武艳
- 作品数：4 被引量：2H指数：1
- 供职机构：首都医科大学更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 猕猴脑胱天蛋白酶-3活化及其靶蛋白的体外研究(英文)被引量：1
- 2002年
- 凋亡的主要生化过程包括胱天蛋白酶的活化及其对细胞内蛋白质的选择性切割 .在已知的胱天蛋白酶中 ,可被多种凋亡刺激信号激活的胱天蛋白酶 3备受注目 .为进一步揭示灵长类动物神经组织中未知的胱天蛋白酶 3靶蛋白 ,采用成年猕猴脑组织粗提物作为无细胞体系 ,通过加入 granzymeB引发凋亡途径的部分反应 ,如胱天蛋白酶 3的活化及随后发生的蛋白质水解 .经蛋白质印迹分析发现 ,与 granzymeB共孵育后 ,猕猴脑胱天蛋白酶 3以两步方式从酶原转化为活性酶 .对猕猴脑组织自身蛋白质的进一步分析显示 ,多聚ADP 核糖聚合酶 (PARP)被水解为长 85ku的片段 ,此片段提示胱天蛋白酶 3的特异切割活性 .此外 ,神经元凋亡抑制蛋白 (NAIP)也被切割 ,产生长约 4 0ku的小片段 ,但是它的出现不被胱天蛋白酶 3特异性抑制剂Ac DEVD CHO阻断 ,因此可能是 granzymeB直接作用于NAIP所致 .以上结果提示 ,凋亡相关酶切反应可在成年猕猴脑组织提取物中得到重现 ;NAIP可能是granzymeB而非胱天蛋白酶 3的作用靶点 .
- 张爱群初向阳赖惠玲武艳姚大卫
- 关键词：活化靶蛋白体外研究灵长类大脑
- 颗粒酶B和胱天蛋白酶-3对肌动蛋白水解作用的体外研究(英文)
- 2004年
- 已知凋亡过程的基本变化之一是细胞骨架的异常 ,后者在某种程度上决定凋亡细胞的形态学特征 .为揭示凋亡相关蛋白酶———颗粒酶B和胱天蛋白酶 3对胞浆型肌动蛋白的水解作用 ,采用成年猕猴脑组织粗提物作为无细胞体系 ,以外源性颗粒酶B触发凋亡途径的终末反应 .经一系列免疫印迹分析发现 :孵育 12h方见 β 肌动蛋白被剪切 ,产生 4 1ku和 15ku水解片段 ,并证明该水解反应为颗粒酶B依赖 ;颗粒酶B活化的内源性胱天蛋白酶 3和重组胱天蛋白酶 3均不能水解脑提取物中的β 肌动蛋白 ,尽管胱天蛋白酶 3可作用于纯化的肌动蛋白 ,产生 15ku片段 .以上结果提示 ,内源性 β 肌动蛋白对凋亡相关蛋白酶 ,尤其胱天蛋白酶 3不敏感 。
- 张爱群武艳周宁新姚大卫
- 关键词：肌动蛋白颗粒酶B蛋白质水解免疫印迹分析
- 胱天蛋白酶-3在不同年龄猕猴脑组织中的表达
- 2004年
- 目的 对胱天蛋白酶 3在正常衰老的灵长类动物 (猕猴 )脑中的表达和分布状况进行初步探讨。 方法 健康的 4岁及 2 0岁雌性猕猴各 4只 ,经全身麻醉后取脑 ,用免疫组织化学和免疫印迹法观察额叶皮质、海马和小脑胱天蛋白酶 3的表达和分布。 结果 额叶皮质胱天蛋白酶 3的免疫反应性很低 ,而海马的CA1、CA3和CA4区可见低至中度阳性染色的锥体细胞 ,小脑皮质的少数浦肯野细胞呈强阳性染色。在 2 0岁猴上述 3个脑部位中 ,除运动区第V层偶见强阳性染色的大锥体细胞外 ,其余与成年组无差别。免疫印迹显示 ,3个脑区胱天蛋白酶 3含量无明显的脑区或年龄差异。 结论 胱天蛋白酶 3在发育成熟后的猕猴脑内持续表达 ,但表达量及阳性细胞的分布与年龄无关。
- 张爱群武胜昔武艳赖惠玲姚大卫
- 关键词：猕猴脑组织基因表达免疫印迹法免疫组织化学
- 胱天蛋白酶3在啮齿类动物和猕猴脑中的表达:种系和年龄相关研究(英文)被引量：1
- 2006年
- 背景:有研究显示,凋亡相关蛋白酶—胱天蛋白酶3被认为是动物和人脑中细胞凋亡过程中的关键酶,正常人或阿尔茨海默病患者的脑中有该酶的表达,这与对成年啮齿动物脑研究的结果之间存在着矛盾。目的:揭示胱天蛋白酶3在啮齿类动物和猕猴脑中的表达有无差异,分析该酶在猕猴脑中的表达水平有无年龄差异,以及不同猕猴脑区间有无差别。设计:单变量均数的平行比较。单位:解放军总医院肝胆外科研究所,香港中文大学解剖学系。材料:实验于2003-08/2005-02在解放军总医院肝胆外科研究所及香港中文大学解剖学系进行的,所用的2,12,24和48周龄(每周龄组n=5)SD大鼠、ICR小鼠和快速衰老小鼠(senescence-acceleratedmice,SAM),雌雄不限,由香港中文大学实验动物服务中心提供;健康雌性4岁和20岁猕猴各4只,均购自解放军总医院医学实验动物中心(SCXK-(京)2003-002)。以上动物均在无任何实验干预的标准条件下养殖。方法:①所有脑组织标本均从猕猴和啮齿动物中新鲜切取,制成匀浆后通过免疫印迹法检测啮齿类动物和猕猴脑组织中胱天蛋白酶3蛋白的表达;②用同样的方法比较两个年龄组猕猴的大脑皮质、海马和小脑中该蛋白的表达量,并通过免疫组织化学法显示胱天蛋白酶3在猕猴3个脑区中的细胞分布状态。主要观察指标:①胱天蛋白酶3在啮齿类动物和猕猴脑中的免疫印迹检测;②胱天蛋白酶3在猕猴3个脑区中的细胞分布状态。结果:①免疫印迹检测结果:胱天蛋白酶3在3种2周龄的鼠脑中表达模式相同,在其它年长鼠脑中未检测到该酶;胱天蛋白酶3在成年和老年猕猴脑中均有持续表达,表达量低于2周龄鼠。胱天蛋白酶3在猴脑中以酶原(Mr32000)的形式存在,未发现该酶在猕猴脑中的表达量有年龄和脑区差异。②免疫组织化学法显示结果:猕猴大脑皮质胱天蛋白酶3的免疫反应性很低
- 张爱群高丽杰武艳赖惠玲
- 关键词：年龄因素
