张庆利
- 作品数:112 被引量:138H指数:8
- 供职机构:中国水产科学研究院黄海水产研究所更多>>
- 发文基金:中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家现代农业产业技术体系建设项目中国水产科学研究院基本科研业务费专项基金更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生生物学经济管理更多>>
- 对虾偷死野田村病毒荧光定量RT-PCR检测方法
- 本发明涉及一种对虾偷死野田村病毒(CMNV)荧光定量逆转录PCR(RT-PCR)检测方法。本发明的方法是:针对CMNV的RNA依赖的RNA聚合酶基因保守基因片段设计引物和Taqman探针,制备RNA样品,按照预设的反应条...
- 张庆利黄倢李小平刘爽邱亮
- 文献传递
- 一种反转录多重套式PCR检测引物
- 本发明属于基因型检测技术领域,公开了一种反转录多重套式PCR检测引物,引物包括两条外引物和三条内引物,外引物扩增YHV‑1和YHV‑8的目的基因,产生目的条带;三条内引物搭配分别特异性的扩增YHV‑1和YHV‑8,产生两...
- 邱亮黄倢郭晓萌张庆利万晓媛杨冰王秀华
- 检测多种对虾病原的基因芯片及其检测方法
- 本发明涉及一种检测多种对虾病原的基因芯片及其检测方法。基因芯片的构建是将质控系统的探针和18种对虾病原的探针点在同一固相载体尼龙膜上制成。18种对虾病原的探针包括:用于检测15种病毒的探针,用于检测镰刀菌、杀鱼丝囊霉菌、...
- 黄倢荆晓艳杨冰张庆利闫丽王秀华张宝存宋晓玲史成银刘莉
- 文献传递
- 血卵涡鞭虫的检测引物组和探针及其应用
- 本发明属于微生物检测技术领域,具体涉及血卵涡鞭虫的检测引物组和探针及其应用。本发明以血卵涡鞭虫ITS 1(first internal transcribed spacer 1)为靶基因设计出特异性引物组及探针,建立Ta...
- 谢国驷黄倢毕竞男朱梦婷杨柳鑫万晓媛王海亮李晨史成银张庆利
- 凡纳滨对虾急性肝胰腺坏死病(AHPND)病原分离鉴定及其致病性分析被引量:24
- 2018年
- 本研究从患急性肝胰腺坏死病(Acute hepatopancreatic necrosis disease,AHPND)的凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)肝胰腺中分离到一株优势菌,编号为20160303005-1,通过16S rRNA和分子伴侣蛋白groEL基因序列分析,并结合生理生化特征,将该细菌鉴定为副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus),其血清型为O1:KUT(K untypeable)。基因分析结果显示,该菌株携带可引起对虾AHPND的相关毒力蛋白基因pirA^(VP)和pirB^(VP),但不携带副溶血弧菌临床菌株毒力基因:耐热直接溶血毒素(Thenmostable direct hemolysin,tdh)和相对耐热直接溶血毒素(TDH-related hemolysin,trh)基因。菌株对凡纳滨对虾具有较强的致病性,浸泡感染的半数致死剂量(LD_(50))为7.96×10~3 CFU/ml。对虾急性感染后,6 h肝胰腺颜色变浅,肠胃变空;9 h肝胰腺呈浅白色,萎缩变小。9 h死亡数过半,24 h全部死亡。组织病理学分析显示,感染后对虾肝胰腺小管崩塌,上皮细胞严重脱落,呈现出典型的AHPND病理症状。药敏实验结果显示,该菌对庆大霉素、环丙沙星和头孢他啶等16种药物敏感,对阿莫西林、替卡西林和头孢噻吩等5种药物表现为耐药。上述研究可为该病原的流行病学及药物防控研究提供基本数据。
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- 关键词:凡纳滨对虾副溶血弧菌细菌鉴定
- 迟缓爱德华氏菌基因工程弱毒株及其应用
- 本发明提供野生迟缓爱德华氏菌的4株基因缺失突变株及其衍生菌株,分别为EvpC基因丧失功能的E.tarda<Sup>ΔEvpC</Sup>菌株及其衍生菌株,包括有EsrB基因丧失功能的E.tarda<Sup>ΔEvpCΔE...
- 黄倢谢国驷莫照兰王秀华许华张庆利隋虎辰杨春志李晨
- 一种肝胰腺细小病毒与核衣壳蛋白亲和筛选方法及其应用
- 本发明提供一种肝胰腺细小病毒与核衣壳蛋白亲和筛选方法及其应用,属于核酸与病毒核衣壳蛋白互作技术领域。本发明通过指数富集的配基系统进化技术(SELEX)成功筛选到与HPV核衣壳蛋白亲和的核酸片段。该技术方法为蛋白与核酸免疫...
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- 一种评价臭氧破坏鱼类神经坏死病毒核酸链效果的方法
- 本发明提供一种评价臭氧破坏鱼类神经坏死病毒核酸链效果的方法,即在鱼类神经坏死病毒核酸链3′末端设计反转录引物P,在5′末端设计PCR引物对F/R。臭氧处理鱼类神经坏死病毒后,病毒核酸链3′端断裂则不能启动反转录,5′端或...
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- 大菱鲆红体病虹彩病毒环介导等温扩增检测方法
- 本发明公开一种大菱鲆红体病虹彩病毒环介导等温扩增(LAMP)检测方法。该方法包括两对用于检测大菱鲆红体病虹彩病毒的环介导等温扩增引物FIP、BIP、F3与B3,和一种利用上述两对引物检测大菱鲆红体病病毒虹彩病毒的LAMP...
- 张庆利黄倢史成银宋晓玲杨冰
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- 虾肝肠胞虫(EHP)现场快速高灵敏度检测试剂盒的性能评价研究被引量:4
- 2022年
- 近年来,虾肝肠胞虫(Enterocytozoon hepatopenaei,EHP)流行使我国养殖对虾遭受严重经济损失,现场快速检测是EHP防控的重要技术保证。本研究对本实验室研发的EHP现场快速检测试剂盒的分析特异性(ASp)、分析灵敏度(ASe)、诊断特异性(DSp)、诊断灵敏度(DSe)、重复性和稳定性6项性能参数开展了系统评估。ASp测试显示,该试剂盒与对虾白斑综合征病毒(WSSV)、偷死野田村病毒(CMNV)、虾血细胞虹彩病毒(SHIV)、致急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌(VpAHPND)、传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)等5种对虾常见病原及健康对虾无交叉反应;ASe测试显示,该试剂盒检测下限为101 copies/反应;以EHP TaqMan RT-qPCR方法为标准,比较了试剂盒对298份临床样品的测试结果,试剂盒的DSp为99.2%、DSe为91.7%;试剂盒对EHP阴性样品及强阳性样品的检测重复率为100%,弱阳性样品检测重复率为95.8%;试剂盒在–20℃和–40℃条件下分别可保存7个月和12个月以上。本研究表明,本实验室研制的EHP现场快速检测试剂盒具操作简便、快速、灵敏度高、特异性强、重复性好和稳定性强等优点,可满足对虾养殖现场对EHP的高灵敏度检测。
- 李英瑕徐婷婷刘爽万晓媛张庆利
- 关键词:环介导等温扩增试剂盒