王宗华 作品数:196 被引量:827 H指数:18 供职机构: 福建农林大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 福建省自然科学基金 国家科技支撑计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 环境科学与工程 医药卫生 更多>>
酒瓶椰子叶枯病病原菌鉴定 2024年 【目的】近年来,福建省厦门市园林植物园内的酒瓶椰子频发叶枯病,影响了植株的正常生长,降低了酒瓶椰子的观赏价值。为了更好地防控酒瓶椰子叶枯病,对引起该病害的病原菌进行了种类鉴定。【方法】从厦门市园林植物园收集了12份染病的酒瓶椰子叶片样品,通过分离和纯化,得到5个类拟盘多毛孢属真菌菌株。结合其形态特征和基于3个基因(ITS、TUB2和TEF1)的系统发育分析结果将这5个菌株鉴定到种。最后用柯赫氏法则验证所得菌株的致病性。【结果】这5个菌株被鉴定为Neopestalotiopsis cubana、Pestalotiopsis diploclisiae、P.humicola、P.neolitseae和Pseudopestalotiopsis theae。柯赫氏法则验证结果显示,N.cubana、P.diploclisiae、P.humicola和Ps.theae可以引起酒瓶椰子叶片发病,而P.neolitseae不能侵染酒瓶椰子的叶片。【结论】N.cubana、P.diploclisiae、P.humicola和Ps.theae是引起酒瓶椰子叶枯病的病原菌。这是新拟盘多毛孢属(Neopestalotiopsis)和假拟盘多毛孢属(Pseudopestalotiopsis)真菌在酒瓶椰子上的首次报道。其中,N.cubana为我国首次发现。 范绍斌 苏济钰 樊改丽 阮志平 张华峰 胡艳萍 贾悦 梁欣妤 王宗华 胡红莉关键词:叶枯病 形态学 纹枯病菌侵染后水稻的组织病理学变化及基因表达分析 <正>水稻纹枯病广泛分布于世界各主要稻区,是水稻三大病害之一。目前已位居我国水稻三大病害之首,在我国南方造成严重损失。水稻纹枯病的病原菌为立枯丝核菌(Rhizoctonia solani Kuhn),其有性态为瓜王革菌(... 赵长江 鲁国东 杜晓昱 林燕 刘丽 王宗华文献传递 黄瓜绿斑驳花叶病毒的鉴定及分子检测 被引量:22 2007年 【研究目的】黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)的快速鉴定检测是控制该潜在危险性有害生物蔓延的有效途径。【方法】通过汁液摩擦接种、透射电镜观察、双抗夹心酶联免疫吸附测定法(DAS-ELISA)和RT-PCR方法对该病毒进行鉴定;同时对RT-PCR反应体系及扩增程序进行优化,建立CGMMV免疫捕获RT-PCR(IC-RT-PCR)检测方法。【结果】血清学、生物学、电镜观察和分子生物学方法证明供试样本为黄瓜绿斑驳花叶病毒引致。IC-RT-PCR方法可以简化RNA的提取,降低对试验材料要求。【结论】IC-RT-PCR的建立为CGMMV的检测提供了操作更为简便、特异性更强的快速、准确的检测方法。 黄静 廖富荣 林石明 陈青 王宗华关键词:黄瓜绿斑驳花叶病毒 稻瘟病菌假定的糖基水解酶62家族初步研究 被引量:4 2009年 【目的】了解糖基水解酶62家族细胞壁降解酶系在稻瘟病菌致病中的作用。【方法】通过生物信息学方法对稻瘟病菌基因组中假定的糖基水解酶62家族成员进行基因结构、蛋白分泌特性及系统发育分析,并对其中一个成员MGG_01403.6进行过量表达、基因敲除分析。【结果】该家族共有8个成员,均具有细胞壁降解酶(糖基水解酶62家族)保守结构域,且均为胞外分泌蛋白;系统发育分析可以将这些成员分别聚类在两个进化分支中;成员间在不同侵染阶段表达模式有差异;MGG_01403.6过量表达和基因敲除均不影响稻瘟病菌的致病性。【结论】糖基水解酶62家族可能存在功能冗余作用,进一步的双突变或多突变可能是明确这类多基因家族基因功能的重要方法。 周洁 郑祥梓 兰斓 林成增 林雄杰 鲁国东 王宗华关键词:稻瘟病菌 细胞壁降解酶 国际水稻研究所部分育成品种及种质资源抗瘟性初步鉴定 2002年 用福建主要菌株评价 43份从国际水稻研究所引进的部分育成品种及种质资源抗瘟性。结果苗期人工鉴定为高抗的有 1 2个、中抗的有 2 0个材料。高抗的材料为 5 1 73、 IR65、 IR70、 IR5 8、 PSBRC2 0、PSBRC5 4、 PSBRC2、 IR74、 IR5 2、 IR60、 PSBRC2 8、 IR2 9;其中 IR5 2、 PSBRC2 0、 PSBRC2 8、 PSBRC5 4等还在病圃中鉴定为抗叶瘟和穗颈瘟。 阮志平 张居念 林雄杰 张学博 鲁国东 王宗华关键词:种质资源 稻瘟病 抗瘟性 抗性鉴定 抗病育种 稻瘟病菌两个假定GPCR基因的功能分析 <正>稻瘟病菌(Magnaporthe grisea)是研究丝状真菌的重要模式生物,也是引起水稻重要病害稻瘟病的病原菌。该菌侵染循环过程经历了分生孢子萌发、附着胞分化、侵入栓的形成以及侵染生长,这一过程涉及复杂的细胞分化... 刘淑集 韩雁琳 陈庆河 鲁国东 王宗华 许金荣文献传递 抗黄曲霉毒素B1单链抗体(scFv)库的建立和筛选 被引量:6 2009年 从抗黄曲霉毒素B1单克隆抗体细胞系中扩增到重链可变区(VH)和轻链可变区(VL),经PCR将VH、Linker和VL连接成单链抗体(scFv),并克隆到载体pCANTAB-5E,经电转化大肠杆菌TG1,构建了库容量为1×108的单链抗体库。通过辅助噬菌体M13KO7感染后,使单链抗体展示在噬菌体衣壳蛋白pIII的N端,得到客容量为1×108的噬菌体展示的抗体库。将抗体库用于"淘洗-富集-扩增"4轮以后,得到针对AFB1特异性的噬菌体抗体。进一步以噬菌体感染大肠杆菌HB2151,在细菌细胞周质中可溶性大量表达,最终经竞争ELISA分析表明获得了3株可以稳定分泌抗黄曲霉毒素B1 scFv菌株,分别命名为3C3、3B3和4A2。 庄振宏 李兰 孙宪连 张新艳 单超 汪世华 王宗华关键词:黄曲霉毒素B1 单链抗体 抗体库 中药鱼腥草GAP研究及标准化生产示范基地建设 戴丽杰 林光美 王宗华 许鸿川 陈详旭 陈贵东 田柳生 程世德 吴荛美 樊世凯 陈蒙蒙 余宇燕 全祖和 江涛 本项目从鱼腥草的产地生态环境(包括空气、水质、土壤等)、种质和繁殖材料(优良品种的选育)、栽培管理、植物保护、采收与初加工、包装、运输与贮藏、质量管理和基地建设等方面进行研究,制定符合GAP要求的鱼腥草药材生产技术规范,...关键词:关键词:鱼腥草 GAP 稻瘟病菌菌株FJ81278中新发现的一个基因注释及其表达分析 被引量:1 2011年 对稻瘟病菌菌株FJ81278进行基因组和转录组分析,发现一个新的特异基因MoHsbA编码的蛋白具有疏水表面结合蛋白A(HsbA)结构域和一个信号肽.进一步的生物信息学分析发现,该基因组中另外7个基因编码的蛋白也具疏水表面结合蛋白结构域.稻瘟病菌中的HsbA蛋白聚集于系统发育树的同一个大的分支上,说明它们具有较近的亲缘关系.转录组和EST数据库中HsbA的表达情况不同,但在菌株GUY11侵染阶段基因芯片中均表现为上调.实时定量PCR分析表明,MoHs-bA在菌株FJ81278不同生长发育阶段均有表达,但在附着胞阶段表达量相对较高,推测该基因与附着胞的形成相关.研究结果为进一步揭示稻瘟病菌HsbA的生物学功能奠定了基础. 翟焕趁 连壁 王杏杏 王宝华 鲁国东 王宗华关键词:稻瘟病菌 转录组 稻瘟病菌—假定几丁质酶多克隆抗体的制备及其检测 被引量:2 2014年 为检测几丁质酶的表达,制备稻瘟病菌的一假定几丁质酶多克隆抗体,探索其可能运用。将稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)几丁质酶基因克隆入融合表达载体pET-32a,并在大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)中进行诱导表达。表达菌株经0.5 mmol/L IPTG诱导4~6 h后,用Ni^(2+)-NTA亲和柱纯化蛋白,得到可溶的几丁质酶-His融合蛋白。以该融合蛋白免疫新西兰雄兔,制备多克隆抗体。ELISA分析表明该抗体效价达1:204.800,特异性良好。用该抗体ELISA检测了稻瘟病菌4个不同田间菌株中,不同的菌株表达量不同。对稻瘟病菌侵染水稻3、5和7d后的病叶进行抗原Western验证,结果表明,稻瘟病菌不同的侵染时间其几丁质酶表达量有明显差异。几丁质酶表达的差异是否与菌株间致病型等生物学和生理学差异有关,目前正在进一步研究。 吴丽民 连永乐 王宗华 汪世华 鲁国东关键词:稻瘟病菌 几丁质酶 多克隆抗体 ELISA