PCR（RT-PCR）方法，检测HBoV在细胞中转录产物mRNA，同时对扩增产物进行测序及分析。结果将含有HBoV阳性痰液标本无菌接种人支气管上皮细胞系，出现2例致使细胞发生明显的病变（CPE）。电镜观察在细胞质中散在六角形或圆形的病毒粒子，大小18-26nm之间，大部分是20nm。RT-PCR扩增产物经电泳检测与预期结果相符是295bp，扩增产物测序结果与GenBank中HBoV序列比较，核苷酸同缘性99％，氨基酸同缘性100％。结论HBoV感染人支气管上皮细胞后能够在该细胞内增殖，并产生特征性生物学改变。本研究为今后HBoV致病性及免疫应答谱研究奠定基础。; 林峰滕灵方郑美云郑昌华吴锋李桦郑敏巧曾爱平黄恩佩莫一涵侯建毅; 关键词：支气管上皮细胞细胞

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