杨忠东 作品数:20 被引量:62 H指数:5 供职机构: 上海生物制品研究所有限责任公司 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 上海市教育委员会重点学科基金 上海市科学技术委员会资助项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 更多>>
检测人血白蛋白制品中微量铝荧光分析法的建立 被引量:7 2004年 目的 建立一种人血白蛋白铝含量的检测方法。方法 采用Lumogallion(荧光镓 )作为荧光试剂 ,以 10 %三氯乙酸去除蛋白 ,0 1%邻菲啉消除Fe3+ 的干扰 ,建立人血白蛋白中铝含量的荧光分析法。结果 检测限度为 6ng ml,CV值为 3 99%~ 5 74 % ,回收率为 92 5 %~ 10 5 4 %。结论 该方法操作较为简便 ,速度快 ,适于在原子吸收光谱仪缺乏的条件下 。 杨忠东 郭伟明 沈绯 缪立人 何毅明关键词:人血白蛋白 铝含量 荧光分光光度法 应用阿贝折射仪测定血液制品中的蛋白质含量 被引量:4 2001年 陈蓓 杨忠东 季荣科关键词:折射仪 折射率 蛋白质 凯氏定氮法 血液制品 对禽流感H5N1灭活疫苗不同免疫方式诱导的免疫应答及异亚型保护研究 2011年 目的 观察禽流感H5N1灭活疫苗以不同方式免疫后诱导的免疫应答及抗异亚型病毒攻击的保护作用.方法 将H5N1灭活疫苗分别通过腹腔和滴鼻方式免疫BALB/c小鼠,同时以PBS作为对照;免疫后分别以PR8和H9N2病毒攻击,观察小鼠的体重变化和生存情况.采用ELISA对各组小鼠攻毒后不同时间的血清IgG及其亚类水平进行动态检测;流式细胞仪检测脾淋巴细胞亚群情况.采用t检验对各组数据进行比较.结果 PR8和H9N2病毒攻击后,各组小鼠体重均下降,但疫苗组小鼠于后期体重恢复正常,存活率分别为100%和70%-80%,而PBS组小鼠则全部死亡.无论以何种方式免疫,疫苗组的特异性IgG及其亚类水平均明显升高,其中以IgG2a水平升高更为明显.攻毒后疫苗组小鼠脾CD4+与CD8+T淋巴细胞比值出现下降(t=6.8017,P〈0.01);滴鼻免疫组与腹腔免疫组相比降低更明显(t=3.9701,P〈0.05).结论 H5N1疫苗免疫原性良好,可诱导较高水平的特异性抗体产生,诱导的抗体亚类以IgG2a为主.两种免疫方式均可对小鼠提供很好的异亚型保护,而滴鼻免疫能够诱导更强的CD8+T细胞应答. 李冬梅 许文婷 易应磊 杨忠东关键词:流感疫苗 投药 鼻内 禽流感H5N1灭活疫苗与不同纳米化佐剂联合免疫研究 目的观察禽流感H5N1灭活疫苗加不同佐剂以及纳米化佐剂免疫小鼠后产生的免疫应答的差异,同时观察免疫后对异亚型病毒攻击后的保护情况。方法用H5N1灭活疫苗分别联合佐剂氢氧化铝、纳米化氢氧化铝、MF59和纳米化MF59通过腹... 杨忠东 王石磊 许文婷 李冬梅关键词:流感病毒A型 H5N1亚型 流感疫苗 文献传递 麻疹病毒分离及现行疫苗免疫效果分析 被引量:16 2008年 目的 分离麻疹流行病毒,与现用麻疹减毒活疫苗(Measles Vaccine,Live;MV)株病毒进行基因比较和交叉中和试验,以分析现行MV的免疫保护性。方法由江苏省疾病预防控制中心提供2005年麻疹局部流行时急性期病人的咽拭子标本,用Vero/Slam细胞分离病毒,同时提取分离病毒和疫苗病毒核糖核酸,用逆转录-聚合酶链反应扩增血凝素蛋白(H)和核蛋白(N)基因,并进行核苷酸测序分析;另用MV免疫者的血清和麻疹病人的恢复期血清与分离野毒株和疫苗株进行交叉中和试验。结果一次成功分离到4株麻疹野病毒,对其中1株(JS/26-05)作基因测序,N基因进化树分析为H。基因型;与疫苗株病毒基因比较,H基因核苷酸同源性为94.8%,氨基酸同源性为95.1%;N基因核苷酸同源性为94.4%,氨基酸同源性为96.2%,但碳末端150个氨基酸的同源性为90.0%。疫苗免疫者产生的中和抗体水平低于自然感染者,两者的抗体几何平均滴度分别为:针对野毒株1:9.56和1:22.40,针对疫苗株1:40.05和1:65.41,相差2.9~4.2倍;疫苗免疫产生的抗体中和野毒株的能力平均低于疫苗株4.2倍。结论2005年江苏省局部地区麻疹流行时分离的病毒为H1基因型,麻疹分离株与现用疫苗株在基因水平上的差异明显,现用MV的免疫保护作用有所减弱,可能已影响到MV的免疫持久性。 徐闻青 杨忠东 陈蕾 熊珺 赵玉麟 王树巧 程鹏飞 陆培善 陶红关键词:麻疹病毒 基因特征 麻疹减毒活疫苗 免疫效果 上海地区2009年人群甲型流行性感冒病毒抗体水平检测分析 被引量:3 2010年 目的 了解上海地区人群季节性H1、H3亚型流感病毒抗体水平及职业人群中H5、H9亚型禽流感抗体的检出情况.方法 应用血凝抑制试验对上海地区2009年与禽类密切接触的职业人群356人以及一般人群332人各年龄组进行H1、H3、H5、H9亚型流感病毒抗体的血清学监测.结果 A/Brisbane/59/2007(H1N1)抗体阳性分布,一般人群有275人,占82.8%,职业人群有263人,占73.9%;A/Brisbane/10/2007(H3N2)抗体阳性,一般人群有168人,占50.6%,职业人群有195人,占54.8%;人群中A/Brisbane/59/2007(H1N1)抗体阳性率明显高于H3,与2008年上海地区流感病原学监测情况相吻合.职业人群与一般人群H5亚型抗体阳性率分别为4.2%(15/356)和0.3%(1/332);H9亚型抗体阳性率分别为34.6%(123/356)和2.4%(8/332).不同年龄组中,6个月~5岁年龄组和≥60岁的老年组A/Brisbane/59/2007(H1N1)、A/Brisbane/10/2007(H3N2)抗体阳性率较低.结论 上海地区人群对H1、H3季节性流感有较强的免疫保护,儿童和老年人群H1、H3季节性流感抗体水平较低.职业人群禽流感病毒H5、H9抗体有明显升高趋势,要加强对职业人群流感样患者病原学和血清流行病学监测. 吕锡宏 杨忠东 陈浩 蒋懿 居丽雯 朱渭萍 周艳冰 申惠国 蒋露芳 施强 姜庆五甲型流感病毒血凝素基因变异与抗原变异关系研究 2009年 目的了解甲型流感病毒流行株的血凝索基因变异和抗原变异及两者间的关系,结合流行病学资料分析基因变异和抗原变异的吻合情况。方法从2005—2007年上海市季节性流感样病例分离到的甲型流感病毒株中,选取H1N1、H3N2两个亚型中部分有代表性的病毒株,并同WHO北半球流感疫苗推荐株一起,进行血凝素全基因序列测定后做基因进化树分析。同时用灭活的全病毒抗原免疫金黄地鼠,通过血凝抑制试验测定病毒的血凝效价,对血凝抑制结果进行聚类分析,绘制病毒的抗原变异图。结果H3N2分离株与WHO北半球疫苗推荐株A/Sydney/5/97、AVFujiart/411/2002处于不同的基因进化分枝上,时间间隔越久,进化距离越远,同样的结果也出现在抗原变异分析中。而H1N1分离株的基因变异情况和抗原变异情况则不一致,在基因变异中,与疫苗推荐株A/New Caledonia/20/1999的距离远近受到分离时间的影响,抗原变异还与病毒是否从散发病例或聚集性病例分离有关。结论流感病毒血凝素的基因变异和抗原变异的结果基本吻合,采用流行株免疫血清的血凝抑制试验能更好地反映病毒的变异和进化情况。 施强 陈蓓 居丽雯 杨忠东 杨吉星 蒋露芳 吕锡宏 姜庆五关键词:流感病毒A型 基因变异 抗原变异 聚类分析 水痘-带状疱疹病毒gE糖蛋白基因扩增法鉴别水痘减毒活疫苗 目的:利用水痘-带状疱疹病毒(VZV)gE糖蛋白基因鉴别水痘减毒活疫苗。
方法:以提取的病毒DNA为模板,PCR扩增gE糖蛋白基因。经琼脂糖凝胶电泳鉴定。
结果: 水痘减毒活疫苗Oka株VZV(病毒滴... 金于兰 陈哲文 瞿爱东 杨忠东关键词:水痘-带状疱疹 病毒 扩增法 减毒活疫苗 生物制品 文献传递 上海地区人群甲型H1N1流感抗体水平监测分析 被引量:6 2010年 目的 了解上海地区不同年龄组人群甲型H1N1流感血清抗体水平,对人群中甲型H1N1与2008-2009年季节性流感疫苗株A/Brisbane/59/2007(H1N1)的血清抗体水平进行分析比较.方法 应用常规微量血凝抑制试验(micro-hemagglutination inhibition test,HI)对上海地区不同年龄组(0~5月龄、6月龄~4岁、5~24岁、25~59岁和≥60岁)人群进行甲型H1N1流感抗体检测.各年龄组抗体阳性率的比较采用Pearson X2检验和Fisher确切概率法进行分析.结果 上海地区人群甲型H1N1流感血清抗体总阳性率为9.2%(37/404).不同年龄组中以老年人组(≥60岁)的血清抗体阳性率最高,为25.0%(21/84) 其次是成年人组(25~59岁),血清抗体阳性率为10.0%(8/80) 其他年龄组血清抗体阳性率较低.Pearson X2检验结果显示不同年龄组之间抗体阳性率差异有统计学意义.在2008-2009年季节性流感疫苗株A/Brisbane/59/2007(H1N1)抗体阳性的329份血清中有31份甲型H1N1流感抗体阳性,季节性疫苗株抗体阴性的75份血清中有6份甲型H1N1流感抗体阳性.经Pearson X2检验分析,这两层人群甲型H1N1流感抗体阳性率差异没有统计学意义.结论 上海地区人群血清中甲犁H1N1流感抗体水平普遍偏低,其中老年人组抗体水平最高,人群对甲型H1N1流感病毒普遍高度易感 季节性疫苗株A/Brisbane/59/2007(H1N1)HI抗体阳性人群血清不能对甲型H1N1流感病毒产生交叉保护抑制. 高颖阳 陈蓓 居丽雯 杨忠东 吕锡宏 申惠国 姜庆五关键词:抗体 病毒 人用狂犬病灭活疫苗的临床研究和应用 被引量:5 2007年 狂犬病疫苗是预防狂犬病的安全有效方法。本文从人二倍体细胞疫苗、纯化 Vero 细胞狂犬病疫苗、层析纯化狂犬病疫苗的临床研究角度,概述此类广泛应用的人用狂犬病疫苗的优缺点、国内外的发展过程和临床免疫效果,以及我国当前对氢氧化铝佐剂疫苗和无佐剂疫苗的临床研究热点。数据显示国产无佐剂疫苗引起的不良反应发生率和抗体阳转率与进口同类疫苗相近,这类疫苗预防狂犬病的免疫效果是有保证的。 邵益斌 杨忠东 陈则关键词:狂犬病疫苗 疫苗 灭活 安全性 佐剂 免疫