徐文峰
- 作品数：13 被引量：11H指数：2
- 供职机构：西南医科大学基础医学院免疫学教研室更多>>
- 发文基金：四川省青年科技基金四川省卫生厅科研基金泸州市科技局基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- IL-33蛋白及抗IL-33全人源单链抗体的表达、纯化及鉴定被引量：2
- 2016年
- 目的表达IL-33蛋白及抗IL-33全人源天然单链抗体并进行纯化及鉴定。方法前期采用噬菌体展示技术从文库容量为108的全人源天然抗体文库筛选了抗IL-33全人源单链抗体,并将筛选的抗IL-33基因转入表达载体p LY16中。在前期工作的基础上,进行了以下研究:表达并纯化人IL-33蛋白,将构建的IL-33/PET102/D-TOPO质粒转化到大肠杆菌BL21中,表达后用Ni-NTA树脂纯化、浓缩再进行SDS-PGE电泳和Western blot验证。将抗IL-33 sc Fv/p LY16重组质粒转化入大肠杆菌DH5αF’中,应用PCR技术挑选阳性克隆并进行验证,IPTG诱导可溶性表达,Ni-NTA树脂纯化,SDS-PGE电泳和Western blot验证。结果 IL-33/PET102/D-TOPO质粒测序结果显示,插入的外源基因为人全长IL-33 c DNA。表达的IL-33融合蛋白相对分子质量为45 000左右。Western blot结果显示表达的蛋白为人IL-33蛋白。对从天然抗体文库中筛选的抗IL-33单链抗体进行测序,结果显示序列大小为750 bp左右,为开放阅读框,各序列之间有个别氨基酸的差异,说明为不同的单链抗体。ELISA结果显示抗IL-33单链抗体与IL-33有一定的结合能力。Western blot结果证实,表达的抗体为抗IL-33抗体。结论成功表达并纯化了IL-33抗原、抗IL-33全人源天然单链抗体。
- 郭夕源杨江华徐文峰邬于川袁青
- 全人源scFv-Fc融合抗体高表达细胞株的筛选
- 研究背景:IL-33是IL-1超家族成员,ST2配体,广泛表达于多种组织与细胞,主要参与调节Th2型免疫反应.当IL-33过表达时可加重Th2和肥大细胞介导的炎症性疾病,与过敏性与自身免疫性疾病有明显相关性.用鼠源IL-...
- 叶迎春年四季吴桐徐文峰袁青
- 关键词：SCFV融合蛋白CHO细胞
- 抗TSLP全人源单链抗体筛选与初步鉴定被引量：2
- 2014年
- 目的:表达TSLP蛋白,从全人源单链抗体文库中筛选得到抗TSLP单链抗体。方法:扩增TSLP cDNA,将目的基因与表达载体pET101/D-TOPO连接,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达并对表达产物进行纯化鉴定。以生物素化的TSLP蛋白为抗原从前期构建的全人源抗体文库中采用噬菌体展示技术筛选抗TSLP全人源单链抗体(scFv)。结果:扩增的TSLP cDNA片段大小为423 bp左右。表达的TSLP蛋白大小为26 kD左右,Dot blot及Western blot鉴定显示表达的蛋白正确,为TSLP目的蛋白。以生物素化的TSLP蛋白为抗原,采用噬菌体展示技术对全人源抗体文库进行3轮富集,通过ELISA检测有35%的scFv与TSLP有结合特性。将筛选的与TSLP结合能力强的单链抗体进行了Western blot鉴定和测序。结论:成功筛选到抗TSLP全人源单链抗体。
- 朱建光袁青黄黎徐文峰年四季
- 关键词：TSLP人源单链抗体
- 抗金黄色葡萄球菌全人源单链抗体的筛选与鉴定
- 研究背景:金黄色葡萄球菌常引起败血症、肺炎和全身性感染等,特别是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(meticillin-resistant staphylococcus aureus,MRSA)是临床上最常见的耐药菌之一,其治疗...
- 年四季吴桐徐文峰叶迎春袁青
- 关键词：金黄色葡萄球菌噬菌体展示
- 医学免疫学教学中数字化平台的应用研究被引量：2
- 2014年
- 信息技术的发展给人类知识与文化的传播带来了革命性的意义,大量数字化教学资源的运用为教育教学提供了有力的保障。医学免疫学是一门以研究机体免疫系统结构和功能,探讨免疫功能异常所致的病理过程和机制,以及疾病预防、诊断与治疗的学科,在医学免疫学教学中应用数字化平台具有极高的价值,不过也存在一些缺陷。本文就医学免疫学教学中数字化平台的应用进行了探讨,对提高医学免疫学教学中数字化平台应用效能有一定促进意义。
- 高燕徐文峰郭夕源
- 关键词：医学免疫学教学创新
- 金黄色葡萄球菌α-溶血素的基因克隆与蛋白表达纯化
- 金黄色葡萄球菌α-溶血素(α-Hla)是一种外毒素,具有良好的抗原性,是金黄色葡萄球菌致人类疾病的主要因子,在金黄色葡萄球菌感染特别是医源性感染中,起到主要作用。金黄色葡萄球菌感染容易产生耐药性,后期抗感染治疗难度大。目...
- 吴桐年四季徐文峰叶迎春袁青
- 高校实验室生物安全的防范与措施被引量：4
- 2014年
- 高校实验室的生物安全关系到高等学校教学科研事业的可持续发展以及安全与稳定。为保证学校教学科研人员、教学人员、实验人员及学生的安全和与健康,避免由生物有害因子引起的实验室或环境污染,应将实验室生物安全工作放在首位,使其规范化、科学化。本文分别从管理体制、配套设施及人员培训等方面对高校实验室生物安全的防范与措施提出建议。
- 年四季袁青叶迎春徐文峰吴桐
- 关键词：生物安全
- 抗TSLP全人源单链抗体筛选与鉴定
- <正>目的表达TSLP蛋白,从全人源单链抗体文库中筛选得到抗TSLP单链抗体。方法扩增TSLP cDNA,将目的基因与表达载体pET101/D-TOPO连接,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达并对表达产物进行纯化鉴定...
- 朱建光年四季徐文峰叶迎春袁青
- 文献传递
- 抗金黄色葡萄球菌全人源单链抗体的筛选与鉴定
- 研究背景:金黄色葡萄球菌常引起败血症、肺炎和全身性感染等,特别是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(meticillin-resistant staphylococcus aureus,MRSA)是临床上最常见的耐药菌之一,其治疗...
- 年四季吴桐徐文峰叶迎春袁青
- 关键词：金黄色葡萄球菌噬菌体展示
- 文献传递
- 金黄色葡萄球菌α-溶血素的基因克隆与蛋白表达纯化
- 金黄色葡萄球菌α-溶血素(α-Hla)是一种外毒素,具有良好的抗原性,是金黄色葡萄球菌致人类疾病的主要因子,在金黄色葡萄球菌感染特别是医源性感染中,起到主要作用。金黄色葡萄球菌感染容易产生耐药性,后期抗感染治疗难度大。目...
- 吴桐年四季徐文峰叶迎春袁青
- 文献传递
