强亮
- 作品数：11 被引量：47H指数：5
- 供职机构：南通医学院神经科学研究所江苏省神经再生重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金江苏省重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 神经再生素对神经细胞生长影响的实验研究被引量：2
- 2002年
- 目的 :探讨神经再生素 (NRF)对离体培养的 PC12细胞、背根神经节细胞、大脑皮层细胞生长影响的分子生物学机制。方法 :采用细胞体外培养、半定量 RT- PCR、Western blot方法 ,观察和比较 NRF组 (添加 NRF)、NGF组 (添加 NGF)和空白对照组 (基础培养基 )中细胞生存状况及相关基因 m RNA及其蛋白水平的表达变化。结果 :NRF作用于离体培养的 PC12细胞 ,可促使其分化 ;作用于背根神经节细胞 ,GAP- 4 3和 NF- L m RNA表达在不同时间呈不同程度的上调 ;作用于大脑皮层细胞 ,GAP- 4 3和 NF蛋白亦比对照组表达量为高。结论 :NRF具有维持细胞生存和促进神经细胞突起生长的作用 ,并可使神经元 GAP- 4 3和 NF m RNA表达及其蛋白合成上调。
- 刘梅强亮王林芳丁斐
- 关键词：神经再生素神经生长因子生长相关蛋白43神经丝蛋白神经细胞
- 神经再生素促PC12细胞分化作用及其信号途径的初步研究
- 神经再生素是中药提取的有效组分(NerveRegeneration Factor,NRF,中国专利申请号01108209.7),以往的研究表明,NRF具有明显的促神经生长作用。本研究以神经生长因子(NGF)为阳性对照,采...
- 丁斐强亮
- 关键词：神经科学神经再生素PC12细胞
- 文献传递
- 中药合剂神经生长液的促神经生长作用被引量：12
- 2003年
- 目的观察中药合剂神经生长液对神经元生长的促进作用,为神经生长液用于治疗神经损伤、促进损伤神经修复提供实验依据。方法新生大鼠背根神经节无血清培养,在基础培养液中加入神经生长液,观察实验组与空白对照组背根神经节细胞生长状况和突起生长的长度。胎鼠大脑皮质神经元无血清培养,在基础培养液中加入神经生长液,采用3-(4,5-dimethylthiaz-2-y1)-2,5-dijohenyltetrazoliumbromide(MTT)法,观察实验组、神经生长因子(阳性对照)、空白对照组大脑皮质神经元的生长状态。结果与对照组相比,实验组背根神经节细胞突起生长明显,突起长度(314±43)μm显著大于对照组(76±26)μm(F=313.69,P<0.01);与对照组相比,神经生长因子、神经生长液均可显著提高无血清培养条件下大脑皮质神经元对MTT的代谢率(F=82.54,P均<0.01),且存在明显的剂量效应关系。结论神经生长液在体外可促进背根神经节和大脑皮质神经元生长。
- 周鸣鸣丁斐强亮
- 关键词：中药合剂神经生长液神经损伤新生大鼠
- 神经再生素对PC12细胞分化的影响被引量：9
- 2003年
- 目的 探索神经再生素 (nerveregenerationfactor,NRF)诱导PC12细胞神经元性分化的潜在能力。方法 以NGF为阳性对照 ,采用细胞培养方法 ,观察NRF在低血清的情况下 ,诱导PC12细胞发生的形态学改变 ;同时 ,使用荧光免疫细胞化学方法 ,观察神经元标志性物质—低分子量神经丝蛋白 (NF L)在NRF诱导分化的PC12细胞中的表达。采用RT PCR方法观察NRF对无血清培养的PC12细胞即早基因c-fos的表达变化。结果 加药后第 14天 ,NRF组以及NGF组的PC12细胞呈现明显的形态学改变 :细胞胞体皱缩 ,且有明显的突起生长。空白对照组、NRF组 (0 0 1μg/ml、0 1μg/ml、 1μg /ml)、NGF组 (0 0 5 μg/ml)具有明显突起的分化细胞占总细胞的比例分别为 5 16 9%、 2 5 718%、4 3 32 5 %、 73 0 38%、 85 2 86 %。免疫荧光细胞化学结果显示NRF、NGF组的分化细胞基本都为NF L标记阳性的细胞 ;NRF能使c fos的表达上调 ,作用 2h后达峰值。结论 神经再生素具有诱导PC12细胞的神经元性分化作用 ,且能使c-fos表达上调。
- 强亮丁斐
- 关键词：神经再生素PCI2细胞细胞分化中药
- 神经生长液对衰老模型小鼠学习记忆能力的影响被引量：16
- 2003年
- 目的:探讨神经生长液对D-半乳糖衰老模型小鼠学习记忆能力及海马神经丝蛋白表达的影响,为应用神经生长液防治神经退行性变疾病提供实验依据。方法:D-半乳糖致小鼠衰老模型,以Y型电迷宫检测其学习记忆能力;以抗低分子量神经丝蛋白(NF-L)抗体,采用WesternBlot法观察海马NF-L的表达。结果:与正常对照组相比(65.8±5.8),D-半乳糖衰老模型小鼠达到学会标准所用的次数明显增加(97.8±13.9,t=7.355,P<0.01),低、高剂量神经生长液可明显减少衰老模型小鼠的次数(80.1±9.3,67.7±8.2,t=3.6662,6.4609,P均<0.01)。衰老小鼠海马NF-L表达量明显下降;神经生长液防止衰老所致NF-L表达量减少。结论:神经生长液可改善D-半乳糖模型小鼠的学习记忆能力,防止衰老小鼠海马NF-L表达的减少。
- 柯开富周鸣鸣强亮丁斐
- 关键词：衰老神经生长液神经丝蛋白学习记忆能力
- 神经再生素激活PC12细胞ERK1/2的实验研究被引量：10
- 2003年
- 本实验初步探讨了神经再生素 ( NRF)作用于 PC12细胞的信号传导途径。采用 MTT法检测 NRF对无血清培养的PC12细胞存活率的影响 ;用磷酸化的 Elk单克隆抗体 ,通过 Western blot法观察 NRF的不同浓度 ( 10、10 0、10 0 0 ng/ m l)及不同作用时间 ( 0 min、15 min、3 0 min、1h、2 h)对无血清培养的 PC12细胞 ERK1/ 2活性的影响 ;还运用 MEK1/ 2阻断剂 U0 12 6,观察NRF激活 ERK1/ 2是否需要其上游信号蛋白 MEK1/ 2的激活。结果表明 ,NRF作用于无血清培养的 PC12细胞 ,可以激活ERK1/ 2 ,存在明显的剂量效应关系和时间依赖作用 ,在 10 0 0 ng/ ml浓度下最大 ,作用 2 h时达峰值 ;U0 12 6作用后 ,可抑制 NRF作用于 PC12细胞引起的 ERK1/ 2的激活。由此可见 ,NRF对无血清培养的 PC12细胞具有保护作用 ,可能通过激活 ERK1/ 2磷酸化级联途径来介导这些作用。
- 强亮顾星星丁斐
- 关键词：神经再生素U0126PCI2细胞信号传导途径
- Schwann细胞转染Ha-Ras对 β_1 ,4-半乳糖基转移酶I,II,V表达的影响
- 2003年
- 目的 :研究原代Schwann细胞转染持续激活型原癌基因Ha Ras后β1,4 半乳糖基转移酶I,II ,V(β 1,4 galactosyltransferaseI ,II ,V ;β 1,4 GalT I,II,V)表达变化。方法 :构建Ha Ras表达质粒和分离纯化大鼠Schwann细胞 ,将Ha Ras表达质粒转染到Schwann细胞中。采用NorthernBlot方法分析转染细胞中Ha Ras转染情况和转染后β 1,4 GalT I,II,V的表达变化。结果 :原代Schwann细胞转染持续激活型Ha Ras后 ,β 1,4 GalT I随转染时间延长而表达增高 ,而 β 1,4 GalT II及V的表达无变化。 结论 :β 1,4 GalT I随Schwann细胞转染时间Ha Ras延长而表达增高 ,提示原代细胞表面的 β 1,4 GalT I可能与Ha Ras影响原代细胞增殖的信号途径相关。
- 沈爱国丁斐强亮龚蕾蕾王汉洲顾建新
- 关键词：HA-RAS质粒转染原癌基因
- β1,4-半乳糖基转移酶-Ⅰ对施万细胞增殖的影响被引量：5
- 2003年
- 目的 探讨周围神经施万细胞表达 β1,4 半乳糖基转移酶 Ⅰ (β 1,4 GalT Ⅰ )对其增殖的影响。 方法 将构建的正、反义 β 1,4 GalT Ⅰ表达质粒 ,转染到施万细胞中 ,分析转染细胞倍增时间、3H TdR掺入情况以及细胞周期变化。 结果 转染正义β 1,4 GalT Ⅰ后施万细胞的增殖受到抑制 ,这种作用随转染浓度增大而增强 ;在G1 /G0 期的细胞数目增加 ,S期的数目减少。而转染反义 β 1,4 GalT Ⅰ有相反的作用。 结论 β 1,4 GalT Ⅰ对施万细胞的增殖有抑制作用 ,可能在周围神经施万细胞的增殖调节中发挥重要作用。
- 沈爱国丁斐顾晓松强亮王汉洲顾建新
- 关键词：施万细胞细胞增殖周围神经损伤流式细胞仪细胞周期
- p75在大鼠失神经支配腓肠肌肌内神经中的表达
- ＜正＞ p75是神经营养因子低亲和力受体,能与所有的神经营养因子结合。周围神经损伤后,神经干、脊髓及背根节神经元重新表达p75,但肌内神经纤维及骨骼肌是否重新表达p75尚不清楚。因此本研究观察了神经营养因子低亲和力受体p...
- 严志强丁斐强亮王晓冬衣昕
- 文献传递
- p75NTR在大鼠失神经支配腓肠肌肌内神经中的表达
- 2002年
- 目的 观察神经营养因子低亲和力受体 p75NTR在大鼠失神经支配腓肠肌内神经的表达和分布。方法 取正常大鼠及坐骨神经钳夹伤后 3、 6、 12、 2 1天的大鼠腓肠肌 ,免疫组织化学ABC法显示p75NTR阳性免疫反应产物。结果 正常大鼠腓肠肌无阳性免疫反应产物。坐骨神经损伤后不同时间腓肠肌内的神经呈 p75NTR阳性反应 ,肌细胞为阴性。结论 坐骨神经损伤导致失神经支配腓肠肌内神经表达 p75NTR ,而肌细胞不表达 p75NTR。
- 严志强丁斐强亮王晓冬衣昕
- 关键词：P75NTR肌内神经失神经支配腓肠肌
