万汇涓 作品数:49 被引量:103 H指数:6 供职机构: 北京大学深圳医院 更多>> 发文基金: 深圳市科技计划项目 广东省自然科学基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
依达拉奉对糖尿病大鼠脑缺血再灌注海马区神经元凋亡的影响 被引量:1 2014年 目的探讨依达拉奉对糖尿病大鼠脑缺血再灌注海马区神经元凋亡的影响。方法健康SD大鼠28只,采用链脲佐菌素(55~60 mg/kg)腹腔注射诱导糖尿病,在糖尿病基础上线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注(MCAO)模型。将大鼠随机分为4组:假手术组、MCAO组、MCAO+生理盐水组、依达拉奉干预组(0.5 g/kg,2次/d);术后3 d处死动物取出海马组织,固定后进行石蜡切片,通过TUNEL评价神经细胞凋亡情况,采用免疫组化的方法检测各组大鼠海马区神经元凋亡蛋白Fas的表达。结果 TUNEL染色显示,与假手术组比较,MCAO组、MCAO+生理盐水组海马区神经元凋亡明显增多,而依达拉奉干预组海马区神经元凋亡明显减少(P<0.05);免疫组化结果,与假手术组比较,MCAO组、MCAO+生理盐水组海马区神经元凋亡蛋白Fas表达明显增多,而依达拉奉干预组海马区神经元凋亡蛋白Fas表达明显减少(P<0.01)。结论依达拉奉可能通过减少糖尿病大鼠脑缺血再灌注海马区神经元凋亡蛋白Fas表达、从而减少神经元的凋亡,起到对海马区神经的保护作用。 丁欣 陈晓敏 吴迪宾 赵雷 陈德杰 邓远飞 万汇涓 黄春娇关键词:依达拉奉 糖尿病 脑缺血再灌注 FAS蛋白 脑保护 人脐血细胞移植对高血糖模型小鼠的治疗作用 被引量:1 2009年 目的探讨尾静脉移植人脐血细胞对糖尿病模型小鼠血糖的影响。方法选择60只昆明小白鼠,随机抽取5只作为对照组,其余55只采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)的方法制备糖尿病鼠模型。成模后将小鼠随机分成移植组(26只)和糖尿病组(12只)。将分离的人脐血单个核细胞于对数增长期用PKH26标记后,以2×106/ml经尾静脉注射入移植组小鼠体内。于注射后第4天和第14天观察3组小鼠的血糖和胰岛素水平,并用流式细胞仪和荧光显微镜观察PKH26标记的人脐血单个核细胞在体内的分布。结果人脐血单个核细胞植入第4天,移植组小鼠血糖和胰岛素水平与糖尿病组、对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);移植第14天移植组小鼠血糖水平及胰岛素水平与糖尿病组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。流式细胞检测发现移植第4天的糖尿病小鼠的胰、脾、肝、骨髓组织内均可见PKH26+细胞,而移植第14天上述各部位未发现PKH26+细胞,荧光显微镜观察上述部位的冷冻切片结果也支持这一结果。结论将人脐血细胞移植到未用免疫抑制剂的糖尿病小鼠体内可存活,并可以在一定时间内降低糖尿病小鼠的血糖水平。 张芳婷 万汇涓 叶静 房家智 尹美珺 黄春桥 于洁关键词:脐血干细胞移植 血糖 异体异位发育睾丸组织的蛋白质组图谱构建及差异蛋白分析 被引量:5 2009年 目的应用蛋白质组学实验方法对在异体异位生长发育的新生小鼠睾丸组织进行差异蛋白分析,从而对睾丸组织体外移植模型用于生精细胞发育研究的可行性提供进一步的理论依据。方法以新生小鼠睾丸组织为供体,免疫缺陷小鼠为受体进行组织移植,移植8周后收集移植物组织,采用双向凝胶电泳(2-DE)分离移植物组织总蛋白,同时分离8周正常小鼠睾丸组织总蛋白作对比分析,运用Im ageM aster 2D E lite 5.0图像分析软件识别移植物组织与正常组织差异表达的蛋白质点,应用基质辅助电离解析飞行时间质谱(MALD I-TOF-MS)获取肽质量指纹图谱(PMF),检索数据库鉴定差异表达的蛋白质点。结果正常睾丸组织和移植物组织双向电泳图谱的平均蛋白质点数分别为(1 326±15)个和(1 561±20)个,3次重复实验的蛋白质点位置重复性较好。通过比较两者的双向凝胶电泳图谱,得到表达差异量较大的蛋白质点21个。选取6个仅在正常睾丸组织中有表达的蛋白质点进行质谱和生物信息学分析,鉴定出的6种蛋白质,除血红蛋白α1链(Hbα-α1)外,其他5种蛋白均为在小鼠睾丸中有较高表达的蛋白质,包括A激酶锚定蛋白结合的精子蛋白(ASP)、磷脂过氧化氢物谷胱甘肽过氧化物酶(GPX4)、精子蛋白(Sp17)、天门冬酰胺酶样蛋白(ASRGL1)和过氧化物氧化还原因子4(Prdx4)。结论在本实验中,从异体异位生长发育成熟的新生小鼠睾丸组织中检测到5种在睾丸中特异性高表达蛋白质的缺失,这些蛋白质主要在精子运动、精子顶体形成以及精子的受精等功能中发挥作用。 于洁 廖东江 叶静 张芳婷 龙霞 万汇涓 尹美珺 杨会林 房家智 蔡志明关键词:双向凝胶电泳 AngⅡ通过刺激肝癌细胞发生上皮间质转换促进肝癌转移 被引量:1 2017年 目的探讨肾素-血管紧张素系统(renin angiotensin system,RAS)在肝癌组织中的表达及血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)刺激肝癌细胞发生上皮间质转换现象.方法搜集56例肝癌手术标本,组织标本石蜡切片,免疫组织化学法测定血管紧张素转化酶1(angiotensin converting enzyme 1,ACE1)、ACE2、vimentin、ecadherin蛋白表达定量;将细胞分组,用AngⅡ刺激肝癌细胞系,比较不同分组细胞系vimentin、ecadherin蛋白表达差异.结果与正常组织相比,肝癌组织ACE1、AT1表达上升,上皮间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)标志物vimentin蛋白表达均上升,ecadherin均下降.AngⅡ刺激下,SSMC7721细胞系的vimentin基因和蛋白表达均上升,ecadherin下降;加入AngⅡ的抑制剂Ang1-7后,这种变化受到抑制;加入Ang1-7的抑制剂A779后,再次出现vimentin上升,ecadherin表达下降.单独加入A779与对照组差别不大.结论 AngⅡ可能通过刺激肝癌细胞发生EMT对肝癌的转移起到促进作用. 齐明华 刘吉奎 叶静 李明华 万汇涓 漆正宇 尹耀新 欧希 余光银关键词:肾素血管紧张素醛固酮系统 肝癌细胞 小鼠原始生精细胞裸鼠皮下移植动物模型的制作 被引量:6 2005年 目的制作睾丸组织异体异位移植动物模型,并观察原始生精细胞在异体异位继续生长、发育情况。方法将鼠龄为1~2d昆明小鼠睾丸组织移植至去势裸鼠背部(n=29),于移植后30~110d取出移植物,观察移植物的生长情况、表观形状以及各级生精细胞、生精上皮发育的期相情况。结果术后29只受鼠全部存活,在其背部均观察到移植物的生长,移植物直径由移植前的(0.73±0.05)mm增加到(6.75±0.73)mm,湿重由移植前(5.67±0.72)mg增加到(113.12±78.23)mg,受鼠皮肤血管已广泛深入到移植物内;光镜下可见移植物中生精小管结构清晰,移植物与受鼠皮肤之间建立了紧密连接,移植物中含有各级生精细胞及精子,在过碘酸Schiff(PAS)染色的移植物标本可见整个精子发生周期(从StageⅠ到StageⅫ)各阶段的生精细胞。结论新生小鼠睾丸组织移植到去势裸鼠背部能够继续生长、发育,可作为研究生精细胞增殖发育规律和精子发生调控机制的动物模型。 于洁 蔡志明 叶静 张芳婷 万汇涓 房家智 宗书东 王介东关键词:动物模型 皮下移植 裸鼠 生精上皮 皮肤血管 生精小管 LASIK与LASEK术后角膜神经损伤和修复的实验研究 被引量:6 2010年 目的 比较兔眼LASIK与LASEK两种准分子激光手术后角膜神经损伤和再生修复情况.方法 选用健康、纯种新西兰白兔30只,随机分为6组,每组5只,1组为正常对照组,其余5组为实验组,实验组白兔一眼行LASIK手术;另一眼行LASEK手术.术后1、7 d,1、3、6m取兔角膜行氯化金染色,光镜下观察LASIK与LASEK术后角膜神经损伤及修复情况.结果 LASIK与LASEK手术后不同时期角膜神经损伤和再生修复有明显差异.结论 LASIK术后角膜神经损伤的程度比LASEK重,角膜神经再生修复速度慢. 刘畅 辛冰 万汇涓 乔诗凝 贺美关键词:LASIK LASEK 角膜神经 精原细胞体外增殖分化在辅助生育技术中的应用 于洁 蔡志明 房家智 张芳婷 叶静 万汇涓 尹美珺 龙霞 桂耀庭 该研究采用自制的睾丸组织营养液为生精细胞提供体外生长的微环境,使未成熟的生精细胞成功分化为精子细胞。采用免疫缺陷动物作为孵化器,使小鼠未成熟睾丸组织在异体异位成功发育、完成生精过程,并对移植物组织中的基因表达情况进行探讨...关键词:关键词:辅助生育 5氮杂脱氧胞苷对鼻咽癌细胞RASSF1A基因甲基化和mRNA表达的影响 被引量:1 2012年 目的:研究5氮杂脱氧胞苷对鼻咽癌CNE2细胞中RASSF1A基因甲基化和mRNA表达的影响。方法:用不同浓度(0、5、10、20μmol/L)5氮杂脱氧胞苷处理CNE2细胞,采用甲基化特异性PCR(MSP)法对处理后细胞中RASSF1A基因甲基化状态进行检测;并用SYBR Green qReal Time-PCR法检测RASSF1A mRNA的表达。结果:阴性对照组CNE2细胞中,RASSF1A基因呈完全甲基化状态,当用5μmol/L 5氮杂脱氧胞苷处理后,CNE2细胞出现非甲基化产物,20μmol/L 5氮杂脱氧胞苷处理后,CNE2细胞甲基化状态完全被逆转,均为非甲基化产物。阴性对照组CNE2细胞RASSF1A基因呈低表达,经5~20μmol/L 5氮杂脱氧胞苷处理后,RASSF1A mRNA的相对表达量逐渐增加,10和20μmol/L 5氮杂脱氧胞苷处理组,RASSF1A mRNA表达水平均明显高于阴性对照组(P<0.01);且20μmol/L处理组明显高于5μmol/L处理组(P<0.01)。结论:CNE2细胞RASSF1A基因甲基化可以被5氮杂脱氧胞苷逆转,且5氮杂脱氧胞苷可促进RASSF1A mRNA的表达。 叶静 李明华 张芳婷 万汇涓 龙霞关键词:鼻咽癌 CNE2 RASSF1A 甲基化 MRNA表达 新生小鼠睾丸组织异体异位移植物中精子的生精功能初探 目的:探讨新生小鼠睾丸组织异体异位移植后所生成精子的受精能力。方法:以仅有原始生精细胞的新生小鼠睾丸组织为供体,免疫缺陷小鼠为受体进行异体异位移植;并在8周后取出移植物,采用形态学染色和电镜技术对曲细精管及其中的生精细胞... 张芳婷 于洁 蔡志明 房家智 万汇涓 叶静 尹美珺文献传递 睾丸移植物间质细胞4种基因的表达分析 2011年 目的研究新生小鼠睾丸组织异体异位移植后,4种在睾丸间质细胞中起重要作用的基因表达情况,为异体异位睾丸组织移植模型用于科研及临床的可行性提供进一步实验数据。方法将162只1-2d昆明小鼠的睾丸移植到54只7-12w去势雄性免疫缺陷小鼠背部;在移植后9个时间段(3d和1-8w)取出移植物;选取4种在睾丸间质细胞中表达或高表达的基因313.hsd、1r、p450scc和star,采用聚合酶链反应,对发育不同阶段移植物中4种基因的表达情况进行分析,并与正常小鼠相应各年龄段睾丸中的基因表达情况相比较。结果在9个时间段取出的移植物中,所测定4种基因的表达趋势与在正常小鼠睾丸中所见基本相同。结论新生小鼠睾丸组织异体异位移植到免疫缺陷小鼠体内后,间质细胞4种受试基因的表达趋势与在正常小鼠中的表现基本相同。 徐安平 夏勇 杨会林 龙霞 李明华 万汇涓 于洁关键词:莱迪希细胞 基因表达