王赫
- 作品数:11 被引量:39H指数:4
- 供职机构:军事医学科学院放射与辐射医学研究所更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学化学工程更多>>
- 高效液相色谱法分析微生物代谢物埃博霉素B的含量被引量:4
- 2008年
- 目的建立检测黏细菌纤维堆囊菌发酵液中代谢物埃博霉素B(EpoB)含量的方法。方法用高效液相色谱法测定EpoB的含量,色谱柱为C18柱,流动相为甲醇-水(60:40),流速为1.0mL/min,进样量为3pL,检测波长为247nm。结果平均回收率为99.55%,RSD为1.94%(n=9),精密度试验表明,日内RSD为0.94%(n=5),日间RSD为1.98%(n=5),EpoB在0.625~10mg/mL浓度范围内呈线性关系。最低检测限为1.25μg/mL。结论此法可以用于检测代谢产物的含量,具有良好的准确度和精密度。
- 王延亮卢育新丁小军王赫张庆林
- 关键词:粘细菌高效液相色谱
- 高脂培养抑制LPS诱导的HSC-T6细胞活化
- 2014年
- 目的:鉴定高脂培养对肝星形细胞活化的影响。方法:培养HSC-T6细胞系,加入含有游离脂肪酸的高脂培养基处理,利用LPS处理活化,通过检测α-SMA的表达分析星形细胞的活化程度,通过Q-PCR分析HSCs细胞胶原的表达,通过Q-PCR实验分析LPS相关通路靶基因表达情况情况。结果:高脂培养能够抑制LPS诱导的HSC-T6细胞增殖,降低HSC-T6细胞α-SMA和胶原I和TIMP-1表达的水平,Q-PCR的分析表明,高脂培养能够抑制HSCs活化后的NF-κB通路下游靶基因MCP-1和IL-6的表达。结论:在体外培养实验中,高脂培养能够抑制LPS诱导的HSC-T6细胞活化。
- 胡彬王赫晏贤春蒋芳王清明杨俊涛
- 关键词:游离脂肪酸肝星形细胞
- 微RNA与非酒精性脂肪性肝病被引量:3
- 2014年
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- 徐会王赫周福祥杨俊涛
- 关键词:微RNAS脂肪肝炎症
- 培养基组成对纤维堆壤菌产埃博霉素的影响被引量:6
- 2008年
- 埃博霉素(Epothilone)是粘细菌纤维堆壤菌(Sorangium cellulosum)产生的具有抗肿瘤活性的次级代谢产物。为了提高埃博霉素A和B的产量,以及B/A的比率,以G52培养基为基础培养基,研究了黄豆粉、酵母粉、酪蛋白胨和丙酸钠对纤维堆壤菌产埃博霉素的影响。结果表明:低脂黄豆粉和酪蛋白胨作为氮源,同时加入6.25 mmol/L丙酸钠作为前体物质,埃博霉素A和B的产量分别比原始条件平均提高1.47倍和2.88倍,B/A的比率比原始条件平均提高了1.97倍。
- 韩莉莉卢育新王赫王延亮丁小军刘丽华张庆林
- 关键词:埃博霉素氮源前体物质
- 小蘖碱抑制游离脂肪酸诱导小鼠肝实质细胞脂肪变性被引量:1
- 2015年
- 目的:探讨小蘖碱(Berberine)对游离脂肪酸(free fatty acids,FFAs)诱导的小鼠肝实质细胞脂肪变性的影响。方法:胶原酶灌注分离BALB/c小鼠原代肝实质细胞并体外培养。分对照组,高脂组,高脂加小蘖碱处理组。体外测定细胞内甘油三酯的含量。利用油红染色观察细胞的脂肪样变性。通过Western印迹法检测肝实质细胞内MAPK相关信号通路磷酸化的变化。实时定量PCR检测肝实质细胞中与脂肪化密切相关的mi R-122的表达和相关靶基因的表达改变。结果:与高脂组比较,小蘖碱处理组肝实质细胞内甘油三酯含量降低,脂肪颗粒减少,脂肪变性明显改善,并具有明显的剂量效应,小蘖碱能够抑制FFAs诱导的JNK通路磷酸化。Q-PCR结果表明小蘖碱能够促进肝实质细胞内mi R-122的表达,并降低脂肪化相关基因Dgat2的表达。结论:小蘖碱能够显著改善高脂诱发的肝脂肪变性,抑制JNK通路磷酸化,其机制可能同mi R-122通路相关。
- 赵娜徐会王赫王钧毅齐社宁杨俊涛
- 关键词:小蘖碱游离脂肪酸肝实质细胞脂肪变性
- 苦参碱抑制游离脂肪酸诱导小鼠肝实质细胞脂肪变性被引量:2
- 2015年
- 目的探讨苦参碱对游离脂肪酸(free fatty acids,FFA)诱导的小鼠肝实质细胞脂肪变性的影响。方法Ⅳ型胶原酶灌注分离BALB/c小鼠原代肝实质细胞并进行体外培养。实验分对照组(CG),高脂组(FG)及苦参碱组(MG)。通过体外测定细胞内三酰甘油的含量。用油红染色的方法观察肝实质细胞的脂肪样变性。Western印迹检测细胞内MAPK相关信号通路磷酸化的变化。实时定量PCR检测细胞中与脂肪化密切相关的miR-122的表达和相关靶基因的表达改变。结果与高脂组比较,苦参碱组肝实质细胞内三酰甘油含量显著降低,脂肪颗粒明显减少,脂肪变性得到改善,表明苦参碱能够抑制FFAs诱导的JNK、p38通路磷酸化。Q-PCR结果表明苦参碱能促进肝实质细胞内miR-122的表达,并降低脂肪化相关基因Fas、Acc1的表达。结论苦参碱能显著改善高脂诱发的肝细胞脂肪样变性,并抑制JNK、P38通路磷酸化,其机制可能同miR-122通路相关。
- 赵娜王赫徐会王钧毅王钧毅杨俊涛
- 关键词:苦参碱游离脂肪酸肝实质细胞脂肪变性MAPK通路
- 游离脂肪酸抑制TRAIL诱导的活化肝星状细胞凋亡被引量:2
- 2014年
- 目的鉴定游离脂肪酸(free fatty acids,FFA)对肝星状细胞(HSC)凋亡的影响。方法体外培养活化人HSC LX-2,加入FFA处理后,TRAIL诱导凋亡,通过流式细胞术检测细胞凋亡情况。通过caspase-3活性检测试剂盒检测细胞内caspase-3的活化情况,通过Q-PCR检测细胞内凋亡相关基因的表达情况。结果 FFA能够抑制TRAIL诱导的活化LX-2细胞凋亡,降低细胞内caspase-3的活性,Q-PCR的分析表明,FFA能够影响细胞内凋亡相关基因BAX的表达,下调死亡受体TRAIL-R2和FAS的表达。结论体外FFA处理,能够抑制活化HSC的凋亡。
- 胡彬王赫徐会王钧毅王钧毅杨俊涛
- 关键词:游离脂肪酸肝星形细胞肝纤维化
- 埃博霉素B的制备工艺研究
- 埃博霉素/(Epothilones/)是粘细菌纤维堆囊菌/(Sorangium cellulosum/)产生的次级代谢产物。与目前临床应用的抗肿瘤化疗药物紫杉醇具有稳定微管的相同作用机理,但对紫杉醇耐药的肿瘤细胞具有抑制...
- 王赫
- 关键词:埃博霉素粘细菌代谢产物发酵工艺
- 文献传递
- 粘细菌代谢产物的研究进展被引量:10
- 2005年
- 粘细菌能产生多种次级代谢产物。近5年来,epothilone类化合物进入Ⅰ/Ⅱ期临床试验,研究了构效关系,发现新的大环内酯类及环肽类化合物。随着对粘细菌代谢产物研究的逐步重视,粘细菌研究将有更大的发展。
- 王赫张庆林
- 关键词:粘细菌代谢产物EPOTHILONE
- 固相萃取-液相色谱法检测发酵液中埃博霉素被引量:4
- 2009年
- 目的建立固相萃取-液相色谱法检测纤维堆囊菌发酵液中代谢物埃博霉素含量。方法将树脂装填在固相萃取空柱管上,依次以2倍体积水和5倍体积50%甲醇溶液对树脂进行预处理,然后以15倍体积80%甲醇溶液浸泡10 min后,低流速提取,收集洗脱液旋转干燥,用高效液相色谱(HPLC)检测。结果在发酵终点(144 h),埃博霉素A(EpoA)和埃博霉素B(EpoB)的含量分别为1.84和2.64 mg/L。结论该法稳定性良好,可以用于检测代谢产物的含量。
- 韩莉莉卢育新王赫王延亮丁小军刘丽华张庆林
- 关键词:埃博霉素固相萃取