李书军
- 作品数：32 被引量：93H指数：6
- 供职机构：河北医科大学第二医院更多>>
- 发文基金：河北省科技攻关计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- miR-181a对人食管癌TE11细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响被引量：10
- 2011年
- 目的:通过构建miR-181a的真核表达载体,研究其对人食管癌TE11细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法:以95C细胞基因组DNA为模板,扩增得到miR-181a前体序列,插入表达载体pcDNA3.1(+)克隆获得pcDNA3.1(+)-miR-181a。将真核表达载体pcDNA3.1(+)-miR-181a转染到TE11细胞中,并采用实时荧光定量-PCR(real-time fluorogentic quantitative-PCR,RFQ-PCR)对其表达情况进行验证。分别采用MTT法、细胞划痕法和Boyden小室法检测转染重组质粒pcDNA3.1(+)-miR-181a对TE11细胞增殖能力、迁移能力和侵袭能力的影响。结果:成功构建了插入miR-181a基因片段的真核表达载体pcDNA3.1(+)-miR-181a;RFQ-PCR检测结果表明,转染pcDNA3.1(+)-miR-181a的TE11细胞能够过表达成熟的miR-181a(P<0.05)。过表达miR-181a的TE11细胞增殖能力、迁移能力和细胞侵袭能力均明显增强。结论:miR-181a在TE11细胞中过表达能够增加细胞的增殖、迁移和侵袭能力,为进一步深入研究miR-181a在肿瘤中的作用机制提供了实验依据。
- 李书军牛秀兰崔爱荣和宇峥吴文新
- 关键词：食管肿瘤DNA
- 支架治疗食管肿瘤所致进食功能障碍
- 2002年
- 目的评价置入自膨覆膜支架治疗食管、贲门恶性狭窄所致进食功能障碍康复的疗效。方法对41例食管、贲门恶性狭窄患者行食管内支架治疗,透视下用胃管引导导丝通过狭窄部位,再沿导丝插入支架置入器,定位准确后推放。结果置入操作顺利35例(15min内),6例在20～40min内完成,无术中并发症。术后常见反应为胸骨后胀痛,一般可耐受。术后所有患者吞咽困难症状明显改善,一般状态好转。结论支架是治疗食管、贲门恶性狭窄所致进食功能障碍康复的一种安全有效的方法。有可能代替空肠造瘘术、胃转流术,成为主要的姑息性康复治疗方法。
- 刘瑞林李永军周连亚石彦涛王有富李书军
- 关键词：食管肿瘤
- siRNA沉默artemin蛋白对食管癌TE11细胞侵袭能力的影响被引量：3
- 2010年
- 目的:通过siRNA干扰技术沉默ARTN基因在人食管癌细胞TE11中的表达,研究其对人食管癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法:设计并合成3条特异性针对ARTN基因的siRNA,构建了真核表达载体pSilencer2.1-ARTN-siRNA,转染到TE11细胞中,经Real-time PCR和Western blot检测ARTN在mRNA和蛋白水平的表达;通过MTT比色法、细胞划痕实验和Boyden小室侵袭实验观察转染pSilencer2.1-ARTN-siRNA后细胞增殖、迁移和侵袭能力的改变。结果:转染重组质粒pSilencer2.1-ARTN-siRNA后人食管癌细胞TE11中ARTN的mRNA表达受到抑制,蛋白表达降低;通过体外实验表明,细胞的增殖能力、迁移能力和侵袭能力均减弱。结论:siRNA沉默ARTN基因的表达可降低人食管癌细胞TE11的增殖、迁移和侵袭能力,ARTN可能是食管癌的一个生物治疗靶点,有望成为治疗食管癌的新途径。
- 李书军和宇峥闫红江沈玉光张逊
- 关键词：SIRNARTN食管癌真核表达载体
- 微小RNA-181a在人食管癌EC9706细胞中对靶基因PRDM1调控作用的研究被引量：3
- 2011年
- 目的:构建微小RNA(microRNA,miR)-181a的真核表达载体和靶基因PRDM1(encoding PR domain containing1,with ZNF domain)的3'非翻译区(3'-untranslated region,3'UTR)荧光素酶报告载体,在人食管癌EC9706细胞中验证miR-181a对靶基因PRDM1的调控作用。方法:根据miR-181a成熟序列在基因组中的位置及其上下游200个碱基序列,以人食管癌KYSE150细胞基因组DNA为模板设计引物,PCR扩增包含miR-181a前体的序列,克隆到线性化的pMD18-T Simple载体中,经BamHⅠ和EcoRⅠ酶切后亚克隆到质粒pCDNA3.1(+)上,对重组质粒进行酶切鉴定和测序分析。通过实时定量PCR法检测人食管癌EC9706细胞转染重组表达载体pCDNA3.1-miR-181a后成熟miR-181a的表达水平。应用生物信息学预测软件对miR-181a的靶基因进行预测,将候选靶基因PRDM1的3'UTR融合到pMIR荧光素酶基因下游,通过双荧光素酶报告基因检测miR-181a对靶基因PRDM13'UTR的调控作用。将pCDNA3.1-miR-181a表达质粒转染到人食管癌EC9706细胞中,蛋白质印迹法检测其对PRDM1蛋白表达的影响。结果:成功构建miR-181a真核表达载体,实时定量PCR验证表明pCDNA3.1-miR-181a在EC9706细胞中能够过表达成熟miR-181a。生物信息学预测PRDM1可能是miR-181a的靶基因之一,于是构建了PRDM1的3'UTR荧光素酶报告载体pMIR-PRDM1,在此基础上对PRDM1的3'UTR"种子区"进行定点突变。双荧光素酶报告基因分析表明,miR-181a能够作用于PRDM1基因的3'UTR。蛋白质印迹法进一步证实,miR-181a能够抑制性调控内源性PRDM1蛋白的表达。结论:MiR-181a作用于PRDM1基因的3'UTR,在转录后水平上调PRDM1蛋白的表达,提示PRDM1是miR-181a直接调控的靶基因。
- 李书军张利军张海龙牛秀兰刘力娜魏素霞张合林
- 关键词：食管肿瘤基因表达调控
- 医院安全不良事件网络管理系统的设计与应用被引量：4
- 2015年
- 目的:设计与开发医疗安全不良事件网络管理系统,实现医疗安全不良事件的动态管理与预警管理。方法:开发医疗安全不良事件网络管理系统,包含事件上报、事件查询、事件处理、统计分析、事件监控、组织架构管理、内部交流、辅助功能8个模块。结果:医院使用系统后,上报不良事件数量增加,处理时间缩短,管理人员定期统计分析,实现内部资源共享。结论:该系统实现医疗安全不良事件的动态管理,为预警管理提供数据支撑,对促进医疗服务质量和保障医疗安全有重要意义。
- 田胜男瞿长宝赵春芳冯硕程浩李书军
- 关键词：医疗不良事件网络管理
- Hsa-miR-132通过靶向FOXA1基因影响食管癌细胞的增殖和侵袭被引量：4
- 2011年
- 目的:探讨hsa-miR-132(miR-132)对人食管癌细胞增殖和侵袭的影响及其可能的机制。方法:构建pCDNA3.1(+)-miR-132表达载体并转染高转移潜能的人食管癌细胞KYSE150,G418筛选稳定过表达miR-132的KYSE150细胞。软琼脂克隆形成实验和Transwell小室实验检测KYSE150细胞的增殖和侵袭,Real-time PCR和Western blotting检测miR-132和叉头框蛋白A1基因(forkhead box protens A1,FOXA1)在KYSE150细胞中的表达,双荧光素酶报告基因分析和Western blotting检测过表达miR-132对FOXA1的调控作用。结果:成功构建pCDNA3.1(+)-miR-132质粒,获得稳定过表达miR-132的KYSE150细胞。亲本KYSE150细胞中miR-132低表达,而FOXA1蛋白高表达。与转染空载体和未转染KYSE150细胞相比,转染pCDNA3.1(+)-miR-132不影响KYSE150细胞的增殖(13.9±0.33 vs 15.4±0.11、17.1±0.20,P>0.05),但细胞体积较小且表面比较光滑;其可显著降低KYSE150细胞的侵袭能力[(55±1.6)vs(129.0±3.1)、(124.0±2.8)个细胞,P<0.01]。miR-132能够作用于FOXA1 3'-UTR,从而抑制内源性FOXA1的表达。结论:食管癌KYSE150细胞低表达miR-132,外源性过表达miR-132可负向调控FOXA1的表达,从而抑制KYSE150细胞的侵袭能力。
- 李书军张秀金侯俊峰宋学平李凤军申富生张合林
- 关键词：食管癌增殖
- 非小细胞肺癌纵隔淋巴结转移数学预测模型的建立与验证被引量：5
- 2021年
- 目的:分析影响非小细胞肺癌(NSCLC)纵隔淋巴结转移的相关危险因素,构建风险预测模型并验证其预测能力。方法:收集2017年10月-2018年8月唐山市人民医院行手术治疗的159例NSCLC患者病例为建模组,通过单因素和多因素Logistic回归分析筛选出纵隔淋巴结转移的独立危险因素。根据各危险因素权重,构建风险预测模型。通过受试者工作特征(ROC)曲线下面积评估模型的准确性。收集2018年9月-2019年3月的84例NSCLC患者病例为验证组,验证模型的预测效能。结果:多因素Logistic回归分析显示肿瘤部位、分化程度、胸膜侵犯、脉管侵犯是影响NSCLC纵隔淋巴结转移的独立危险因素(P<0.05)。根据Logistic回归分析,可得回归方程:P预测=-1.29+0.141X 1+0.763X 2+0.7442X 3+0.1325X 4,X 1:肿瘤部位(1=中央型,2=周围型)、X 2:分化程度(1=低分化,2=中分化,3=高分化)、X 3:胸膜侵犯(1=有,0=无)、X 4:脉管侵犯(1=有,0=无)。ROC曲线的Youden指数最大值为0.523,截断值为0.678,敏感性为71.3%,特异性为29.1%,曲线下面积为0.80。将验证组患者各因素带入预测模型,检验该模型预测效能,结果发现,ROC曲线下面积为0.86,Hosmer-Lemeshow拟合优度检验显示,χ2=2.45,P=0.96。模型拟合优度好,预测价值高。结论:影响NSCLC纵隔淋巴结转移的高危因素多,临床应进行及时有效评估。本研究构建的预测模型有较好的评估效能,有一定的临床应用价值。
- 赵方超李书军
- 关键词：非小细胞肺癌纵隔淋巴结受试者工作曲线
- LncRNA AFAP1-AS1对食管鳞癌细胞株EC9706转移潜能影响机制探讨被引量：13
- 2016年
- 目的食管癌是常见的消化道肿瘤,其细胞侵袭与迁移机制尚不清楚。本研究旨在探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)AFAP1-AS1对食管鳞癌细胞株EC9706侵袭及迁移能力的影响及可能的作用机制。方法构建AFAP1-AS1真核表达载体,用脂质体2000将pcDNA3.1-AFAP1-AS1表达载体及pcDNA3.1空载体转染食管癌细胞EC9706。通过G418筛选,建立稳定表达AFAP1-AS1RNA的EC9706-AFAP1-AS1细胞系。Millicell小室检测2株细胞侵袭及迁移能力的变化,Real-time PCR法检测2株细胞中血管内皮生长因子C(vascular endothelial growth factor C,VEGF-C)及Artemin的mRNA表达情况,蛋白质印迹法检测2株细胞中VEGF-C及Artemin蛋白表达的变化。结果成功构建稳定表达AFAP1-AS1的EC9706细胞系,过表达AFAP1-AS1后,EC9706细胞的迁移(数据分布符合正态分布,SW1=0.912,SW2=0.878,均P>0.05;两组间均值差异有统计学意义,t=0.002,P<0.001)及侵袭(数据分布符合正态分布,SW1=0.945,SW2=0.972,均P>0.05;两组间均值差异有统计学意义,t=0.02,P<0.001)能力均增加,VEGF-C(数据分布符合正态分布,SW1=0.931,SW2=0.922,均P>0.05;两组间均值差异无统计学意义,t=0.14,P>0.05)和Artemin(数据分布符合正态分布,SW1=0.964,SW2=0.981,均P>0.05;两组间均值差异无统计学意义,t=0.29,P>0.05)的mRNA表达差异无统计学意义,但VEGF-C(数据分布符合正态分布,SW1=0.762,SW2=0.82,均P>0.05;两组间均值差异有统计学意义,t=0.005,P<0.001)及Artemin(数据分布符合正态分布,SW1=0.892,SW2=0.853,均P>0.05;两组间均值差异有统计学意义,t=0.004,P<0.001)的蛋白表达明显增加。结论 AFAP1-AS1可能通过增加EC9706细胞中VEGF-C及Artemin的蛋白表达来增强其侵袭及迁移能力,在食管癌侵袭及进展中发挥作用。
- 柴松牛韧江中太李峰张合林王晓路李书军
- 关键词：食管肿瘤鳞状细胞癌迁移
- DKK1在肺癌中的表达及其对肺癌细胞侵袭能力的影响
- 2011年
- 目的 检测Dikkopf 1（DKK1）在肺癌组织及肺癌细胞系中的表达,并探讨其对肺癌细胞侵袭能力的影响.方法 采用免疫组化的方法检测DKK1在肺癌组织中的表达,应用Western blot检测了肺癌组织及其配对的正常肺组织和10个非小细胞肺癌细胞系中DKK1蛋白表达水平.通过已构建好的DKK1过表达的真核表达载体,将其转染到非小细胞肺癌细胞95C中,观察细胞侵袭能力的改变.结果 免疫组化检测肺癌组织中DKK1阳性表达率为76.2%.Western blot检测表明DKK1在肺癌组织中的表达明显高于配对的正常肺组织,在10个非小细胞肺癌细胞系中均有不同程度的表达.在非小细胞肺癌细胞系95C中过表达DKK1,95C细胞穿过Boyden小室的细胞数目明显增加.结论 DKK1在肺癌组织中呈高表达,并且在多个肺癌细胞系中表达,DKK1的过表达能够增加95C细胞的侵袭能力.
- 李书军刘雪峰闫洪江牛秀兰田刚崔爱荣吴文新
- 关键词：肺癌DKK1真核表达载体
- 重症肌无力患者胸腺CT与病理学检查结果对照被引量：1
- 2009年
- 王惠娟吴文新梁瑞卿周连亚李书军
- 关键词：胸腺切除重症肌无力病理学胸腺病变
