张明辉
- 作品数：40 被引量：144H指数：8
- 供职机构：东北农业大学更多>>
- 发文基金：转基因生物新品种培育专项国家科技重大专项哈尔滨市科技创新人才研究专项资金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 一种复合肥及其在提高王不留行黄酮苷产量中的应用
- 本发明公开了一种复合肥及其在提高王不留行黄酮苷产量中的应用。本发明提供了一种含有N元素、P元素和K元素的复合肥；所述复合肥中，N、P、K三种元素的质量配比为46‑138∶20‑40∶46‑92。本发明还提供了一种复合肥，...
- 袁肖寒李强于艳波张明辉仇有文敖金霞刘营
- 文献传递
- 水稻OsAMTR310基因的克隆与在干旱胁迫下的功能分析被引量：1
- 2018年
- 为了探究水稻转氨酶基因Os AMTR310的功能以及明确其作用机制,利用多种分子生物学手段对Os AMTR310基因进行了功能分析。实时定量PCR的分析结果表明,Os AMTR310在干旱条件下相对基因表达水平是正常条件下的3.0倍;根据NCBI上获得的Os AMTR310基因序列设计引物,扩增其全长CDS序列,并利用NCBI对蛋白序列的功能结构域进行预测;将Os AMTR310的CDS序列连入p CAMBIA1302中构建超表达载体,并转入受体材料,通过PCR及蛋白质免疫印迹分析来确定Os AMTR310阳性转基因植株,进而分析Os AMTR310转基因植株与野生型植株在干旱胁迫下的差异来验证Os AMTR310基因的功能。结果表明,Os AMTR310 c DNA全长1 873 bp,CDS全长1 533 bp,编码510个氨基酸。Os AMTR310蛋白具有3个保守的结构域,属于乙酰鸟氨酸氨基转移酶家族。在正常条件下,Os AMTR310转基因植株与野生型相比没有明显的差别;然而,在干旱条件下,Os AMTR310转基因植株的存活率是野生型的1.5~2.0倍。通过测定叶片游离脯氨酸含量发现,Os AMTR310转基因植株游离的脯氨酸含量在正常条件下与野生型相比并无显著差异,而Os AMTR310转基因植株的游离脯氨酸含量在干旱条件下是野生型植株的1.5~2.0倍,说明水稻转氨酶基因Os AMTR310赋予了水稻更高的耐旱性。
- 李嘉明孙健张明辉冷月孙琦赵宏伟邹德堂
- 关键词：水稻转基因转氨酶耐旱性
- 耐除草剂转基因大豆质粒标准分子的构建被引量：2
- 2014年
- 以A2704-12、A5547-127、MON89788和GTS-40-3-2等4种商品化耐除草剂转基因大豆为材料,构建质粒标准分子用于解决转基因作物检测时标准物质缺乏现状。采用双酶切技术,将扩增的大豆内参基因和耐除草剂转基因大豆转化体特异性片段克隆至pMD18-T载体上。结果显示,质粒标准分子定性PCR特异性序列片段的LOD均为20copies/μL,定量检测体系Bias最大值≤9.89%,CV最大值≤5.96%,SD最大值≤0.06,实验得到的所有偏差值均在允许范围之内,构建的质粒标准分子适用于4种耐除草剂转基因大豆特异性检测。
- 仇有文张明辉于艳波甄贞王傲雪高学军
- 关键词：大豆转基因大豆实时荧光定量PCR
- 抗除草剂转基因大豆插入拷贝数及其旁侧序列分析被引量：7
- 2011年
- 目的:确定抗除草剂转基因大豆外源基因拷贝数和其插入位点侧翼序列。方法:采用绝对定量PCR法测定转EPSPS基因大豆中外源基因拷贝数,内参照基因标准曲线选用大豆凝集素(Lectin)基因为标准品,外源基因标准曲线以含EPSPS基因的阳性质粒为标准品。采用基因组步移技术和巢式PCR方法确定抗除草剂转基因大豆插入位点旁侧序列。结果:抗除草剂转基因大豆外源基因的拷贝数为1。CaMV35S上游扩增887bp,NOS下游扩增1 340bp。结论:明确了EPSPS外源基因在转基因大豆中为单拷贝,转基因大豆插入位点附近大豆基因组发生了DNA重排。
- 仇有文高学军张明辉敖金霞袁肖寒刘营
- 关键词：旁侧序列拷贝数基因组步移
- 一种转基因生物及其产品基因定性检测的标准质粒分子
- 本发明公开了一种转基因生物及其产品基因定性检测的标准质粒分子，属于转基因生物检测技术领域。本发明将17个基因按照特定顺序拼接得到质粒标准分子的核心序列。将质粒标准分子的核心序列与骨架载体连接后，得到质粒标准分子，所得质粒...
- 张明辉甄贞于艳波李璐袁肖寒刘营仇有文高学军
- 文献传递
- 一种转基因小麦B73‑6‑1的品系特异性定量PCR检测试剂盒及应用
- 本发明公开了一种转基因小麦B73‑6‑1的品系特异性定量PCR检测试剂盒及应用，属于转基因作物检测技术领域。本发明提供的试剂盒，包括B73‑6‑1品系的特异性引物和探针以及内源参照基因的引物和探针；所述B73‑6‑1的品...
- 张明辉于微高学军甄贞刘营仇有文
- 文献传递
- DEAD-box解旋酶6负调控奶牛乳腺上皮细胞乳合成
- 引言乳合成是一种由激素和营养物质调节的复杂的生物过程,但是调控机制仍然需要进一步的研究。DEAD-box解旋酶6 (DDX6)是RNA解旋酶家族的重要成员,它涉及到mRNA储存与翻译的管理,但是DDX6的生理角色与运行机...
- 甄贞仇有文高学军张明辉
- DVS乳酸菌种菌株保存过程中遗传稳定性分析被引量：10
- 2005年
- 对从某直投式酸奶发酵剂中分离出的乳酸菌菌株在保存过程中的遗传稳定性进行了分析。观察各种保存情况下各菌株复壮时的形态,用RAPD方法分析不同保存方法保存不同时间的乳酸菌基因组的变化,并用SDS-PAGE对比不同保存方法保存不同时间乳酸菌的全细胞蛋白质表达的差异。结果表明,乳球菌在4℃保存和-80℃保存过程中基因组有变化,蛋白质表达无变化;冻干保存前后基因组和蛋白质表达均无变化。杆菌1在4℃保存过程中基因组基本无变化,蛋白质表达有变化;-80℃保存过程中基因组有变化,蛋白质表达无明显变化;冻干保存前后基因组和蛋白质表达均无变化。杆菌2在4℃保存过程中基因组和蛋白质表达均有变化;-80℃保存过程中基因组和蛋白质表达均有变化;冻干前后基因组和蛋白质表达均无变化。采用RAPD方法可以有效地对乳酸菌种菌株保存过程中的遗传稳定性进行分析。
- 刘衍芬高学军张明辉葛增广
- 关键词：DVS菌株RAPD
- 一种重组细菌素及其制备方法和应用
- 本发明涉及一种重组细菌素及其制备方法和应用，属于生物技术领域。本发明重组细菌素LacAB基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，所述重组表达载体pGEX-4T-1-LacAB包含SEQ ID NO:1所示的核苷酸...
- 于微张明辉高学军王琦
- 文献传递
- 转OsDREB3基因大豆外源基因拷贝数的确定及标准分子的构建被引量：1
- 2015年
- 为建立抗逆转OsDREB3基因大豆快速稳定的品系特异性检测方法,本试验通过实时Real-time PCR方法,以大豆凝集素基因(lectin)作为内源参照基因,确定了外源基因OsDREB3在转OsDREB3基因大豆基因组中的拷贝数为单拷贝,为建立快速、有效的品系特异性检测方法奠定基础.同时,在原有构建的含4种转基因大豆品系特异性序列的标准分子载体上又增加了转OsDREB3基因大豆品系特异性序列,新构建了含有5种转基因大豆品系特异性序列的标准分子及大豆内参照基因(lectin),已完全满足对现有国内覆盖面最大的5种转基因大豆同时、快速筛查检测工作的需要.
- 孙喆刘营张明辉李璐高学军
- 关键词：外源基因拷贝数
