张明
- 作品数：7 被引量：18H指数：3
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- 小鼠骨髓间充质干细胞的体外分离培养和鉴定方法学探讨被引量：8
- 2013年
- 目的探讨骨髓间充质干细胞体外分离培养和鉴定方法,找到一种能在质和量上均能满足需要的体外培养条件。方法无菌条件下分离处死后取小鼠双下肢骨,低糖DMEM培养液冲出骨髓,离心5mins,用5ml含10%胎牛血清的低糖DMEM培养液重悬细胞。加入等体积密度为1.073g/L percoll分离液离心30mins。取中层云雾状细胞。37℃、5%CO2培养箱中贴壁培养。取5-10代细胞培养至对数生长期后,洗涤离心。取100μl细胞悬液分别加入相应抗体,避光孵育30mins,洗涤离心。流式细胞仪检测,CELLQUEST软件收集数据。结果骨髓间充质干细胞是一类纺锤形或梭形细胞,与纤维细胞类似,顺向呈"鱼群样"排列。CD45、CD34、CD31呈阴性表达,表达率分别为0.82%,0.27%,0.97%;CD44、CD90、CD71呈阳性表达,表达率分别为99.8%,99.7%,99.36%。不同代数细胞表面分子的表达情况无明显差异(P>0.05)。结论贴壁培养法能够在质和量上满足骨髓间充质干细胞的体外培养条件。
- 银广悦陈素萍丁俊丽张继领刘继勇张龙张明
- 关键词：贴壁法骨髓间充质干细胞体外培养
- 双硫腙法测定尿中锌
- 刘汉方周淑敏徐列兵屈尔月张明刘金霞曹长春
- 任务来源：2007年由廊坊市科学技术局立项，项目编号：2007050255应用领域：卫生领域、临床检验技术原理：在PH9.5～10.0范围内，尿锌与双硫腙反应呈色，四氯化碳提取后在530nm处比色测定，使用抗坏血酸掩蔽铜...
- 关键词：
- 人骨髓间充质干细胞体外诱导分化为心肌样细胞及鉴定被引量：3
- 2012年
- 目的探讨5-氮胞苷作为诱导剂体外诱导人骨髓间充质干细胞(human mesenchymal stem cells,hMSCs)分化为心肌样细胞,并对其进行鉴定。方法采用密度梯度离心法与贴壁培养法相结合分离培养hMSCs,以5-氮胞苷诱导第3代hMSCs,24h后继续培养,观察细胞形态学的变化;培养4周,采用免疫细胞化学法对分化的心肌样细胞特异性蛋白结蛋白、心肌肌钙蛋白I进行鉴定。结果培养7d后hMSCs贴壁呈集落生长,有成纤维细胞样外观;5-氮胞苷诱导7d后细胞呈梭形,排列方向渐趋一致,有肌管样结构形成,免疫细胞化学法检测人心肌特异性蛋白结蛋白、心肌肌钙蛋白I表达阳性,而未经诱导的相同培养时间的hMSCs中均未见表达。结论 hMSCs体外在5-氮胞苷诱导下可定向分化为心肌样细胞。
- 银广悦张继领陈素萍张龙张明
- 关键词：人骨髓间充质干细胞心肌样细胞5-氮胞苷分化
- 5-氮胞苷与HGF因子体外联合诱导人骨髓间充质干细胞诱导分化为心肌样细胞实验探讨
- 2012年
- 目的探讨5-氮胞苷(5-Aza)与肝细胞生长因子(HGF)作为诱导剂,对人骨髓间充质干细胞(hMSCs)分化为心肌样细胞的影响。方法采用密度梯度培养法与贴壁培养法相结合分离培养hMSCs,取第3代hMSCs随机分为3组,分别为HGF因子诱导分化组、5-Aza诱导分化组、HGF因子与5-Aza联合诱导分化组,诱导后培养4周,采用免疫细胞化学法对分化的心肌样细胞进行鉴定。结果结果表明hMSCs贴壁呈集落生长,有成纤维细胞样外观。各组诱导后细胞均呈梭形,排列方向渐趋一致,有肌管样结构形成。免疫细胞化学法检测心肌特异性蛋白结蛋白(Desmin)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)表达阳性,未经诱导的同培养天数的hMSCs中均未见表达。HGF不能诱导hMSCs向心肌细胞转化,但HGF因子与5-Aza联合诱导分化组心肌样细胞分化率明显高于其他两组。结论 hMSCs体外在HGF诱导下可定向分化为心肌样细胞,5-Aza与HGF体外联合应用可以提高hMSCs的诱导分化效率。
- 银广悦陈素萍王文红张继领张龙张明
- 关键词：人骨髓间充质干细胞心肌样细胞5-氮胞苷肝细胞生长因子分化
- 医院检验科临床凝血试验结果的质量评价
- 2018年
- 目的:探究医院检验科临床凝血试验室凝血试验监测结果的水平,以质量评价提出提高医院检验科临床凝血试验检测水平的措施。方法:以临床检验中心的要求为主,回顾性分析我院检验科临床凝血试验室在2017年1月~2018年8月期间来我院做血凝试验的176例患者试验结果及病程记录,以检测正确率、活化部分凝血活酶时间(APTT),凝血酶原时间(PT)、纤维蛋白原(FIB)、精密度、稳定性评价为主,根据质量评价指标对影响血凝试验结果的因素以及检测质量进行统计学分析。结果:根据检测结果显示,我院检验科临床凝血试验结果质量评价总正确率为96.59%,其中PT正确率为94.88%,APTT检测正确率为96.02%,FIB检测正确率为97.72%,PT-国际标准化比值为96.67%。影响医院检验科临床凝血试验结果质量评价因素,主要是由于人为操作失误、材料监管不足以及患者自身服药的影响。结论:血凝试验作为医学检验常用的手段,提高其检验结果准确性以及精确度具有重要意义,受到环境因素、人为因素以及患者自身因素等影响,应该加强对临床凝血试验材料的监管提高检测规范性及科学性,详细记录患者临床服药种类及名称便于综合性分析,按照各项规程定期进行仪器校准、试剂优选以及实验室质量监控等,提高医院检验科临床凝血试验结果的质量评价。
- 安冠旭银广悦周志伟吴晓林张斌张明张柳
- 关键词：医院检验科
- 慢性心力衰竭患者血清生长分化因子-15、脑利钠肽水平与心功能状态的关系被引量：5
- 2012年
- 目的研究慢性心力衰竭(CHF)患者血清生长分化因子-15(GDF-15)、脑利钠肽(BNP)水平的变化及其与心脏功能的关系。方法以CHF患者48例作为研究对象,根据NYHA标准分级,心功能Ⅱ级13例,心功能Ⅲ级19例、心功能Ⅳ级16例。采用酶联免疫吸附试验(ELISA法)测定血清GDF-15水平、BNP水平。并以48例健康自愿者作为对照组进行比较研究。结果 CHF组血清GDF-15、BNP水平较对照组均显著增高(P<0.01),并且随着NYHA心功能分级的增高而逐渐升高。血清GDF-15水平、BNP水平均与LVEF呈负相关(r=-0.543,r=-0.576,P<0.001),而且GDF-15与BNP之间呈正相关(r=0.558,P<0.001)。结论在CHF患者中,GDF-15与BNP均可反映心衰的严重程度,其中GDF-15水平更为敏感;血清GDF-15与BNP不仅可以反映心脏功能状态,而且两者在CHF的病理生理过程中有一种相互影响的关系。
- 武德梅张龙陈超张明刘袁颖
- 关键词：慢性心力衰竭生长分化因子-15脑利钠肽
