彭存智 作品数:41 被引量:108 H指数:5 供职机构: 中国热带农业科学院热带生物技术研究所 更多>> 发文基金: 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项 海南省自然科学基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 轻工技术与工程 更多>>
番茄多聚半乳糖醛酸酶反义基因植物表达载体的构建及转化番茄的研究 根据反义RNA技术的原理,将多聚半乳糖醛酸酶(Polygalacturonase,PG)基因反向克隆到植物表达载体pBI151上,构建具有反义PG基因的植物表达载体.通过酶切鉴定和Agarose gel电泳检测发现,所... 彭存智关键词:番茄 基因 反义基因 植物表达载体 转基因植株 香蕉束顶病毒海南分离物DNA2编码区的克隆及抗血清的制备 被引量:1 2008年 利用PCR方法克隆香蕉束顶病毒海南分离物(Banana bunchy top virus,BBTV-HN)DNA2编码区,将其插入到原核表达载体pGEX-6p-1谷胱苷肽-S-转移酶(GST)基因下游。所得克隆pGEX-HN-B2测序结果表明,插入的DNA2片段为267bp,且表达相位和理论上设计的完全一致。把此重组质粒转化到E.coli Rosetta(DE3)中,经过异丙硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后出现约33Ku融合蛋白质表达条带。为获得特异的血清,切下目的表达条带并免疫兔子。经Western-blotting检测,获取的血清可以和表达的33Ku融合蛋白特异结合,表明已成功获得DNA2编码蛋白的血清。 赵焕阁 牛胜鸟 彭存智 刘志昕关键词:香蕉束顶病毒 一种通过硅胶柱吸附洗脱快速纯化蛋白的方法 本发明公开了一种通过硅胶柱吸附洗脱快速纯化蛋白的方法,涉及生物技术领域。包括以下步骤:S1、目标蛋白的获取;S2、蛋白结合缓冲液的添加;S3、溶胶柱的制备;S4、漂洗液的添加;S5、蛋白洗脱液的添加;S6、检测回收效果。... 仝征 王丹 郑杏梅 彭存智 常丽丽 徐兵强基于琼脂糖堆叠凝胶的蛋白电泳分离方法 本发明属生物技术领域,涉及一种基于琼脂糖堆叠凝胶的蛋白电泳分离方法,先配置凝胶缓冲液、电泳缓冲液,制作顶层胶盒,然后高浓度琼脂糖堆叠凝胶下层凝胶灌制、琼脂糖堆叠凝胶上层凝胶灌制,最后利用琼脂糖堆叠凝胶进行电泳分离蛋白。本... 仝征 王丹 黄超 常丽丽 彭存智 徐兵强根癌农杆菌介导大果西番莲基因转化 被引量:1 2003年 以大果西番莲种子无菌苗的子叶和下胚轴为外植体,在添加不同质量浓度BA和IAA的MS系列培养基上进行不定芽的诱导,确定MS+BA2.0mg·L^(-1)+IAA0.1 mg·L^(-1)为最适的不定芽诱导培养基,下胚轴、子叶外植体诱导芽分化率分别为88.33%,90.00%。将诱导出的不定芽接种在添加不同质量浓度IBA和NAA的MS系列培养基上,进行不定根的诱导,确定MS+NAA0.5mg·L^(-1)+IBA0.2mg·L^(-1)为最适的不定根诱导培养基,生根率达92.86%。用三亲交配法将质粒pBICr先转移到E.coli DH_5α,然后转移到根癌农杆菌。利用含有NPT-Ⅱ基因和CaMV35S启动子控制下的黄瓜花叶病毒外壳蛋白(CMV-CP)反义基因的表达载体,通过根癌农杆菌介导法将其导入西番莲受体细胞,在质量浓度为50mg·L^(-1)的Kan^+选择压力下培养,获得大果西番莲CP转基因再生植株。 余贤美 刘志昕 曾华金 彭存智关键词:基因转化 农杆菌 不定芽 无菌苗 培养基 内源启动子驱动的尖孢镰刀菌分泌表达载体、Foc4转化菌及构建方法 本发明涉及生物技术领域,特别涉及内源启动子驱动的尖孢镰刀菌分泌表达载体、Foc4转化菌及构建方法。该表达载体以pCT74HSPG载体为基础载体,采用SEQ ID NO:1所示的Six1d基因启动子替换pCT74HSPG载... 常丽丽 仝征 彭存智 王丹 徐兵强文献传递 方斑东风螺配合饲料中锌的添加量研究 被引量:5 2012年 在含101 mg/kg锌的实用基础饲料中,分别加入0、30、60、90、120和150 mg/kg锌,饲喂初质量为(2.65~2.95)g的方斑东风螺幼螺10周。结果表明:饲料中添加锌,对方斑东风螺的增重率有显著影响,添加30 mg/kg时增重率最大,显著高于对照组。但添加锌没有影响螺的壳增长率、成活率和饵料系数。添加锌对方斑东风螺软体部粗蛋白、脂肪、灰分和水分有一定影响。软体组织锌含量受到饲料锌水平的显著影响,且与饲料锌含量呈正相关y=0.156 3x+9.254 5,R^2=0.940 4。以增重率为指标,建议在方斑东风螺的实用饲料中,应添加30 mg/kg锌,锌的总含量约130 mg/kg。 彭存智 王冬梅 沈文涛 王春吉 鲍时翔关键词:方斑东风螺 锌 营养成分 生命的自组织 被引量:2 1998年 以耗散结构理论为基础,从生命的平衡和不平衡,生命的有序和无序以及生命的自组织等三个方面对生命的发生,发展及死亡的过程进行探讨,尤其对生命的自身防卫机制以及药物对疾病的治疗作用等从理论上进行了分析和探讨。 张银东 彭存智关键词:生命 自组织 尖孢镰刀菌Six1d启动子的克隆及其在真菌分泌表达载体构建中的应用 2023年 前期研究中构建的真菌分泌表达载体p74HSP-EGFP可在真菌中表达目标蛋白,在真菌侵染并定殖植物的过程中分泌目标蛋白到植物中,从而验证目的基因的功能,但p74HSP-EGFP载体中驱动目的基因表达的毒素基因(toxin A,ToxA)启动子不是尖孢镰刀菌古巴专化型(Fusarium oxysporum f. sp. cubense, Foc)自身的启动子。为能在Foc中更有效地表达其自身基因,本研究从尖孢镰刀菌1号生理小种(Foc1)中克隆到高丰度表达的木质部分泌蛋白基因(secreted in xylem 1d, Six1d)的启动子,来替换p74HSP-EGFP载体中的ToxA启动子,并将新构建的真菌分泌表达载体命名为pSix1d74HSPG。为比较2个分泌载体的表达效率,本研究进一步将p74HSP-EGFP和pSix1d74HSPG载体转化尖孢镰刀菌热带4号生理小种(Foc TR4),获得的转化菌株分别在钾盐液体培养基(KK)中振荡培养5 d后,检测分泌到胞外的EGFP荧光强度和EGFP蛋白的表达量。结果显示,pSix1d74HSPG中Six1d启动子驱动的EGFP表达强度能够达到p74HSP-EGFP中ToxA启动子驱动的1.6~1.7倍,说明pSix1d74HSPG载体可代替p74HSP-EGFP载体在Foc中更高效分泌表达目的蛋白,为香蕉枯萎病抗感病分子机理研究提供重要的实验工具。 彭存智 常丽丽 王丹 黄超 徐兵强 仝征关键词:香蕉枯萎病 分泌表达载体 一种高浓度琼脂糖电泳凝胶的制备方法及其应用 本发明属生物技术领域,涉及一种高浓度琼脂糖电泳凝胶的制备方法及其应用,将缓冲液、琼脂糖混合配置琼脂糖溶液,在蒸汽环境中于高温高压条件下进行溶解,得到琼脂糖溶胶,将玻璃板灌胶器预热后注入琼脂糖溶胶,插入梳子,室温下冷却凝固... 仝征 彭存智 常丽丽 王丹 黄超 徐兵强文献传递