邵卫星 作品数:95 被引量:377 H指数:11 供职机构: 中国动物卫生与流行病学中心 更多>> 发文基金: 科技基础性工作专项 江苏省基础研究计划 江苏省“十五”科技攻关项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 哲学宗教 更多>>
基于不同抗原的犬布鲁氏菌病免疫层析胶体金抗体试纸条的制备和比较 2024年 为建立针对犬布鲁氏菌病的免疫层析胶体金快速检测方法,利用从犬种布鲁氏菌菌株提纯的膜蛋白和可溶性蛋白,原核表达纯化的外膜蛋白Omp31和BP26以及基于B细胞抗原肽的融合蛋白F14,分别制备了试纸条,然后采用犬布鲁氏菌病阳性和阴性血清,分别对上述试纸条进行敏感性和特异性比较。结果显示:Omp31抗原的敏感性最高,其次是F14和BP26,而全菌膜蛋白和全菌可溶性蛋白的敏感性较差;特异性上,使用由5种抗原制备的胶体金试纸条检测30份犬布鲁氏菌病阴性血清,结果均为阴性;5种试纸条与沙门氏菌、大肠杆菌(O157)、大肠杆菌(H7)、霍乱弧菌、副溶血弧菌、军团菌阳性血清均不发生交叉反应。另外,由F14和BP26制备的试纸条可识别羊布鲁氏菌病阳性血清,而由Omp31、全菌膜蛋白和全菌可溶性蛋白制备的试纸条均不能识别牛、羊布鲁氏菌病阳性血清。综上所述,Omp31、F14和BP26可作为制备犬布鲁氏菌病免疫层析胶体金检测卡的备选抗原。本研究为粗糙型布鲁氏菌引起的布鲁氏菌病的诊断提供了技术支撑。 郭晓涵 焉鑫 邵卫星 殷德辉 闫昊 南文龙 樊晓旭 孙世雄 张培培 孙翔翔 刘蒙达 张皓博 孙淑芳 孙明军关键词:犬种布鲁氏菌 外膜蛋白 羊种布鲁氏菌Tat系统底物蛋白ErfK的抗原性和免疫原性研究 2024年 为分析羊种布鲁氏菌双精氨酸转运系统(twin-arginine translocation system,Tat system)毒力相关底物蛋白L,D-转肽酶ErfK诱导宿主产生的免疫应答情况,首先对布鲁氏菌M28毒株ErfK基因序列(WP_002963714.1)进行生物信息学分析,参考序列设计引物,构建表达载体pET-30a(+)-ErfK,经IPTG诱导表达、亲和层析和镍柱纯化获得目的蛋白;利用SDS-PAGE和Western blot对重组ErfK(rErfK)蛋白进行抗原性鉴定;将rErfK蛋白免疫小鼠,分别在免疫后15、30和45 d收集血清和脾脏,检测蛋白免疫后小鼠的细胞免疫应答和体液免疫应答情况。生物信息学预测结果显示,ErfK蛋白无跨膜结构,为亲水性蛋白,有多个T细胞和B细胞抗原表位;SDS-PAGE和Western blot均可获得25 kDa的蛋白条带,重组蛋白可与布鲁氏菌阳性血清发生反应,证明rErfK有良好的抗原性;小鼠免疫试验结果显示,rErfK组小鼠脾脏CD8^(+)T细胞含量相比PBS组显著上升(P<0.05),且脾脏Th1型细胞因子IL-2、TNF-α、IFN-γ和Th2型细胞因子IL-4转录水平均显著上升(P<0.05),此外,rErfK免疫也能极显著诱导小鼠血清中总IgG和特异性IgG的产生(P<0.01)。上述结果表明,经大肠杆菌表达的布鲁氏菌rErfK蛋白可诱导小鼠产生良好的体液免疫和细胞免疫应答。本研究为基于ErfK蛋白的布鲁氏菌病诊断试剂和亚单位疫苗研发提供了参考依据。 吴瑶 焉鑫 孙明军 屈海龙 郭晓涵 闫昊 张培培 孙世雄 李嘉琪 孙翔翔 刘蒙达 张皓博 南文龙 南文龙 邵卫星 王方昆 樊晓旭关键词:布鲁氏菌 抗原性 免疫原性 我国部分省份猪流行性腹泻的流行病学监测 被引量:27 2014年 [目的 ]为摸清我国猪群流行性腹泻的感染状况,[方法 ]从2011年底到2014年3月,对云南、广西等29个省份开展了猪群腹泻疫情流行病学调查,采集、收集了发生腹泻症状的发病猪群样品(新鲜粪便、肠道组织等),进行了猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)等多种病原检测。[结果 ]在7021个调查猪场中,出现腹泻的阳性猪场4060个(57.83%)。在收集的1383份腹泻样品中,利用RT-PCR方法检测到PEDV阳性样本686份(49.58%),其中腹泻发病猪样品中PEDV的检出率为67.82%,675份组织样品共检测出PEDV阳性样本86份(12.75%)。[结论 ]这表明我国猪场PEDV的感染十分普遍。对S基因进行分子流行病学分析发现,我国PEDV流行毒株与已有PEDV毒株可以分为2个完全不同的进化分支G1和G2,G1以CV777和DR13等疫苗株和早期毒株为主,G2则以2011-2013年流行毒株为主,流行毒株之间的同源性为97.8%-100%,与疫苗株CV777之间的同源性为94.3%-94.5%。 张志 董雅琴 刘爽 吴发兴 邵卫星 李晓成关键词:猪流行性腹泻 流行病学调查 对山东某猪场一起仔猪腹泻的流行病学调查 被引量:1 2014年 本文针对发生腹泻疫情的某猪场开展了实验室检测和流行病学调查,实验室检测表明该疫情的病原为猪流行性腹泻病毒。流行病学调查显示,此次腹泻疫情于2013年11月份开始暴发,2014年3月份结束,发病猪的种类具有明显的次序,育肥猪首先发生,其次是母猪,新生仔猪最后发病;发病率和死亡率与猪的种类、日龄密切相关,育肥猪和母猪发病后仅出现腹泻症状而不死亡,仔猪发病后腹泻症状明显而且死亡率随着年龄的增长急剧下降,3日龄以下仔猪死亡率可达100%,1周龄仔猪死亡率降至72.73%,12日龄仔猪死亡率仅有10%。对猪场风险因素分析表明,饲料车辆直接进入猪场、卖猪车辆与饲养人员接触、粪便通道没有封闭、饲养人员流动等是影响此次腹泻疫情的高风险因素,通过降低高风险因素很好地控制了疫病。 张志 董雅琴 刘爽 吴发兴 邵卫星 李晓成关键词:猪流行性腹泻 流行病学调查 重组鸡痘病毒表达的鸡IL-1β和IL-2以及cMGF对新城疫LaSota疫苗免疫效果的影响 被引量:10 2006年 将128只10日龄SPF鸡随机分成8组,每只免疫1 PD_(50)的新城疫LaSota疫苗;同时Ⅰ~Ⅵ组鸡分别皮下注射不同剂量的重组鸡痘病毒rFPV-IL-1β、rFPV-IL-2或cMGF,而Ⅶ组和Ⅷ组鸡分别皮下注射鸡痘病毒wt-FPV和PBS作为阴性对照和空白对照。结果,重组鸡痘病毒表达的IL-1β、IL-2或cMGF可以消除鸡痘病毒在免疫后第7d对雏鸡体重增长的影响;一定剂量的IL-1β和IL-2可使鸡脾中CD4^+T细胞在免疫后第7d和CD8^+T细胞在免疫后第14d的总体水平提高;免疫第21d新城疫F48E8强毒攻毒后,一定剂量的IL-1β和IL-2能提高免疫保护率,而cMGF却无此作用。结果表明,重组鸡痘病毒表达的IL-1β和IL-2在一定剂量下可增强新城疫LaSota疫苗的免疫效果。 邵卫星 卢建红 彭大新 刘秀梵关键词:鸡痘病毒 白细胞介素-2 免疫效果 八省份猪群猪圆环病毒2型与猪细环病毒混合感染的调查 被引量:11 2013年 为了解2012年我国部分地区猪群中猪圆环病毒2型(PCV2)和猪细环病毒(TTSuV)的混合感染情况以及PCV2流行株的基因型,应用PCR方法对采自山东、福建、安徽、河北、河南、广西、辽宁和湖北八省份的227份样品进行PCV2、TTSuV1和TTSuV2的检测,并对26株PCV2ORF2基因、17株TTSuV1和15株TTSuV2的部分UTR基因进行测序和进化分析。结果显示,PCV2的感染率为71.37%(162/227),PCV2与TTSuV1的混合感染率为44.05%(100/227),PCV2与TTSuV2的混合感染率为36.12%(82/227),3种病原体的混合感染率为29.52%(67/227)。在遗传演化关系上,26株PCV2分离株分布于3个大群,分别为PCV2a、PCV2b和PCV2d分支;TTSuV可以分为两大分支,分别为TTSuV1和TTSuV2。结果表明,上述省份的猪群中普遍存在PCV2和TTSuV的混合感染,且PCV2与TTSuV1的混合感染率高于PCV2与TTSuV2的感染率,甚至存在相当比例的PCV2与TTSuV1和TTSuV2的三重混合感染;上述地区流行的PCV2主要为PCV2d型。 李海超 王娟 李一经 黄秀梅 李玉清 曲志娜 邵卫星 王君玮关键词:猪圆环病毒2型 共感染 流行病学 一种犬布鲁氏菌病诊断用融合蛋白抗原 本发明而提供一种布鲁菌病特异性融合蛋白抗原,其氨基酸序列如SEQ ID No:1所示。本发明所提供的融合蛋白抗原包含了多个布鲁氏菌优势外膜抗原表位,具有好的伸展性、稳定性和生物活性。利用本发明融合蛋白建立的犬布鲁氏菌病E... 孙明军 孙翔翔 殷德辉 刘蒙达 樊晓旭 田莉莉 孙淑芳 邵卫星 范伟兴文献传递 有关国际组织在布鲁氏菌病防控中发挥作用的经验和启示 被引量:1 2023年 布鲁氏菌病(Brucellosis)是由布鲁氏菌(Brucella.spp)引起的慢性多器官损伤性人兽共患传染病。动物感染可引起流产和不育,人类感染会引起发热、肌肉和关节疼痛等,严重者完全丧失劳动能力[1]。该病严重威胁着养殖业健康发展、人类食品安全和公共卫生安全。鉴于此,在“同一健康”理念下,世界卫生组织(World Health Organization,WHO)、联合国粮食及农业组织(Food and Agriculture Organization of the United Nations,FAO)、世界动物卫生组织(World Organization for Animal Health,WOAH)和世界贸易组织(World Trade Organization,WTO)等国际组织高度重视对布鲁氏菌病的防控。 焉鑫 孙明军 南文龙 邵卫星 刘蒙达 孙淑芳 樊晓旭关键词:布鲁氏菌病 人兽共患传染病 世界动物卫生组织 动物感染 公共卫生安全 关节疼痛 两种诊断制品对临床样品中布鲁氏菌抗体的检测比较 被引量:5 2018年 本研究以国家标准《动物布鲁氏菌病诊断技术》(GB/T 18646-2018)中的试管凝集试验方法为确诊金标准,对353份临床牛、羊和猪血清样品进行确诊,然后分别采用虎红平板凝集试验抗原和抗体检测试纸条,对该353份临床血清进行检测,比较两种诊断制品在布鲁氏菌病初筛中的差异。经统计分析发现,虎红平板凝集试验抗原敏感性为100%(23/23),特异性为97.88%(323/330),与确诊结果间的Kappa值为0.86;布鲁氏菌抗体检测试纸条敏感性为100%(23/23),特异性为99.39%(328/330),与确诊结果间的Kappa值为0.95,两种方法的重复性试验结果均一致。试验结果证明,布鲁氏菌抗体检测试纸条和布鲁氏菌虎红平板凝集试验抗原都能满足布鲁氏菌病初筛的需求;由于布鲁氏菌抗体检测试纸条的储存、运输和操作的便捷性,在部分地区或特殊环境下可替代布鲁氏菌虎红平板凝集试验抗原用于布鲁氏菌病初筛。 朱绍辉 宫枫举 邵钰 张如民 邵卫星 邵卫星关键词:布鲁氏菌病 平板凝集 试纸条 鹅源新城疫病毒NP、P和L基因的克隆与P基因的表达鉴定 被引量:12 2004年 将鹅源新城疫病毒的NP、P和L基因通过RT PCR方法从尿囊液中扩增后分别克隆进pGEM Teasy载体 ,再分别亚克隆到真核表达载体pCI neo上 ,通过酶切、PCR和测序验证克隆正确。利用P基因开放性阅读框 (ORF)上靠近终止密码上游的AgeI位点 ,将报告基因绿色荧光蛋白 (GFP)基因克隆进P基因真核表达重组质粒 ,分别转染COS 1细胞和CEF细胞 ,在倒置荧光显微镜下可见到绿色荧光 ,表明GFP基因已得到表达 ,由此证明P基因也已得到表达。鹅源新城疫病毒NP、P和L基因的克隆成功 。 刘玉良 吴艳涛 黄勇 邵卫星 韦栋平 刘秀梵关键词:新城疫病毒 绿色荧光蛋白