刘利 作品数:13 被引量:105 H指数:5 供职机构: 第三军医大学西南医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
白血病细胞雄激素受体基因启动子甲基化状态的研究 被引量:7 2007年 目的检测白血病细胞雄激素受体基因启动子区CpG岛甲基化状态情况,初步探讨雄激素受体基因启动子区甲基化与白血病发病机制的可能联系。方法应用甲基化特异性PCR技术(methylation specific PCR,MSP)检测3种白血病细胞株及15例患者骨髓标本雄激素受体基因甲基化状态。结果白血病细胞株均出现甲基化和非甲基化带,呈部分甲基化状态,而作为对照的正常人白细胞均只出现非甲基化带。15例白血病患者全部检出甲基化状态。结论白血病细胞的雄激素受体基因启动子区存在高甲基化现象,可能为白血病的致病机制分析提供了一个新的方向,提示AR基因启动子CPG岛的甲基化有可能成为白血病的新的参考标记物。 王刚 刘利 陈杰 辛海明 张晓兵 蔡云 侯露 郭乔楠 刘泽军关键词:白血病 雄激素受体基因 DNA甲基化 甲基化特异性PCR 胆管癌细胞层粘连蛋白受体表达下调对蛋白水解酶MMP-2、MMP-9 mRNA表达的影响 被引量:10 2002年 研究层粘连蛋白受体 (lamininreceptor,LNR)反义寡核苷酸硫代修饰片段 (AS OD)对人胆管癌QBC939细胞MMP 2、MMP 9基因表达的调节。应用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)方法分析 12 μmol/L浓度的LNRAS OD在作用 72h后对QBC939细胞MMP 2、MMP 9mRNA表达水平的影响。结果显示 ,LNRAS OD能明显抑制人胆管癌细胞表达MMP 2、MMP 9的作用 ,与正常对照相比 ,其MMP 2、MMP 9mRNA相对丰度分别下降了 33 2 %和 2 3 9% (P <0 0 5 )。研究表明 ,LNRAS OD是胆管癌细胞表达MMP 2和MMP 9基因的调节剂 ,能抑制胆管癌细胞MMP 2、MMP 9基因的表达。 陈长宏 王曙光 李大江 刘利关键词:受体 层粘连蛋白 寡核苷酸类 胆管癌 白血病细胞雌激素受体α启动子CpG岛甲基化状态的实验研究 被引量:6 2007年 目的检测3种白血病细胞Jurkat、Molt-4、HL-60的雌激素受体α(estrogen receptorα,ERα)基因启动子ERα-A、ER-αB CpG岛甲基化状态,初步探讨ERα启动子区的甲基化状态以及与白血病发病机制的可能联系。方法应用甲基化特异性PCR技术(MSP)检测3种白血病细胞株与正常人外周血单个核细胞ERα启动子区ERα-A和ERα-B启动子区CpG岛甲基化状态。结果白血病细胞株ERα-A和ERα-B均出现甲基化条带,为全甲基化状态;正常人外周血单个核细胞ER-αA和ER-αB CpG岛呈现非甲基化状态。结论ERα基因启动子ERα-A和ER-αB CpG岛的甲基化状态有可能成为白血病新的分子诊断标记物。 刘利 王刚 陈杰 张晓兵 刘泽军关键词:白血病 雌激素受体Α 甲基化 甲基化特异性PCR 重庆市人群便秘患病率流行病学研究 被引量:45 2004年 目的 探讨重庆居民便秘的流行病学情况。方法 采用整群随机抽样法抽取重庆市居民 14 92人进行问卷调查。结果 重庆市居民便秘的患病率为 3.19%。男性患病率显著低于女性 ,男女比例为 1∶1.6 1。随着年龄的增长 ,便秘的患病率升高。结论 重庆市居民便秘的患病率低于国外报道水平。 向国春 龙庆林 刘利 孙英姿 房殿春关键词:便秘 流行病学 层粘连蛋白受体与胆管癌细胞不同转移性亚群的关系研究 被引量:1 2002年 探讨胆管癌细胞不同转移性亚群层粘连蛋白受体的表达差异。以腹膜浸润筛选模型筛选胆管癌细胞高、低转移性亚群 ,体外侵袭实验验证筛选结果 ,流式细胞仪比较两亚群间层粘连蛋白受体的表达差异。结果显示 ,本研究成功地以腹膜浸润筛选模型筛选出胆管癌细胞高、低转移性亚群 ,体外侵袭实验进一步验证了两亚群间存在着侵袭能力上的显著差异。高、低转移性亚群层粘连蛋白受体的阳性细胞百分数分别为 (36 36± 9 2 2 ) %和 (13 17±3 4 3) % ,两者间差异显著 (P <0 0 5 )。提示层粘连蛋白受体的表达与体外胆管癌细胞的不同转移倾向密切相关。 陈长宏 王曙光 李大江 刘利关键词:层粘连蛋白受体 胆管细胞 肿瘤转移 腹膜浸润筛选模型体外筛选胆管癌细胞不同转移性亚群 被引量:2 2002年 目的 探讨以腹膜为载体用于体外细胞筛选的可行性。方法 利用经处理后的脏层腹膜 ,分离筛选胆管癌细胞不同转移性亚群 ,并以体外侵袭实验验证所筛选出的不同转移性亚群细胞间侵袭能力的差别。结果 以腹膜为筛选介质 ,成功地筛选出胆管癌细胞高、低转移性亚群 ,两亚群细胞间在粘附、迁移能力上均存在着显著的差别 (P <0 0 5 )。结论 腹膜浸润筛选模型用于细胞筛选可行、有效。 陈长宏 王曙光 李大江 刘利关键词:胆管癌 人iASPP全长CDS的分段扩增、克隆及鉴定 被引量:4 2007年 目的最初报道的iASPP长度为351个氨基酸,但最近发现iASPP的全长应为828个氨基酸,为了探讨全长iASPP的功能,我们采取3分段扩增的策略克隆全长iASPP基因。方法从HL-60细胞中提取总RNA、DNA,RT-PCR分段扩增目的基因,克隆至pMD19-Tsimple载体,测序,并亚克隆至pCDNA3.1载体。结果重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)-iASPP经测序,与GenBank上登陆的人iASPP cDNA(gi:60457962)序列完全一致。结论成功构建了iASPP真核表达载体。 陈杰 辛海明 蔡云 侯露 王刚 刘利 卢欣 钟山 刘泽军关键词:IASPP 克隆 P53 医务人员的职业暴露和防护 被引量:27 2007年 刘利 蔡绍丽 宫海燕 曹平关键词:职业暴露感染 医务人员 血源性疾病 职业暴露危险 肼苯达嗪诱导白血病细胞雌激素受体α(ERα)基因表达的初步研究 2007年 目的研究肼苯达嗪能否诱导白血病细胞ERα重新恢复基因表达。方法应用RT-PCR检测肼苯达嗪处理白血病细胞株HL-60、MOLT-4、Jurkat前后雌激素受体α(ERα)基因表达的变化。结果三种白血病细胞经过肼苯达嗪处理后,ERα恢复mRNA表达。结论肼苯达嗪对白血病细胞的ERα基因具有诱导基因表达的作用,可能使之成为一种新的白血病的去甲基化治疗药物。 刘利 谭德安 王刚 陈杰 张晓兵 刘泽军关键词:白血病 雌激素受体Α 基因表达 反义寡核苷酸转染对胆管癌细胞侵袭能力的实验研究 被引量:1 2002年 目的 探讨层粘连蛋白受体反义寡核苷酸 (AS OD)对胆管癌细胞体外侵袭和转移能力的影响。方法 以层粘连蛋白受体反义寡核苷酸片段转染胆管癌细胞高转移性亚群 ,RT PCR和流式细胞仪检测转染前后细胞层粘连蛋白受体mRNA和蛋白的表达差异 ,体外粘附实验和侵袭实验检测转染前后细胞粘附和侵袭能力的改变。结果 反义寡核苷酸转染后可在mRNA水平和蛋白水平下调层粘连蛋白受体的表达 ,且下调作用呈剂量依赖性。与空白对照组及顺义寡核苷酸转染组比较相差均显著 (P<0 0 5 )。体外粘附和侵袭实验显示转染后细胞粘附和侵袭能力均较之转染前有显著下降 ,两者间相差均显著 (P <0 0 5 )。结论 层粘连蛋白受体反义寡核苷酸可降低胆管癌细胞体外侵袭和转移能力。 陈长宏 王曙光 李大江 刘利关键词:层粘连蛋白受体 反义寡核苷酸 胆管癌 肿瘤转移