朱永红
- 作品数：59 被引量：304H指数：10
- 供职机构：第三军医大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划“九五”国家科技攻关计划重庆市医学科研计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 靶向性抗肿瘤融合蛋白RGD-hIL-24的构建、表达和体外活性研究被引量：5
- 2006年
- 目的构建靶向性抗肿瘤融合蛋白RGD-hIL-24,并对其体外抗肿瘤效应和肿瘤靶向性进行初步研究。方法利用PCR技术将GRGDS序列融合至hIL-24的N端,并将融合基因连接至表达载体pET-22b后,在大肠杆菌BL21(DE3)内进行表达。亲和层析法纯化RGD-hIL-24,复性后采用MTT比色法、荧光染色分析其体外抗肿瘤活性,并通过细胞黏附实验评价其肿瘤靶向性。结果获得RGD-hIL-24基因,序列分析正确。SDS-PAGE和Western blot证明融合基因在大肠杆菌表达相对分子质量(Mr)约为20×103的RGD-hIL-24,占全菌蛋白的26．47％,主要以包涵体形式存在。纯化后的蛋白纯度达90％以上。复性后的RGD-hIL-24能够诱导MCF-7乳腺癌细胞凋亡,显著抑制其生长,并具有肿瘤靶向性。结论大肠杆菌成功表达RGD-hIL-24融合蛋白,体外实验证实RGD-hIL-24具有显著的抗肿瘤活性和肿瘤靶向性,为其在体内抗肿瘤效应和靶向性研究奠定了基础。
- 肖斌杨珺朱永红田文标邹全明
- 关键词：RGD人IL-24抗肿瘤活性肿瘤靶向性
- 人白细胞介素-18在大肠杆菌中的高效表达被引量：3
- 2002年
- 目的 在大肠杆菌中实现人IL 18成熟蛋白 (mhIL 18)的高效表达。方法 采用RT PCR由人肝脏Kupffer细胞中扩增mhIL 18基因 ,构建非融合型原核表达质粒petTT mhIL 18,转化至大肠杆菌DH5α ,用IPTG诱导重组蛋白表达 ,超声裂解细胞提取包涵体 ,采用SDS PAGE及Westernblot分析重组蛋白的表达 ,包涵体蛋白经 8mol L尿素溶解 ,透析复性 ,ELISA检测重组蛋白诱导人外周血单个核细胞 (PBMC)产生IFN γ的能力。结果 所扩增的mhIL 18基因与GenBank公布的序列一到。经IPTG诱导 ,mhIL 18在大肠杆菌中的表达量占菌体蛋白的 40 %以上 ,在细胞中以包涵体形式存在 ,复性的重组蛋白具有诱生IFN γ的能力。结论 mhIL
- 朱永红邹全明
- 关键词：白细胞介素-18包涵体
- 重组幽门螺杆菌热休克蛋白A的纯化研究
- 2005年
- 目的对重组幽门螺杆菌热休克蛋白A大肠杆菌工程菌表达的rHspA蛋白进行纯化研究。方法酵后的重组大肠杆菌进行高压破菌后,采用镍离子亲和柱层析和凝胶过滤柱层析相结合的方法分离纯化rHspA,使用SDS-PAGE和HPLC鉴定蛋白纯度,注射免疫家兔检测纯化后的rHspA的免疫学活性。结果所纯化获得的rHspA蛋白纯度>98%,总回收率为60%,并且保持了良好的免疫学活性。结论建立了从重组大肠杆菌中纯化高纯度rHspA的工艺,为Hp疫苗的进一步研究提供了材料。
- 郭鹰邹全明朱永红吴超张卫军
- 关键词：幽门螺杆菌热休克蛋白柱层析
- 地高辛素标记探针原位杂交法检测肝组织中庚型肝炎病毒RNA被引量：11
- 2000年
- 目的自从建立起甲、乙、丙、丁、戊5种肝炎病毒的病原学诊断之后,仍有少部分肝炎患者的病因得不到明确,因此不少学者试图探索是否还有新型肝炎病毒的存在,并进行了大量的流行病学和实验诊断的研究,认为的确存在可经肠道外传播并引起人类肝炎的致病因子.目前关于庚型肝炎病毒(HGV/GBV-C)的致病性和组织嗜性尚无结论性资料.本文目的是研究 HGV/GBV-C RNA 在肝组织中表达并进一步探讨HGV/GBV-C 引起肝脏损害的可能机制.方法应用地高辛素标记 HGV/GBV-C cDNA 探针原位杂交法检测肝组织中庚型肝炎病毒 RNA.结果检测196例肝炎患者肝组织切片中的 HGV/GBV-CRNA 阳性率为37.24%;在血清中 HGV/GBV-C RNA 呈阳性患者肝组织中该病毒 RNA 检出率为48.94%;单一 HGV/GBV-C 感染者肝组织中检出率为58.33%;阳性信号仅为胞质型.原位杂交信号阳性细胞与肝细胞变性、瘀胆、炎性细胞浸润及细胞坏死程度等并不相关.本文原位杂交与免疫组化两种检测方法对比研究结果表明,两项技术有较高的符合率(86.74%),说明这两项技术具有相辅相成的作用.结论提示 HGV/GBV-C RNA 并不直接损害肝细胞.原位杂交和免疫组化两项技术成功地应用于石蜡包埋切片,为回顾性研究 HGV/GBV-C 的致病性及致病机制提供了有价值的实验手段.
- 聂青和胡大荣李梦东李玲朱永红
- 关键词：庚型肝炎病毒原位杂交
- 肝炎患者肝组织中庚型肝炎病毒相关抗原的表达被引量：8
- 2000年
- 目的 研究庚型肝炎病毒 (HGV)相关抗原在肝组织中定位。方法 采用免疫组织化学方法 ,用抗 HGV非结构蛋白 5 (NS5 )单克隆抗体 (McAb)对 196例肝炎患者肝组织中的HGV相关抗原进行了检测。结果 196例肝炎患者肝组织中的HGV相关抗原表达阳性率为 2 5 .0 % ;在血清中HGVRNA呈阳性患者肝组织中抗原检出率为 38.3% ;单一感染者肝组织中抗原表达阳性率为6 6 .7% ;阳性信号位于胞浆中 ,阳性信号表达阳性细胞可位于坏死灶中或灶旁 ,碎屑样坏死处也可见该病毒抗原表达。结论 初步研究结果表明HGV相关抗原在肝损伤过程中可能起到靶抗原的作用。
- 聂青和李梦东胡大荣李玲朱永红
- 关键词：抗原庚型肝炎HGV
- 人和易感动物0157菌基因工程多价亚单位疫苗及制备方法
- 本发明属生物制药领域，涉及一种用于人和易感动物O157菌感染免疫预防和治疗的基因工程多价亚单位疫苗及制备方法。该疫苗选用紧密粘附素(Intimin)和志贺毒素I结合亚单位(Stx1B)、志贺毒素II结合亚单位(Stx2B...
- 邹全明易勇毛旭虎朱永红程建平郭刚罗平张卫军
- 文献传递
- 体外诱导人肝脏星形细胞表型激活及部分信号分子在其中的作用研究
- 肝纤维化是临床上常见的病理改变,是各种慢性肝病的一种共同反应,可视为肝硬变的早期阶段,至今临床上仍缺乏有效的治疗手段.肝脏星形细胞(HSCs)是肝脏的一种非实质细胞,其主要生理功能为摄取并储存维生素A<,0>在各种肝损伤...
- 朱永红
- 关键词：免疫细胞化学信号传导
- 重组幽门螺杆菌热休克蛋白A基因工程疫苗制备中的纯化工艺
- 本发明公开了重组幽门螺杆菌热休克蛋白A基因工程菌疫苗制备中的纯化工艺。采用对基因工程菌进行高压破菌、过滤，镍离子亲和层析纯化、浓缩裂解、凝胶过滤层析及复性等技术，获得高纯度的重组幽门螺杆菌热休克蛋白A。该发明纯化工艺简捷...
- 邹全明郭鹰冉向阳朱永红吴超张卫军童文德
- 文献传递
- 重组人白细胞介素-10在大肠杆菌中的表达及生物学活性分析被引量：1
- 2005年
- 目的在大肠杆菌中表达重组人白细胞介素-10(Interleukin-10,IL-10),并检测其生物学活性。方法将IL-10基因重组到质粒pET11c中,转化BL21(DE),提取质粒,经酶切鉴定和测序分析;在25℃用低浓度的IPTG诱导表达,对包涵体IL-10稀释复性;经ELISA检测其含量,MC/9细胞增殖法检测其生物学活性。结果工程菌IL-10/pET11c/BL21诱导表达的目的蛋白以可溶性和包涵体两种形式存在,Westernblot鉴定证实为IL-10蛋白,两种形式的IL-10均具有一定的生物学活性。结论已成功地在大肠杆菌中表达了IL-10,为进一步纯化和制备IL-10的基因工程药物打下了基础。
- 井申荣邹全明罗萍洪愉朱永红
- 关键词：大肠杆菌生物学活性可溶性蛋白包涵体
- 肝脏星形细胞系的建立及其应用被引量：13
- 1999年
- 肝脏星形细胞（ｈｅｐａｔｉｃｓｔｅｌａｔｅｃｅｌｓ，ＨＳＣｓ），又称为储脂细胞（ｆａｔｓｔｏｒｉｎｇｃｅｌｓ，ＦＳＣｓ）、Ｉｔｏ细胞、窦周脂肪细胞（ｐｅｒｓｉｎｕｓｏｉｄａｌｌｉｐｏｃｙｔｅｓ）、储存维生素Ａ细胞（ｖｉｔａｍｉｎＡｓｔｏｒｉｎｇｃ...
- 朱永红胡大荣
- 关键词：星形细胞细胞株
