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凝血酶刺激单核/巨噬细胞产生IL-8增强卵巢癌细胞侵袭力的实验研究被引量：2: 2009年; 目的:研究凝血酶刺激正常人外周血来源单核/巨噬细胞(MO/MA)后对卵巢癌细胞侵袭力的影响。方法:分离正常女性外周血单核细胞后,用印度墨汁吞噬试验检测凝血酶刺激MO/MA后吞噬功能的变化;以凝血酶刺激MO/MA后的上清为趋化物,检测对卵巢癌细胞系(ES-2,SKOV-3,HO-8910)体外侵袭力的影响;阻断侵袭实验中加入IL-8单克隆中和抗体。转录因子试剂盒AP1、STAT、Inflammation 1、Oncogene 3家族筛选凝血酶通过何种细胞信号转导途径激活MO/MA。结果:(1)凝血酶未显著提高MO/MA的吞噬能力;(2)基质胶体侵袭实验表明,上皮性卵巢癌细胞系ES-2在MO/MA+凝血酶刺激组上清作用下,侵袭力增强(161.9±11.18,n=6),其侵袭细胞数目与卵巢癌腹水刺激组(157.5±14.86,n=4)类似,但显著高于阴性对照组普通培养基(47.25±12.45,P<0.05),添加水蛭素(凝血酶抑制剂)后能显著降低其侵袭力(73.5±17.3,P<0.01);抗IL-8单克隆抗体对ES-2细胞侵袭的阻断作用呈浓度依赖性,相同体外侵袭实验在SKOV-3细胞系(n=2)及HO-8910细胞系(n=2)中得到类似结果;(3)转录因子检测表明,In-flammation 1及Oncogene 3家族中几乎所有涉及炎症的转录因子包括c-Fos,c-Rel,NF-κbp50,NF-κb p65,c/EBPa,Egr-1,HIF-1,OctⅠ,OctⅡ在凝血酶刺激巨噬细胞后活性增加(n=4)。结论:凝血酶刺激MO/MA通过上调IL-8产生,显著增强卵巢癌细胞的侵袭力,表明卵巢癌腹膜内凝血酶可能通过教育和诱导MO/MA向TAM样细胞分化后,加速肿瘤细胞腹膜内转移。; 张婷王睿黎马政文王颖狄文程忠平徐红马庆良李卫平汪希鹏; 关键词：巨噬细胞肿瘤相关巨噬细胞肿瘤白细胞介素-8

遗传性卵巢上皮性癌综合征的诊治进展: 2009年; 遗传性卵巢上皮性癌（卵巢癌）综合征（hereditary ovarian cancer syndrome，HOCS）是一组具有常染色体显性遗传特点的恶性肿瘤易感综合征，涉及多个基因突变，家系成员主要表现为卵巢癌及其他肿瘤易感倾向。流行病学研究发现，至少10％的卵巢癌表现为家族遗传倾向，与某些遗传基因突变有关。目前，已经明确的HOCS主要有以下两种类型，; 王睿黎汪希鹏; 关键词：遗传性诊治常染色体显性恶性肿瘤基因突变卵巢癌

凝血因子Ⅱ可诱导单核细胞和巨噬细胞分化为卵巢癌腹膜内肿瘤相关巨噬细胞被引量：10: 2009年; 目的探讨激活的凝血因子Ⅱ(Ⅱ因子)能否诱导外周血单核细胞分化为卵巢上皮性癌(EOC)腹膜微环境肿瘤相关巨噬细胞。方法分离正常女性外周血单核细胞和巨噬细胞(MO/MA)以及EOC腹水内肿瘤相关巨噬细胞(TAM);凝血因子Ⅱ刺激后,检测MO/MA和TAM表面Ⅱ因子受体PAR1、3、4表达,分析MO/MA在Ⅱ因子或(Ⅱ因子+水蛭素)刺激后CD14、CD68和CD163表达比例,ELISA检测Ⅱ因子刺激后巨噬细胞表达的细胞因子,Real-timePCR检测细胞因子、趋化因子mRNA表达。结果MO/MA及TAM细胞表面上均有Ⅱ因子受体PAR1、3、4表达;Ⅱ因子刺激后,MO/MA高表达CD14[(50.23±4.34)%]及CD163[(3.82±1.93)%],与Ⅱ因子+水蛭素刺激组[CD14(32.37±6.24)%,CD163(0.56±0.28)%]及培养液对照组[CD14(40.06±8.06)%,CD163(1.02±0.38)%]相比差异有统计学意义(P<0.05);ELISA结果示Ⅱ因子刺激后IL-8、IL-10及TGF-β分泌表现出时间依耐性特征,刺激后3h表达量达高峰;Real-timePCR显示IL-8、IL-10、IL-12、CXCR2、CCR2、CCL18mRNA表达上调,CXCR1和TGF-β表达下降。结论激活的凝血因子Ⅱ能诱导外周血MO/MA分化为CD163highIL-10highIL-12highCCL18highIL-8high,具有类似肿瘤相关巨噬细胞特征的M2型巨噬细胞亚型;Ⅱ因子可能参与了EOC腹膜微环境浸润的TAM的分化和极化作用。; 张婷马政文王颖汪希鹏王睿黎狄文程忠平李卫平; 关键词：凝血因子巨噬细胞肿瘤相关巨噬细胞卵巢肿瘤

凝血因子Ⅻ诱导外周血单核细胞分化为卵巢癌腹膜内肿瘤相关巨噬细胞的实验研究被引量：2: 2010年; 目的:探讨凝血因子Ⅻ能否诱导外周血单核细胞(MO)分化为卵巢癌(EOC)腹膜微环境中的肿瘤相关巨噬细胞(TAM)。方法:分离正常女性外周血MO,在体外经Ⅻ因子刺激,流式荧光激活细胞分选技术(FACS)检测刺激后CD14、CD68和CD163表达的比例;ELISA检测TNF-α、IL-4、IL-8、TGF-β、IL-10、MMP2等因子的表达;Real-timePCR检测IL-10、IL-8、CCL18、CCR2、TGF-β、CXCR1及CXCR2等细胞因子及相关受体mRNA的表达,添加Ⅻ因子抑制物-C1酯酶抑制剂(C1-INH)后检测相应mRNA转录变化。结果:经Ⅻ因子刺激后,MO表面CD14,CD163表达比例上调[CD14:(57.025±11.135)%,CD163:(1.09±0.21)%],与阴性对照组[CD14:(45.2±5.24)%,CD163:(0.7±0.08)%]相比有统计学差异(P<0.05);经Ⅻ因子刺激后MO分泌IL-8,IL-10及TGF-β分泌表现出时间依赖性,IL-8及TGF-β于刺激后12h分泌达到高峰,IL-10分泌高峰为刺激后3h;刺激后IL-8,IL-10,CXCR2,CCR2以及CCL18mRNA的表达上调,添加C1-INH后,相应mRNA的转录水平下调。结论:凝血因子Ⅻ能诱导外周血MO分化成表型为CD14highCD163highIL-10highCCL18highIL-8high的单核巨噬细胞,类似TAM特征的巨噬细胞亚型,Ⅻ因子可能参与EOC腹膜微环境中浸润的MO分化,从而调控EOC的腹膜转移。; 王睿黎张婷马政文王颖马庆良徐红程忠平汪希鹏; 关键词：单核细胞肿瘤相关巨噬细胞卵巢肿瘤

凝血因子Ⅻ刺激外周血单核细胞对卵巢癌细胞侵袭能力的影响被引量：2: 2009年; 目的探索凝血因子Ⅻ刺激正常人外周血单核细胞(monocytes,MOs)后对卵巢癌细胞侵袭能力的影响。方法正常女性外周血来源MOs在体外经Ⅻ因子刺激12h后,以卵巢癌患者腹水来源的肿瘤相关巨噬细胞(TAM)为阳性对照,通过印度墨汁吞噬实验检测经Ⅻ因子刺激后,MOs吞噬功能的变化;检测经Ⅻ因子刺激后MOs培养上清对卵巢癌细胞系ES-2,SKOV-3,HO-8910体外侵袭能力的影响;采用AP-1、STAT、Inflammation-1、Oncogene-3家族转录因子试剂盒筛选Ⅻ因子可能通过何种细胞信号转导途径激活MOs。结果(1)卵巢癌腹水来源的TAM和经Ⅻ因子刺激后MOs吞噬印度墨汁的比例分别为0.66±0.04和0.36±0.03,显著高于外周血来源的MOs(0.27±0.018)(P<0.01,P=0.033)。(2)卵巢上皮性癌细胞ES-2在MOs+Ⅻ因子组上清为趋化诱导物时侵袭细胞数目为110.9±5.046,略少于腹水组(157.5±14.86),但显著高于使用普通培养基作为趋化诱导物的阴性对照组(39.14±10.91),在MOs+Ⅻ因子组上清中添加Ⅻ抑制剂西妥昔单抗后,侵袭细胞数量减少为42.43±9.097。结论卵巢癌腹膜内上调的Ⅻ因子可能通过教育和诱导MOs向具有类似TAM特征的M2型巨噬细胞亚型分化,成为加速卵巢癌细胞在腹膜转移的诱导因素之一。; 王睿黎张婷马政文王颖狄文徐红马庆良程忠平汪希鹏; 关键词：单核细胞肿瘤相关巨噬细胞白介素-8

复发性流产中男性致病因素的研究: RSA的被定义为发生在妊娠28周前连续三次或三次以上的自然流产。目前，筛查RSA病因几乎都集中在流产女性患者，已经明确的RSA病因主要包括内分泌因素、生殖道解剖因素、感染因素、免疫因素、遗传因素等。近年来，流产患者的血栓...; 汪希鹏王睿黎; 关键词：复发性流产致病因素; 文献传递

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王睿黎

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