杨鹏
- 作品数：30 被引量：96H指数：5
- 供职机构：华中科技大学同济医学院附属协和医院更多>>
- 发文基金：湖北省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 不同营养方式对梗阻性黄疸大鼠肠紧密连接蛋白的影响被引量：6
- 2010年
- 目的 观察肠内营养（EN）及肠外营养（PN）对阻塞性黄疸（OJ）大鼠小肠紧密连接蛋白的影响.方法 将50只Wistar大鼠随机分5组,EN组和PN组给予等热量等氮量营养.7 d后采用免疫组织化学和Western blot法检测各组末端回肠黏膜的闭锁小带-1（ZO-1）、闭锁蛋白（Occludin）与肌球蛋白轻链激酶（MLCK）的表达,并对Western blot图像进行定量分析.结果 正常回肠黏膜ZO-1和Occludin沿绒毛下方均匀连续分布,MLCK主要分布在细胞质内.阻黄时ZO-1、Occludin和MLCK分布散乱,染色稀疏.PN组的ZO-1、Occludin和MLCK的强阳性染色数由阻黄组的2、2、1例升至4、5、3例（P均〉0.05）,而EN组的强阳性染色数分别上升为7、6、5例（P均〈0.05）.通过对Western blot显影图像进行定量分析,EN组和PN组的ZO-1的灰度值较阻塞性黄疸组明显上升（均P〈0.05）;Occludin和MLCK的灰度值在EN组上升（P〈0.05）,PN组没有变化.结论 梗阻性黄疸时大鼠小肠黏膜上皮ZO-1、Occludin和MLCK分布紊乱,表达下降.肠内、外营养均能够恢复受损的紧密连接蛋白,肠内营养的作用更强.
- 陈振勇冯贤松杨鹏周有生
- 关键词：阻塞性黄疸肠内营养肠外营养紧密连接蛋白
- RNA干扰AKT2影响人胰腺癌细胞株裸鼠移植瘤对吉西他滨的敏感性被引量：5
- 2010年
- 目的探讨RNA干扰AKT2对人胰腺癌细胞株裸鼠移植瘤对吉西他滨敏感性的影响。方法构建荷胰腺癌裸鼠模型,采用腹腔给药和瘤内注射方式,以吉西他滨配合AKT2 siRNA表达载体对荷瘤鼠进行联合干预治疗,对比观测裸鼠肿瘤生长情况,RT-PCR检测肿瘤细胞AKT2 mRNA的表达,免疫组织化学法检测肿瘤AKT2蛋白表达,DNA末端原位标记法(TUNEL法)检测细胞凋亡指数。结果化疗+AKT2-siRNA组移植瘤组织中AKT2 mRNA及AKT2蛋白表达明显低于空白对照组、化疗组、化疗+空白质粒组。化疗+AKT2-siRNA组瘤重、肿瘤体积显著低于其他各组。化疗+AKT2-siRNA组抑瘤率、凋亡指数显著高于其他各组。结论RNA干扰AKT2明显提高人胰腺癌细胞株对吉西他滨化疗的敏感性。
- 彭涛周峰杨鹏王春友
- 关键词：AKT2胰腺癌吉西他滨
- 高浓度胆汁合并感染在炎症小体平台触发前炎症反应被引量：2
- 2012年
- 目的观察高浓度胆汁成分触发前炎症反应的途径。方法分离培养大鼠外周血单核细胞，分别与5％胆汁、内毒素（LPS）、三磷酸腺苷（ATP）、高K＋培养液接触，采用乳酸脱氢酶（LDH）检测细胞毒性，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测白细胞介素（IL）-1β含量，Westernblot法检测半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-1（Caspase-1）、炎症小体NALP3表达并定量分析。结果单纯5％胆汁未能诱导IL-1β、Caspase-1、NALP3表达。LPS＋胆汁组及ATP＋胆汁组IL-1β浓度分别为[（769．8±29．4）、（788．6±32．4）ng／L]，均远高于单用LPS组[（88．1±6．7）ng／L]（P〈0．01）。培养6h后LPS预处理组IL-1B浓度均明显升高（871．1±69．7）ng／L。LDH值与IL-1β的变化间无相关。LPS＋胆汁组在1．0×10^4和1．2×10^5附近见Caspase．1和NALP3蛋白表达条带。通过图片的定量研究显示LPS＋胆汁组Caspase-1和NALP3明显升高（0．69±0．10、1．86±0．33）。高K＋培养基培养6h后，LPS＋胆汁组IL-1β浓度降至（638．2±26．2）ng／L。结论进入血循环的高浓度胆汁合并细菌感染通过炎症小体途径触发早期炎症反应，细胞外高K＋能抑制此过程。
- 陈振勇涂志刚冯贤松王延刚杨鹏蒋春舫
- 关键词：胆汁炎症反应白细胞介素-1Β
- GLP-2对实验性梗阻性黄疸小肠上皮细胞紧密连接的调控被引量：12
- 2008年
- 目的探讨类高血糖素多肽-2(GLP-2)对实验性梗阻性黄疸小肠上皮细胞紧密连接的调控。方法建立梗阻性黄疸大鼠模型,造模后10d随机分组,每组10只。黄疸组皮下注射0.01mmol/LPBS0.5mL,实验甲组腹腔注射250g/(kg.d),实验乙组腹腔注射125g/(kg.d)的GLP-2溶液0.5mL,每天2次,连续7d后处死。另设正常对照组,用免疫组化及Westernblots检测末端回肠黏膜紧密连接蛋白ZO-1,Occludin及Claudin-1,Claudin-4的分布和表达,并用图像分析系统对Westernblots图像进行定量分析。结果正常情况下ZO-1,Occludin和Claudin-1染色强阳性率分别为70.0%,80.0%和70.0%。梗阻性黄疸时ZO-1和Occludin分布不均,染色变淡,线条模糊。补充外源性GLP-2后,实验甲组的ZO-1,Occludin和Claudin-1染色有所恢复,且强阳性表达率分别从黄疸组的20.0%,30.0%和20.0%升至实验甲组的80.0%,90.0%和80.0%(均P<0.05);Claudin-4表达和分布变化不明显。实验乙组对紧密连接蛋白无影响。Westernblots图像定量分析得到相同的结果。结论梗阻性黄疸时,补充GLP-2可影响小肠黏膜上皮紧密连接蛋白的分布和表达;提示GLP-2能恢复和维持小肠黏膜上皮屏障的完整性。
- 陈振勇冯贤松杨鹏周有生
- 关键词：黄疸梗阻性紧密连接蛋白肠屏障功能
- 阻塞性黄疸术后胰岛素抵抗与肠黏膜屏障破坏间的相关性被引量：3
- 2013年
- 目的:探讨阻塞性黄疸(阻黄)术后胰岛素抵抗与肠黏膜屏障破坏间的相关性。方法:建立阻黄大鼠模型,术后给予胰高血糖素样肽2(GLP-2)和强化胰岛素治疗,分别于手术前1 d及手术后2、24、48 h和3、7 d采血,计算胰岛素抵抗指数,检测乳果糖/甘露醇(L/M)比值,ELISA法检测血清抵抗素样分子β(RELMβ)浓度,RT-PCR检测回肠组织内RELMβmRNA相对含量。结果:阻黄组术后3 d的胰岛素抵抗指数(10.1±1.8)和L/M比值(0.66±0.08)远高于其它时点(均P<0.05),两者呈明显正相关(r=0.86,P<0.05)。GLP-2组术后7 d的胰岛素抵抗指数降幅达37.0%,胰岛素组术后3 d的L/M降幅最大达46.7%(P<0.05)。阻黄组术后3 d血清RELMβ含量[(0.69±0.05)μg/L]和末端回肠上皮细胞内RELMβmRNA相对水平达到最高(1.40±0.06)。GLP-2组和胰岛素组的RELMβ浓度较阻黄组明显降低(P<0.05)。结论:阻黄术后胰岛素抵抗与肠黏膜屏障破坏间具有相关性,改善肠黏膜屏障和术后强化胰岛素治疗可以提升血清和组织内RELMβ含量。
- 陈振勇代红梅涂志刚杨鹏蒋春舫冯贤松
- 关键词：阻塞性黄疸胰岛素抵抗肠黏膜屏障
- 胰岛素抵抗与良性前列腺增生的相关性研究被引量：12
- 2010年
- 目的 探讨胰岛素抵抗与良性前列腺增生间（BPH）的关系. 方法 选取在我院行健康体检老年男性200例,根据前列腺体积（PV）分为对照组（PV≤20 ml）100例,BPHl组（PV 21～49ml）50例,BPH2组（PV≥50 ml）50例.采用己糖激酶法测定空腹血糖（FPG）,放免法测定空腹胰岛素（FSI）水平,运用HOMA模型计算胰岛素抵抗指数（IRI）;测量身高和体质量,并计算体质指数.结果 BPH1组IRI（1.10±0.18）和体质指数（22.0±3.0）与对照组（1.18±0.21和21.8±2.7）比较,差异无统计学意义（均P＞0.05）;BPH2组IRI（1.31±0.19）和体质指数（24.8±3.29）较对照组明显增高（P=0.01,0.03）.高血糖所占比例BPH组（25%）高于对照组（5%）（P=0.00）,其中BPH2组高血糖所占比例更高（36%）（P=0.01）;BPH2组高血糖组IRI（1.47±0.21）较对照组（1.34±0.18）明显增高（t=3.92,P=0.00）,但体质指数（25.8±4.3）kg/m2与对照组（24.3±2.7）kg/m2比较,差异无统计学意义（t=0.06,P=0.95）. 结论 高血糖和胰岛素抵抗与重度前列腺增生存在相关性,且胰岛素抵抗的存在不依赖于体质指数的改变.
- 陈振勇陈晓春黄文广杨鹏周有生肖虹
- 关键词：胰岛素抵抗前列腺增生体质指数
- 高浓度胆汁诱导单核细胞前炎症反应被引量：2
- 2011年
- 目的探讨高浓度胆汁在触发早期炎症反应中的作用。方法 20只Wistar大鼠随机分为体外培养组和阻塞性黄疸(阻黄)体内培养组,体外组为正常大鼠,阻黄体内组开腹结扎切断胆总管。明胶法提取外周血单核细胞(PBMCs)体外培养。体外组的PBMCs体外与不同浓度的胆汁共同培养,分别于1、6、24、48 h后用Western blot和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测培养上清液内前炎症因子IL-1β和前IL-1β表达的变化,并与加入细菌内毒素(LPS)的PBMCs相比较。阻黄体内组于术后1、6、24、48、168 h提取PBMCs同法检测两者的变化。结果阻黄动物术后1 h和6 h提取的PBMCs内可见IL-1β和前IL-1β表达,其中术后1 h和6 h前IL-1β的浓度分别为(834.0±111.1)pg/mL和(785.0±102.2)pg/mL,IL-1β的浓度是(681.0±82.5)pg/mL和(602.0±78.2)pg/mL,较其它时间段明显增高(P<0.05)。正常大鼠来源的PBMCs体外培养在高浓度胆汁(5%)刺激下早期(1 h)可以检测到IL-1β(612.0±70.5)pg/mL和前IL-1β(467.0±63.2)pg/mL表达增高(均P<0.05)。同时与LPS共同培养,5%胆汁刺激后1 h、6 h及2%、1%胆汁刺激1 h后可见IL-1β和前IL-1β表达增加。结论进入血循环的高浓度胆汁能触发早期炎症反应,合并细菌感染后作用更强。
- 陈振勇冯贤松杨鹏黄文广周有生
- 关键词：阻塞性黄疸胆汁单核细胞IL-1Β
- 补体C5抑制剂对大鼠出血坏死性胰腺炎时肾损害的保护作用
- 2007年
- 本实验通过检测急性出血坏死性胰腺炎大鼠血清补体CoSa蛋白水平和肾内C5mRNA表达情况，结合血清尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）浓度肾功能指标和肾脏病理形态学改变，评价补体C5抑制剂对胰腺炎肾损害的保护作用。
- 彭涛周峰杨鹏王春友
- 关键词：急性出血坏死性胰腺炎肾损害抑制剂病理形态学改变血清尿素氮
- 先天性巨结肠症内皮素受体B基因的多态性研究
- 2007年
- 目的观察中国汉族散发性先天性巨结肠症(sHD)G蛋白藕联受体家族的内皮素受体-B(EDNRB)易感基因的突变与多态性特征,探讨碱基改变与先天性巨结肠症的发病关系。方法收集104例散发性先天性巨结肠与其中42例患儿(子代组)的双亲血样,120例正常儿童作对照,聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)与DNA测序确定并比较EDNRB基因外显子1、2的突变与多态性位点(SNPs)等位基因与基因型分布差异,分析sHD表型与SNPs的关联,传递不平衡检验(TDT)分析三样本家系SNPs的传递不平衡。结果EDNRB基因外显子1、2均未发现突变,外显子1检测2个S NPs,c311 A→T(N104I)为新发现位点;病例组c311 A→T位点的等位基因和基因型频率均与对照组差异有统计学意义(P<0.01),c99C→T位点的差异无统计学意义;TDT检验发现亲子代间在c311 A→T(N104I)位点存在传递不平衡,杂合体双亲优先传递等位基因T给子代;临床表型与SNPs等位基因分布无明显关联。结论中国汉族散发性先天性巨结肠EDNRB基因的多态性可能在发病中起重要作用。
- 卢晓明牛彦锋王国斌舒晓刚汤绍涛陶凯雄杨鹏魏明发
- 关键词：先天性巨结肠基因多态性
- 高浓度胆汁改变肠上皮细胞氯通道蛋白-2和通透性被引量：3
- 2011年
- 目的观察胆汁对肠上皮细胞氯离子通道和通透性的影响。方法鼠肠上皮细胞株IEC-6分别与5．0％、1．0％、0．1％胆汁及氯通道激动剂接触。20h后检测跨膜电阻，Western blot分析氯离子通道蛋白-2（CLC-2）和紧密连接闭锁小带-1（ZO-1）表达的变化及各条带的相对灰度值。结果5．0％浓度组降低跨膜电阻作用最强。5．0％和1．0％组的CLC-2蛋白相对灰度值（0．30±0．05和0．37±0．08）低于对照组（P均〈0．05）。5．0％组的ZO-1相对表达量下降。添加氯通道激动剂后，5．0％浓度组的跨膜电阻（451．3±60．5）Ω·cm^2及ZO-1相对表达量（0．32±0．04）较对照组上升明显（P均〈0．05）。结论高浓度胆汁破坏肠上皮细胞氯离子通道和紧密连接蛋白，增加上皮细胞通透性。
- 陈振勇张劲杨鹏黄文广冯贤松
- 关键词：胆汁肠上皮细胞肠通透性
