王志成
- 作品数:109 被引量:220H指数:8
- 供职机构:吉林大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划吉林省科技厅科技发展计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学艺术政治法律更多>>
- pEgr-1-AIF△1-480基因-放射治疗乳腺癌的体外抑瘤效应研究
- 本研究采用基因导入系统,构建了基因表达载体pEgr-1-AIF△1-480,将放疗和基因治疗联合,利用辐射杀伤肿瘤细胞和诱导Egr-1启动子转录及AIF△1-480促进肿瘤细胞凋亡的作用,达到抑制肿瘤生长和杀伤肿瘤细胞的...
- 龚守良王剑锋王志成
- 乏氧/辐射双敏感启动子介导分泌型人TRAIL基因对肺腺癌A549细胞周期及增殖的影响被引量:1
- 2009年
- 目的构建乏氧(HRE)/辐射(Egr1)双敏感启动子介导的分泌型人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)(shTRAIL)基因表达载体pcDNA3.1-HRE-Egr1-shTRAIL,观察其对肺腺癌A549细胞周期及增殖的影响。方法利用化学合成HRE上、下链,PCR扩增得到双链HRE;利用基因重组技术构建含有HRE/Egr1双敏感启动子介导shTRAIL的表达载体pcDNA3.1-HRE-Egr1-shTRAIL,经酶切、PCR和测序鉴定正确后,干扰质粒经脂质体介导转染肺腺癌A549细胞,MTT法检测A549细胞增殖的变化,流式细胞术检测A549细胞周期的变化。结果BamHI和SmaI酶切,所得片段大小分别为1284bp和4998bp、2292bp和3990bp;以载体为模板,Egr1和shTRAIL引物进行PCR扩增,可得到469bp和820bp产物;将pcDNA3.1-HRE-Egr1-shTRAIL进行测序,所得结果与设计一致,说明构建正确。转染肺腺癌A549细胞后,乏氧与辐射能够降低细胞增殖能力,增加G0/G1和S期细胞百分比,降低G2/M期细胞百分比(P<0.05,P<0.01),二者联合作用更明显。结论乏氧/辐射双敏感启动子介导分泌型人TRAIL基因在乏氧和/或辐射条件下能够延长细胞G0/G1和S期,缩短G2/M期,并且抑制肺腺癌A549细胞增殖能力,二者协同作用更明显。
- 杨艳明王志成王铁君王溪曲雅勤
- 关键词:增殖
- 多次低剂量辐射对糖尿病大鼠脾脏淋巴细胞亚群的免疫调节作用被引量:3
- 2008年
- 目的:观察多次低剂量辐射(LDR)照射后糖尿病(DM)大鼠脾脏淋巴细胞亚群的变化。方法:实验分为正常对照组、DM组和不同剂量LDR组(剂量分别为0.025、0.050和0.075Gy)。链脲佐菌素(STZ)腹腔注射诱导DM大鼠模型,经15次照射后4周末采用流式细胞术检测脾细胞中CD4+、CD8+T细胞百分数及CD4+/CD8+T细胞比例。结果:造模1周后,DM组大鼠出现明显的多饮、多食、多尿及体重减轻现象。照射后4周末,与正常对照组比较,DM组大鼠脾脏CD4+T细胞百分数明显增加(P<0.01),CD8+T细胞百分数明显降低(P<0.01),CD4+/CD8+T细胞比值明显增加(P<0.001);不同剂量LDR组淋巴细胞亚群变化均不明显。与DM组比较,0.050和0.075GyLDR组CD4+T细胞百分数显著降低(P<0.05,P<0.01),不同剂量LDR各组CD8+T细胞百分数均显著增加(P<0.01),不同剂量LDR各组CD4+/CD8+T细胞比值均显著降低(P<0.01)。结论:多次LDR能够调节DM大鼠的免疫功能,纠正其免疫失衡状态,从而达到保护机体的作用。
- 关锋李艳博赵红光郭伟郭彩霞王志成龚守良
- 关键词:低剂量辐射脾细胞CD4^+T细胞CD8^+T细胞
- 线粒体靶向KillerRed诱导的ROS增强辐射对HeLa细胞的增殖抑制作用被引量:1
- 2018年
- 目的:构建线粒体靶向KillerRed(KR)重组表达载体,探讨可见光照射诱导活性氧(ROS)生成规律及其增强电离辐射对HeLa细胞的增殖抑制作用。方法:利用基因重组技术构建线粒体靶向重组载体plxspflag-Sarm1-KR和plxsp-flag-Sarm1-mCherry。将宫颈癌HeLa细胞分为对照组、plxsp-flag组、plxsp-flag-Sarm1-KR组、4Gy组、plxsp-flag+4Gy组和plxsp-flag-Sarm1-KR+4Gy组。细胞转染24h后,利用荧光显微镜检测mCherry蛋白和细胞色素C氧化酶Ⅳ(COXⅣ)蛋白表达水平;可见光照射后利用DCFH-DA探针检测平均荧光强度(MFI),表示ROS生成水平;4Gy X射线照射后,利用CCK-8试剂盒检测细胞增殖活性。结果:构建载体经测序鉴定并与GenBank序列比对,表明线粒体靶向融合表达载体plxsp-flag-Sarm1-KR(mCherry)构建成功。转染HeLa细胞后,荧光显微镜下可见mCherry蛋白与线粒体示踪COXⅣ蛋白具有相同的定位。ROS生成水平,对照组和plxsp-flag组在可见光照射10、30和60min后掺入探针,掺入探针10、30和60min后MFI无明显变化(P>0.05);plxsp-flag-Sarm1-KR组MFI呈时间依赖性增加,与对照组比较,plxsp-flag-Sarm1-KR组可见光照射10和30min后掺入探针,掺入探针60min后MFI明显增加(P<0.05);可见光照射60min后掺入探针,掺入探针30和60min后plxsp-flag-Sarm1-KR组MFI明显降低(P<0.05)。与对照组比较,plxsp-flag组细胞增殖活性无明显变化(P>0.05),10和24h时plxsp-flag-Sarm1-KR组细胞增殖活性明显降低(P<0.05),10h时4Gy组和plxsp-flag+4Gy组细胞增殖活性明显降低(P<0.01),10、24和48h时plxsp-flagSarm1-KR+4Gy组细胞增殖活性明显降低(P<0.05或P<0.01);与plxsp-flag-Sarm1-KR组和4Gy组比较,plxsp-flag-Sarm1-KR+4Gy组细胞增殖活性明显降低(P<0.05)。结论:成功构建线粒体靶向融合表达载体,所介导的KR蛋白可以诱导ROS产生,并且增强电离辐射对HeLa细胞的增殖抑制作用。
- 李鑫马云飞唐庚韦麒纪红池田嘉安申延男王志成
- 关键词:线粒体活性氧电离辐射细胞增殖
- 均二苯乙烯抗紫外线所致皮肤损伤作用研究
- 目的:评价均二苯乙烯(trans-3,5,4'-trihydroxystibene)在紫外线辐射(ultraviolet radiation,UVR)所致皮肤损伤中的作用.方法:正常皮肤在均二苯乙烯和本药物载体基质的干预...
- 李文兴栗学军龚守良孙世龙王志成
- 关键词:皮肤损伤紫外线辐射
- 文献传递
- 靶向存活素的RNAi联合X射线照射对肺腺癌移植肿瘤的抑制作用被引量:2
- 2009年
- 目的利用RNAi、RT-PCR和Western blot技术,探讨靶向存活素的基因沉默联合X射线照射对肺腺癌移植瘤的抑制作用及相关机制。方法根据Genbank中存活素(Survivin)的cDNA序列设计RNAi序列,构建shRNA真核表达载体pGenesil-2-Survivin,经过酶切,测序鉴定后,将经脂质体包裹的pGenesil-2-Survivin注射到裸鼠移植肺腺癌瘤体内,并联合5 Gy X射线照射,利用RT-PCR和Western blot技术检测移植肿瘤内Survivin mRNA和蛋白表达情况,观察肿瘤生长变化。实验分为正常组、pGenesil-2-Survivin组、5 Gy照射组和pGenesil2-Survivin+5 Gy组。结果RT-PCR和Western blot结果显示,5 Gy X射线没有明显改变Survivin mRNA和蛋白的表达,而pGenesil-2-Survivin和pGenesil-2-Sur-vivin+5 Gy照射则明显抑制了Survivin的表达,与正常组比较具有统计学意义(P<0.001);5 Gy照射后,肿瘤的生长被抑制,而pGenesil-2-Survivin质粒的抑制作用更强,5 Gy照射能增强pGenesil-2-Survivin质粒的抑制作用。结论靶向存活素的RNAi能够明显抑制裸鼠移植肿瘤的生长,联合5 Gy X射线照射能够增强抑制作用,这可能与Survivin基因mR-NA与蛋白被抑制相关。
- 李长锋张斌张金萍王志成杨海山
- 关键词:RNA干扰生存素X射线照射
- 一种线粒体靶向光敏剂Sarm1-mtKR及其制备方法和应用
- 本发明提供了一种线粒体靶向光敏剂Sarm1‑mtKR及其制备方法和应用,其特征在于:所述线粒体靶向光敏剂Sarm1‑mtKR的融合蛋白序列大小为810bp,序列如SEQ ID NO 1所示;所述制备方法为将Sarm1线粒...
- 王志成于雷方芳李鑫
- 文献传递
- 低剂量电离辐射诱导生精细胞凋亡的线粒体调控机制
- 1低剂量电离辐射对小鼠睾丸生精细胞凋亡的影响实验结果表明,0.075 Gy X射线全身照射Kunming小鼠,诱导生精细胞凋亡具有明显的时效关系。照后6 h,精原细胞凋亡率明显增加,12~18 h达峰值,随后逐渐回降;照...
- 龚守良王志成刘光伟
- 文献传递
- 肿瘤坏死因子-α诱导蛋白8样蛋白家族对炎症和肿瘤的调控作用及其机制研究进展被引量:10
- 2020年
- 肿瘤坏死因子-α诱导蛋白8样蛋白(TNFAIPL/TIPE)家族是免疫和肿瘤发生的调节因子,由4种高度同源的哺乳动物蛋白组成:肿瘤坏死因子-α诱导蛋白8(TNFAIP8)、TNFAIP8样蛋白1(TIPE1)、TNFAIP8样蛋白2(TIPE2)和TNFAIP8样蛋白3(TIPE3)。TIPE家族在人类细胞和组织中的表达分析表明,其在炎症和肿瘤中表达失调,其表达紊乱调节炎症反应强度以及多种肿瘤的发生发展。鉴于TIPE家族在人类多种疾病的诊断、治疗和预后方面具有不可估量的价值,本文总结了4个成员的相关最新文献,总结在不同肿瘤细胞系中敲除TIPE基因后出现的表型表现,以及到目前为止已经阐明的细胞信号转导机制。
- 顾正忠孙鹏达王志成王旭东
- 关键词:炎症肿瘤
- 均二苯乙烯抗紫外线所致皮肤损伤作用研究
- 目的:评价均二苯乙烯(trans-3,5,4’-trihydroxystilbene)在紫外线辐射(ultraviolet radiation,UVR)所致皮肤损伤中的作用。方法:正常皮肤在均二苯乙烯和本药物载体基质的干...
- 李文兴栗学军龚守良孙世龙王志成
- 关键词:紫外线皮肤
- 文献传递