焦同路
- 作品数:3 被引量:6H指数:2
- 供职机构:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
- 发文基金:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所所长基金哈尔滨市科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 表达H5亚型禽流感病毒HA蛋白的重组禽痘病毒的构建及其免疫效力初评
- 近年来由H5N1亚型禽流感病毒(AIV)引起的高致病性禽流感(HPAI)仍然是养禽业和人类健康的重大威胁,中国在防治HPAI的过程中主要采取扑杀和疫苗免疫相结合的策略。当前,在禽流感(AI)疫病防疫中应用的疫苗主要是重组...
- 焦同路
- 关键词:H5N1重组禽痘病毒禽流感病毒HI抗体免疫效力
- 文献传递
- 禽流感病毒NS1蛋白在杆状病毒表达系统中的表达被引量:3
- 2012年
- 为获得纯化的禽流感病毒(AIV)的NS1蛋白,将A/chicken/Guangxi/10/99(H9N2)(CK/GX/10/99)NS1全长核苷酸克隆至杆状病毒转移载体pFastBacHTA中,构建了重组转移载体pFastBacHTA-NS1,然后转化入DH10Bac感受态细胞中制备重组杆粒,在脂质体介导下转染sf9昆虫细胞,获得表达NS1基因的重组杆状病毒。用重组杆状病毒转染昆虫细胞sf9进行NS1蛋白的表达,通过SDS-PAGE电泳、Western blot、间接免疫荧光(IFA)对表达的目标蛋白进行分析。结果表明,构建了含NS1基因的重组杆状病毒,分子质量约30ku的重组蛋白得到了表达,为NS1的相关功能研究奠定了基础。
- 李东卫郭莹莹刘在斯王世达沈楠文辉强焦同路王靖飞
- 关键词:蛋白纯化
- 表达H5亚型禽流感病毒HA蛋白的重组禽痘病毒的构建被引量:3
- 2012年
- 为构建表达H5亚型禽流感病毒(AIV)A/Duck/Anhui/1/06(H5N1)(简称AH/06)HA蛋白的重组禽痘病毒,本研究利用感染-转染的方法通过转移载体pSY681-gfp-gpt将AIV株AH/06的HA基因同源重组到禽痘病毒(FPV)中,并利用gfp和gpt双重筛选标记在鸡胚成纤维细胞中经过多轮筛选,得到纯化的重组禽痘病毒(rFPV-gfp-gpt-AHHA)。通过PCR、序列测定和western blot的方法对rFPV-gfp-gpt-AHHA进行鉴定和抗原活性分析。结果表明AH/06的HA基因稳定的重组到rFPV-gfp-gpt-AHHA中,其表达的HA蛋白能够与AH/06的阳性血清反应,显示出了良好的抗原性。同时病毒的生长曲线也显示外源HA基因的插入并没有影响亲本病毒的复制。这些结果为进一步的免疫效力研究奠定了基础。
- 焦同路王靖飞赵双成王世达常晓飞田石柳金雄李雁冰姜永萍陈化兰
- 关键词:H5亚型禽流感病毒重组禽痘病毒HA基因