季丽莉
- 作品数:26 被引量:85H指数:5
- 供职机构:中国医科大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金辽宁省自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- PRE-084上调BDNF-TrkB改善PTSD大鼠焦虑样行为被引量:5
- 2017年
- 目的探讨腹腔注射Sigma 1受体激动剂PRE-084对创伤后应激障碍(PTSD)大鼠焦虑样行为及额叶BDNF和TrkB表达的影响。方法利用单程长时应激(SPS)制备PTSD大鼠模型,将PTSD大鼠分为4组:vehicle、PRE-084、SPS+vehicle和SPS+PRE-084组;通过旷场实验和高架十字迷宫实验检测各组大鼠焦虑样行为;取材各组大鼠额叶,利用免疫荧光染色和Western Blot检测BDNF和p-TrkB蛋白及m RNA表达情况。结果行为学检测结果显示,腹腔注射PRE-084可以改善PTSD大鼠焦虑样行为;免疫荧光染色和Western Blot结果显示,SPS使大鼠额叶BDNF及p-TrkB蛋白表达水平降低,此作用可被PRE-084逆转。结论腹腔注射Sigma-1受体激动剂PRE-084改善PTSD大鼠焦虑样行为可能与上调BDNF-TrkB信号通路相关。
- 佟雷季丽莉彭军波富长海王振宇
- 关键词:创伤后应激障碍BDNFTRKB
- 碱性成纤维生长因子和神经生长因子联合应用培养成年大鼠海马神经干细胞向神经元样细胞的分化被引量:9
- 2011年
- 背景:影响神经干细胞向神经元分化的因素很多,各种营养因子可以不同程度地刺激神经干细胞向神经元分化,如何使神经干细胞大量分化为神经元是研究的热点问题。目的:观察联合应用碱性成纤维生长因子和神经生长因子对成年大鼠海马神经干细胞为神经元的影响。方法:无菌条件下分离大鼠脑海马组织,传至第4代克隆球直径约为200μm时,滴加DMEM/F12+2%B27+20μg/L表皮生长因子+20μg/L碱性成纤维细胞生长因子,进行单细胞克隆培养,传代的神经干细胞分成空白对照组、碱性成纤维细胞生长因子组、神经生长因子组、碱性成纤维细胞生长因子+神经生长因子组。观察传代后的克隆球进行神经干细胞免疫细胞化学染色鉴定,计数神经元特异性烯醇化酶阳性细胞率,检测神经干细胞向神经元的分化情况。结果与结论:①单细胞克隆培养后,克隆球细胞表达巢蛋白,诱导分化后神经元特异性烯醇化酶、胶质纤维酸性蛋白均呈阳性表达。②与空白对照组神经干细胞分化为神经元的比例比较,碱性成纤维细胞生长因子组、神经生长因子组、碱性成纤维细胞生长因子组+神经生长因子组均明显提高(P<0.05),且碱性成纤维细胞生长因子组+神经生长因子组神经元的比例最高(P<0.05)。提示,碱性成纤维细胞生长因子可以提高神经生长因子诱和神经生长因子均可促进神经干细胞向神经元分化,且二者联合应用效果更佳。
- 佟雷季丽莉解大龙高海佟晓杰
- 关键词:神经干细胞神经元碱性成纤维细胞生长因子神经生长因子
- EGF培养条件下NGF与BDNF对大鼠海马神经干细胞向神经元分化的差异被引量:3
- 2008年
- 目的探讨在表皮生长因子(EGF)培养条件下,相同浓度神经生长因子(NGF)与脑源性神经生长因子(BDNF)对成年大鼠海马神经干细胞向神经元分化比例的差异。方法用含碱性成纤维生长因子(bFGF)、EGF、B27的无血清细胞培养技术体外培养成年大鼠海马神经干细胞,单细胞克隆后行Nestin免疫细胞化学染色,诱导分化1周,行GFAP和NSE免疫细胞化学染色;根据培养液中所加营养因子的不同将单细胞克隆传代细胞分为5组培养:EGF组、NGF组、BDNF组、EGF+NGF组、EGF+BDNF组,此5组细胞培养1周,进行NSE免疫细胞化学染色,计数阳性细胞比例后进行统计学分析。结果:单细胞克隆培养后克隆球细胞表达Nestin,诱导分化1周,细胞表达NSE、GFAP;与EGF组、NGF组、BDNF组相比,EGF+NGF组和EGF+BDNF组细胞分化为神经元的比例较高(P<0.05),其中EGF+BDNF组细胞的比例最高。结论在EGF培养条件下,BDNF促进成年大鼠海马神经干细胞向神经元分化的能力高于NGF。
- 王振宇佟雷季丽莉唐源远赵久红
- 关键词:神经干细胞神经生长因子脑源性神经生长因子
- 细胞外调节蛋白激酶信号通路在体外诱导神经干细胞向施万细胞分化中的作用
- 2011年
- 目的:探讨细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号转导通路在体外诱导大鼠海马神经干细胞向施万细胞分化中的作用。方法:体外培养大鼠海马神经干细胞,向培养液中添加混和诱导剂诱导神经干细胞向施万细胞分化。将培养细胞分为2组,对照组采用含诱导剂的培养液进行培养,免疫印迹法检测ERK磷酸化水平,实验组中在此基础上添加ERK通路抑制剂U0126,免疫荧光双标染色计数胶质细胞特异性标记物S100及P75阳性细胞比例。结果:加入诱导剂后,磷酸化ERKl/2水平上升;3周后,可见P75、S100阳性的施万细胞。加入通路抑制剂后,实验组的ERK磷酸化水平逐渐降低。与对照组相比,实验组的施万细胞所占百分比明显减少。结论:ERK通路在神经干细胞向施万细胞的诱导分化中起重要作用。
- 佟雷王振宇季丽莉佟晓杰方秀斌
- 关键词:神经干细胞施万细胞分化
- 星形胶质细胞条件培养液促进新生大鼠海马神经干细胞分化被引量:4
- 2009年
- 目的探讨星形胶质细胞条件培养液(ACM)对神经干细胞(NSCs)体外分化的影响。方法行新生大鼠大脑皮质星形胶质细胞的纯化培养后收集ACM,将新生大鼠海马NSCs单克隆培养后行nestin免疫细胞荧光染色,诱导分化5d后行神经元特异性烯醇化酶(NSE)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、半乳糖脑苷脂(GALC)免疫细胞荧光染色;将单克隆培养的NSCs分为对照组和实验组,对照组为单纯NSCs培养液,实验组根据NSCs培养液与ACM比的不同分3组:A组(2:1),B组(1:1),C组(1:2)。各组培养1周,采用NSE免疫细胞荧光检测方法标记神经元并计数和统计学分析。结果纯化的星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白抗体标记阳性率为96.5%;单克隆培养的海马NSCs呈nestin阳性,诱导后呈NSE、GFAP和GALC阳性表达。ACM培养的海马NSCs各组分化为神经元的比例明显高于对照组(<0.01),其中A组的比例最高。结论ACM可以促进新生大鼠海马NSCs向神经元分化。
- 王立芹赵久红唐源远季丽莉王振宇
- 关键词:星形胶质细胞条件培养液神经干细胞海马新生大鼠
- EGF对BDNF诱导成年大鼠海马结构神经干细胞向神经元分化的影响
- 目的:
探讨表皮生长因子(EGF)对脑源性神经生长因子(BDNF)促进成年大鼠海马结构神经干细胞(NSCs)向神经元分化的影响及EGF浓度为20ng/mL时,BDNF促进成年大鼠海马结构神经干细胞向神经元分化的...
- 季丽莉
- 关键词:海马神经干细胞神经元分化成纤维细胞生长因子免疫细胞化学染色
- 文献传递
- 脑源性神经生长因子促进成年大鼠脑海马神经干细胞定向分化的浓度选择被引量:8
- 2007年
- 目的:探讨培养基中表皮生长因子与血清两者浓度一定的条件下,不同浓度的脑源性神经生长因子对成年大鼠脑海马神经干细胞向神经元分化的影响。方法:实验于2007-08在中国医科大学神经解剖研究室完成。①材料:清洁级雄性成年SD大鼠1只,由中国医科大学实验动物部提供,实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准。实验过程中应用的表皮生长因子、脑源性神经生长因子均由R&D公司提供。②实验方法:无菌条件下分离大鼠脑海马组织,剪碎后胰蛋白酶消化,过滤、离心、弃上清,加入含2%B27、20μg/L表皮生长因子、20μg/L碱性成纤维生长因子的DMEM/F12无血清条件培养基体外培养神经干细胞,传至第4代时利用有限稀释法进行单克隆培养,100倍镜下克隆球直径约为200μm时制备单细胞悬液,稀释后滴加于96孔板内,设立两组,全量新鲜培养基组加入刚配置未使用过的DMEM/F12无血清培养基100μL,半量条件培养基组加入上述曾用于神经干细胞培养且含有其代谢产物的1/2DMEM/F12无血清培养基100μL。③实验评估:观察神经干细胞的单克隆培养增殖情况。对克隆球行巢蛋白、神经元特异性烯醇化酶、胶质原纤维酸性蛋白免疫细胞化学染色。按培养基中脑源性神经生长因子终浓度的不同将所培养细胞设立0,50,100,150,200μg/L组,各组均加入20μg/L表皮生长因子和体积分数为0.1的胎牛血清,1周后行神经元特异性烯醇化酶免疫细胞化学染色,检测神经干细胞向神经元分化情况。结果:①神经干细胞单克隆培养结果:单克隆培养开始时神经干细胞增殖缓慢,半量条件培养基组细胞增殖速度快于全量新鲜培养基组,随着细胞数的增多,两组细胞增殖速度也相应加快,分别在培养后第12天、第15天形成直径为200μm的克隆球。②神经干细胞免疫细胞化学染色结果:单克隆培养后克隆球表达巢蛋白,诱导�
- 季丽莉佟雷唐源远赵久红王振宇
- 关键词:神经干细胞大鼠海马脑源性神经生长因子分化
- PRE-084对PS1/APP小鼠学习记忆及内嗅皮层BDNF和Trkb表达的影响被引量:1
- 2017年
- 目的探讨sigma-1受体激动剂PRE-084对PS1/APP小鼠内嗅皮层BDNF、TrkB及学习记忆功能的影响。方法将21只6月龄的PS1/APP小鼠随机平分为3组,分别为生理盐水组、PRE-084组、PRE-084和simga-1受体拮抗剂BD1047组,正常C57/BL6J鼠注射生理盐水作为空白对照组,共4组;利用Morris水迷宫测试学习记忆功能,免疫组化、Westernblot检测BDNF和TrkB在内嗅皮层的表达情况。结果PRE-084明显改善PS1/APP小鼠的学习记忆功能,上调了内嗅皮层内BDNF和TrkB表达水平,而sigma-1受体拮抗剂BD1047能够逆转PRE-084的作用。结论PRE-084通过sigma-1受体改善PS1/APP小鼠学习记忆功能可能与上调内嗅皮层BDNF和TrkB水平相关。
- 周儒奎季丽莉曹栋王泓杰赵方方王振宇
- 关键词:内嗅皮层BDNFTRKB
- 糖皮质激素注射建立小鼠行为抑郁症模型被引量:4
- 2012年
- 目的研究糖皮质激素注射小鼠抑郁症样情感行为变化。方法C57/B6雄性小鼠18只随机分为3组,模型组以20 mg/kg剂量每日1次注射皮质酮,持续21 d,另有生理盐水对照组每日注射等剂量生理盐水21 d,空白对照组不做任何处置,观察小鼠体重变化,用敞箱实验及糖水消耗试验测定动物行为。结果抑郁模型组小鼠代表焦虑行为的敞箱试验得分明显降低、反应快感行为的奖赏糖水消耗百分比明显降低。结论糖皮质激素持续注射法可用于制作行为小鼠抑郁模型,以及探究抑郁症行为变化发病机制以及寻找更适合治疗抑郁症的药物。
- 彭军波季丽莉金雪花王振宇
- 关键词:抑郁症糖皮质激素情感行为小鼠
- 脑源性神经营养因子促进低血糖幼鼠海马神经干细胞的定向分化被引量:3
- 2012年
- 背景:有研究表明脑源性神经营养因子可以维持神经元的存活、影响神经元的迁移,在体外可以促进神经干细胞的存活和分化。目的:探讨脑源性神经营养因子对低血糖幼鼠海马神经干细胞定向分化的作用。方法:取新生1d低血糖模型大鼠脑海马组织进行原代、传代及单细胞克隆培养。培养的细胞一部分进行神经干细胞鉴定,另一部分依据培养液中脑源性神经营养因子质量浓度的不同将单克隆细胞分为0,100,200μg/L组,取第4代细胞进行诱导分化,行神经元特异性烯醇化酶免疫荧光染色,计数阳性细胞比例。结果与结论:单克隆培养后3组细胞均呈巢蛋白阳性,诱导分化后细胞呈行神经元特异性烯醇化酶和胶质纤维酸性蛋白阳性;100,200μg/L组神经干细胞生长较快,且分化为神经元特异性烯醇化酶阳性细胞比例较高(P<0.05),但两组神经干细胞之间差异无显著性意义(P>0.05)。提示脑源性神经营养因子促进低血糖幼鼠海马神经干细胞向神经元定向分化。
- 唐源远李振宇尹延彦季丽莉王振宇
- 关键词:脑源性神经营养因子神经干细胞分化低血糖幼鼠海马