林戈
- 作品数：148 被引量：534H指数：10
- 供职机构：国家工程研究中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划湖南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 杜氏肌营养不良症(DMD)的植入前遗传学诊断被引量：4
- 2009年
- 目的对杜氏肌营养不良症(duchenne muscular dystrophy,DMD)进行植入前遗传学诊断(preim-plantation genetic diagnosis,PGD),阻断DMD患儿的出生。方法针对患者的DMD基因的48号外显子缺失位点采用巢式PCR分别对患者和携带者的单个淋巴细胞、行体外授精-胚胎移植治疗的健康志愿捐献者的单个卵裂球细胞进行扩增,建立稳定的经单细胞基因诊断DMD的方法。再对在该中心进行超排和体外授精-胚胎移植治疗的DMD携带者的胚胎活检后完成PGD,根据诊断结果选择健康的优质的胚胎移植入子宫。结果携带者的单个淋巴细胞的PCR扩增成功率为90.5%(95/105),健康志愿捐献者的单个卵裂球细胞PCR扩增成功率为85.7%(54/63),假阳性率为0(0/28)。分别对3例DMD携带者施行了植入前遗传学诊断,病例1移植了2枚未受累的优质胚胎,且成功妊娠单胎并已于2005年4月分娩了1个健康的女婴;病例2移植了2枚优良胚胎,不幸的是未能妊娠。病例3诊断为未受累的仅有的2枚胚胎因胚胎质量差而未能移植。结论该组采用的方案可对DMD基因的48号外显子缺失突变的DMD家庭进行PGD,达到了阻断DMD患儿出生的目的。
- 钟昌高李麓芸陆长富林戈龚斐张瞻廖宏庆张红卢光琇
- 关键词：杜氏肌营养不良症植入前遗传学诊断
- 拟胚体法诱导人胚胎干细胞神经分化的研究
- 2010年
- 目的研究胚胎干细胞（human embryonic stem cells,HESC）向神经祖细胞分化时,拟胚体（embryoidbody,EB）大小和碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor,bFGF）对诱导效率的作用。方法采用人胚胎干细胞形成的EB,按照其直径大小分为3组,拟胚体阶段添加或不添加bFGF分组,检测各组的贴壁效率和神经诱导效率。结果直径350~251μm的EB组和EB阶段未添加bFGF组的贴壁率与神经诱导效率高于其他组EB。结论优化EB大小和培养基成分可促进EB的神经诱导分化。
- 袁丁林戈卢光琇
- 关键词：胚胎干细胞拟胚体神经祖细胞
- 一种液氮过滤装置
- 本实用新型公开了一种液氮过滤装置。所述液氮过滤装置包括均由耐低温材料制成的液氮导流装置和过滤器；所述液氮导流装置的进口端用于与液氮运输罐出口端对接，所述液氮导流装置的出口端与所述过滤器的进口端连通。由此，含杂质的液氮由液...
- 顾亦凡欧阳琦林戈卢光琇
- 文献传递
- 年龄及移植优质胚胎数对体外受精-胚胎移植患者多胎妊娠率的影响被引量：13
- 2008年
- 目的研究年龄及移植优质胚胎数对体外受精一胚胎移植（IVF-ET）患者多胎妊娠发生率的影响。方法回顾性分析2004年1月至2006年11月，在中南大学中信湘雅生殖与遗传专科医院行新鲜胚胎移植的不孕症患者共4395个周期，按患者年龄分为年龄〈35岁组（3442个周期）和年龄／〉35岁组（共953个周期）。每个周期常规移植2—3枚胚胎，仅有1枚可移植胚胎者移植1枚胚胎，年龄／〉35岁或第2次移植且只有2枚胚胎者移植2枚胚胎。统计各组所有周期的临床妊娠及多胎妊娠率。结果（1）年龄〈35岁组移植1枚胚胎者的临床妊娠率[29．64％（166／560）]低于移植2、3枚者[分别为51．63％（1315／2547）、52．84％（177／335）]，差异均有统计学意义（P〈0．01）；移植2枚与3枚者比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。3者的多胎妊娠率分别为21．08％（35／166）、31．41％（413／1315）和42．37％（75／177），两两比较，差异均有统计学意义（P〈0．01）。（2）年龄≥35岁组移植1枚胚胎者的临床妊娠率[19．07％（41／215）]低于移植2、3枚者[分别为33．70％（92／273）、39．14％（182／465）]，差异均有统计学意义（P〈0．01）；移植2枚与3枚者比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。移植1枚和2枚胚胎者的多胎妊娠率[分别为19．51％（8／41）和20．65％（19／92）]比较，差异无统计学意义（P〉0．05）；2者均低于移植3枚胚胎者[40．66％（74／182）]，差异有统计学意义（P〈0．01）。（3）年龄〈35岁组的临床妊娠率[48．17％（1658／3442）]高于年龄／〉35岁组[33．05％（315／953）]，差异有统计学意义（P〈0．01）；年龄〈35岁组移植1、2和3枚胚胎者的临床妊娠率分别与年龄／〉35岁组移植相应胚胎数者比较，差异均有统计学意义（P〈0．01）。两组的多胎妊娠率[分别为31．54％（523／1658）和32
- 张顺吉龚斐林戈陆长富肖红梅卢光琇
- 关键词：胚胎移植妊娠率年龄因素优生学
- 预防多囊卵巢综合征患者发生卵巢过度刺激综合征的体外受精-胚胎移植治疗新策略被引量：5
- 2012年
- 多囊卵巢综合征（PCOS）是育龄妇女常见的一类内分泌紊乱疾病，与月经异常、流产以及一系列妊娠相关的并发症有关，同时也是Ⅱ型糖尿病和心血管疾病的高风险人群。在育龄妇女中占5％～10％Ⅲ，在接受辅助生殖助孕治疗的病人中约占50％，但这部分患者接受体外受精（IVF）助孕治疗时，
- 龚斐蔡素芬林戈张顺吉黎娟卢光琇
- 关键词：多囊卵巢综合征拮抗剂方案长方案
- 人孤雌胚胎干细胞与正常胚胎干细胞分化能力的比较被引量：4
- 2010年
- 目的比较人类孤雌胚胎干细胞(pESCs)系与正常胚胎干细胞(nESCs)系的分化能力,探讨pESCs是否和nESCs一样具有多向分化潜能。方法将pESCs和nESCs分别注射到重症联合免疫缺陷(SCID)小鼠体内形成畸胎瘤,瘤体组织切片和HE染色后进行组织学分析;将pESCs和nESCs体外悬浮培养形成拟胚体(EB),利用RT-PCR检测3个胚层主要器官以及滋养层细胞发育关键基因的表达;将pESCs和nESCs定向诱导分化为滋养层细胞,通过流式细胞仪测定人绒毛膜促性腺激素-β(hCG-β)阳性细胞比例以及通过酶联免疫吸附测定(ELISA)进行hCG-β的定量分析。结果在体内生长和体外培养过程中,pESCs和nESCs均能够向3个胚层的细胞类型分化。在SCID小鼠体内可形成畸胎瘤,有神经上皮、软骨、腺上皮等3个胚层的衍生物产生;pESCs和nESCs来源的EB在体外自发分化5～21d后,均检测到3个胚层主要器官以及滋养层细胞发育关键基因的表达;pESCs定向分化为滋养细胞后,可以检测到hCG-β的表达,但其阳性细胞比例和分泌量均低于nESCs。结论 pESCs具有向3个胚层以及滋养层细胞分化的能力,但是向滋养层细胞分化的能力仍低于nESCs。
- 欧阳琦林戈周晓樱卢光琇
- 关键词：胚胎干细胞孤雌胚胎干细胞分化细胞培养
- 单细胞二重巢式PCR扩增影响因素初探被引量：1
- 2005年
- 目的 :对影响单细胞二重巢式PCR扩增的因素进行初步探讨。方法 :针对 β 珠蛋白基因CD4 1 4 2、IVS Ⅱ 6 5 4突变位点区域采用二重巢式PCR ,分别以不同的引物浓度组合、不同的TaqDNA聚合酶、不同的中和缓冲液、PCR反应前采用或不采用 98℃预变性扩增单个淋巴细胞和 /或单卵裂球 ,了解这些因素对PCR扩增效率的影响。结果 :不同的引物浓度组中 ,终浓度为 0 .2 5 μmol/LR1+F1引物对与 0 .3μmol/LR2 +F2引物对配对扩增效率最高 ;不同的TaqDNA聚合酶中TaKaRaEXTaq的扩增效率最高 ;中和缓冲液 1(2 0 0mmol/LTricine)的扩增效率显著高于中和缓冲液 2 (90 0mmol/LTris·HCl,pH 8.3/30 0mmol/LKCl/2 0 0mmol/LHCl)的扩增效率 (P <0 .0 5 ) ;单细胞PCR反应前采用 98℃预变性与不采用 98℃预变性的扩增效率间差异无统计学意义。结论 :不同引物浓度组合、不同的TaqDNA聚合酶、不同的中和缓冲液对单细胞的二重巢式PCR的扩增效率存在明显差异 ,而PCR反应前采用 98℃预变性不能提高PCR扩增效率。
- 钟昌高李麓芸陆长富林戈卢光琇
- 关键词：聚合酶链反应植入前诊断Β地中海贫血Β-珠蛋白基因
- 人胚胎干细胞和分化细胞差别基因的筛选被引量：9
- 2004年
- 人类胚胎干细胞 (humanembryonicstemcell,hESC)在增殖过程中如何保持未分化状态是干细胞生物学的核心问题之一 ,已有的LIF通路、Oct 4因子及Nanog基因的作用还不能对这一问题做出全面的解释。为进一步了解维持hESC未分化状态的机制 ,采用自行建立培养的hESC及分化的hESC细胞克隆 (differentiatedhESC ,dhESC) ,应用抑制消减杂交 (SuppressionSubtractiveHybridization ,SSH)结合反向cDNA斑点杂交技术 ,筛选出在hESC高表达、在dhESC中低表达或不表达的表达序列标签 (ExpressedSequenceTag,EST)共 10 5个。通过与GenBank比较 ,显示其中76个EST代表 6 1个已知基因 ,18个EST代表 15个假想基因 ,另有 11个属于未知EST。选取其中 8个克隆进行半定量RT PCR分析 ,证实其中 7个克隆在hESC中高表达 ,在dhESC中低表达或不表达。结果表明 ,hESC分化前后涉及多个基因的差异表达 ,对这些在hESC中高表达、在dhESC中低表达或不表达基因的进一步功能研究为阐明维持hESC未分化状态的机制提供了基础。
- 杜娟林戈卢光琇
- 关键词：胚胎干细胞分化细胞表达序列标签
- 新发片段非整倍体在植入前囊胚中的发生率,真实性以及其在囊胚内部的存在形式
- 周爽程德华欧阳琪谢平原陆长富龚斐胡亮卢光琇林戈
- 不同人胚胎干细胞系向限定性内胚层分化能力存在差异
- 2013年
- 研究不同的人胚胎干细胞系向限定性内胚层细胞分化能力是否存在差异,并尝试寻找造成差异的原因。基于已建立的人胚胎干细胞库资源和限定性内胚层定向诱导分化体系,流式检测诱导分化3天后10株细胞系Sox17的阳性比率发现其值在60%到80%之间波动,而SSEA4的阳性比率在人胚胎干细胞系中不存在明显差异。基因表达谱结果显示像Sox17,Foxa2等内胚层标记在这些细胞之间不存在显著的差异,而像MEG3和SNORD114-3在差异细胞系之间和同株细胞早晚期代数之间存在表达差异。结果提示不同的人胚胎干细胞系向限定性内胚层细胞分化能力存在着差异,推测这些差异可能与MEG3和SNORD114-3的差异表达相关。
- 李进贺菁菁林戈卢光琇
- 关键词：人胚胎干细胞分化
