孙慧伟
- 作品数：7 被引量：11H指数：2
- 供职机构：中国人民解放军总医院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 工程化人胃癌裸鼠原位模型的建立及其活体荧光成像观察被引量：5
- 2012年
- 目的建立工程化人胃癌裸鼠原位模型,并利用活体荧光成像技术进行观察。方法以胶原为支架材料,表达绿色荧光的人胃癌BGC823-EGFP细胞为种子细胞,建立人胃癌体外模型;倒置显微镜观察肿瘤细胞生长状态;通过注射将体外模型移植到裸鼠体内;活体荧光成像评估胃癌原位模型的建立;解剖观察原位肿瘤的移植成功率,生长及转移情况;冰冻切片及HE染色进行组织学观察。结果工程化人胃癌体外模型中肿瘤细胞呈立体生长;原位肿瘤成瘤率100%,可见腹腔重要脏器转移;组织学特征呈典型低分化腺癌;活体荧光观察可见原位肿瘤形成,但效果不理想。结论建立了工程化人胃癌裸鼠原位模型;绿色荧光成像效果较差,活体荧光成像观察应选用穿透力较强的荧光。
- 孙培鸣金润森杜晓辉徐迎新孙慧伟李荣
- 关键词：疾病模型原位移植裸鼠绿色荧光蛋白
- 小鼠肝癌H22细胞中不同干性亚群的分选与鉴定
- 2012年
- 目的利用干细胞中乙醛脱氢酶(ALDH)高表达的特性分选并鉴定肿瘤细胞中存在的ALDHhigh、ALDHlow及ALDHneg细胞亚群。方法以流式细胞术检测小鼠肝癌H22、人胃癌BGC-823、结肠癌LS-174T、肝癌SMMC-7721细胞及胰腺癌SW-1990和Panc-1细胞系中ALDH+细胞的表达;在确定ALDH阳性表达的细胞中,以ALDH表达的高低差异,将细胞分选并定义为ALDHhigh、ALDHlow、ALDHneg细胞亚群;对分选出的3种细胞亚群进行CD133/CD44表型及细胞周期分析。结果 (1)在小鼠肝癌H22细胞、人结肠癌LS-174T细胞、胰腺癌SW-1990细胞和Panc-1细胞中存在着ALDH阳性表达,而在人胃癌BGC-823细胞和肝癌SMMC-7721细胞中未见ALDH表达;(2)在小鼠肝癌H22细胞中能明确分选出存在荧光差异的3群细胞即ALDHhigh、ALDHlow和ALDHneg细胞亚群;(3)H22的ALDHhigh、ALDHlow、ALDHneg3个亚群中CD133/CD44表达存在差异,其表达比例依次减少;(4)H22细胞中ALDHhigh亚群主要处于G0/G1期,ALDHlow亚群处于S期,而ALDHneg亚群处于G2/M期。结论在肿瘤细胞中存在着介乎于肿瘤干细胞与终末肿瘤细胞之间的特异性亚群,该亚群为肿瘤治疗提供了新的方向。
- 丁毅梁文涛胡鑫梁凯孙慧伟徐迎新
- 关键词：乙醛脱氢酶肿瘤干细胞流式细胞术细胞表型
- 工程化肝组织肝表面片状植入新方法被引量：3
- 2012年
- 目的探索较大尺度工程化肝组织原位肝表面贴覆片状植入、尽快建立血供的可行性。方法将采用胰酶冷消化法分离的新生大鼠肝细胞（1×10^10个／L）、肺组织块贴壁法分离的大鼠微血管内皮细胞（1×10^10个／L），与片状胶原支架、血管内皮生长因子（VEGF，10g／L）复合构建肝细胞／内皮细胞／血管生长因子／胶原支架复合的片状工程化肝组织。将其在15只大鼠肝表面贴覆植入，4周后取样进行大体观察及组织切片苏木素-伊红（HE）染色。结果分离的肝细胞及内皮细胞活率均为90％以上。片状工程化肝组织经肝表面贴覆法植入后，大体观察可见能与原位肝脏紧密贴合生长，形成体积大于1cm3的类肝样组织。体内植入后4周，植入物与肝脏贴合紧密，融合生长。组织学观察显示移植物中肝细胞均匀分布，未见细胞变性及死亡，有血管生成。结论肝表面贴覆植入法简便安全，可构建较大尺寸的工程化肝组织，有望达到原位修复受损肝脏的目的。
- 刘巨超周海洋孙慧伟丁毅徐迎新
- 关键词：肝组织工程血管内皮细胞
- 脾蒂血管束法构建工程化肝组织被引量：1
- 2012年
- 目的通过在脾蒂血管束内注射工程化肝组织凝胶，探讨一种体内植入较大尺度组织工程化肝脏的新方法。方法2×10^7新生大鼠肝细胞与1ml生物蛋白胶混合构建工程化肝组织凝胶。切除sD大鼠的脾脏，并远端结扎、近端套圈后形成血管束。将凝胶注入血管束内，形成体积≥1cm。的球形组织；同法构建肝组织凝胶植入大腿皮下作为对照。术后2周行大体观察，组织切片苏木素．伊红（HE）染色。结果皮下组残留组织块较小，直径（1．63±0．55）mm，其内血管组织少。实验组形成了较大的组织块，直径（7．33±2．40）mm，内有大量血管形成。结论在脾蒂血管束内构建工程化肝组织可以形成血管化的较大尺度类肝组织。
- 周海洋刘巨超孙慧伟丁毅赵云山徐迎新
- 关键词：血管化
- 术前Glasgow预后分数与直肠癌肝转移和预后的关系探讨
- 2013年
- 目的探讨术前Glasgow预后分数(Glasgow prognostic score,GPS)与直肠癌肝转移和预后的关系。方法回顾性分析中国人民解放军总医院普通外科2005年6月至2011年12月期间收治并行手术治疗的223例直肠癌患者的临床资料,分析术前GPS得分与直肠癌肝转移和预后的关系。结果直肠癌术前GPS得分与肿瘤的浸润深度(P<0.001)、脉管浸润(P<0.001)、肝转移(P<0.001)、TNM分期(P<0.001)、癌胚抗原水平(P=0.009)、CA19-9水平(P<0.001)及CA724水平(P<0.001)均有关。肿瘤分化程度(低分化:OR=10.688)、脉管浸润(OR=4.918)、淋巴结转移(OR=3.359)及术前GPS得分(2分:OR=15.907)是直肠癌肝转移的影响因素;年龄(RR=2.121)、分化程度(低分化:RR=2.846)、浸润深度(RR=1.754)、TNM分期(Ⅱ期:RR=7.447,Ⅲ期:RR=9.030,Ⅳ期:RR=13.325)及术前GPS得分(2分:RR=2.471)是直肠癌预后的独立危险因素。术前GPS得分与直肠癌肝转移和预后均有关。结论术前GPS得分与直肠癌肝转移相关,且其可作为直肠癌预后评估的参考指标。
- 肖春红薛虎臣刘海亮孙培鸣孙慧伟宁宁杜晓辉
- 关键词：格拉斯哥预后评分直肠癌肝转移预后
- 筛选适宜于构建工程化肝组织的凝胶材料支架被引量：1
- 2012年
- 目的使用不同可注射性凝胶支架体外进行新生大鼠肝细胞立体培养,为后期体内植入筛选相容性较好的支架材料。方法使用胰酶冷消化法分离新生大鼠肝细胞。将肝细胞分别与纤维蛋白胶、壳聚糖凝胶、鼠尾胶原、透明质酸钠支架材料复合,形成工程化肝组织凝胶,接种于培养板中,并通过定期光镜来观察大鼠肝细胞,四唑盐(MTT)比色法评价细胞活性。溴甲酚绿法测上清白蛋白含量,脲酶比色法测定上清尿素含量。结果四组均可形成三维生长的工程化类肝样组织。培养第4天,生物蛋白胶及壳聚糖组的培养上清液中尿素含量达到高峰,分别为培养第1天的1.31倍和1.28倍,随后含量缓慢下降。培养第7天,新生大鼠肝细胞在纤维蛋白凝胶及壳聚糖凝胶中密集生长,同时MTT显示细胞活性及白蛋白分泌达到高峰,OD值分别为培养初期的1.11倍和1.17倍,上清白蛋白含量分别是初期的1.13倍和1.15倍。而在透明质酸钠及鼠尾胶原凝胶中则细胞生长缓慢,白蛋白及尿素含量持续下降。结论 4种可注射性支架中,壳聚糖和生物蛋白胶对于新生大鼠肝细胞生物相容性较好,透明质酸和鼠尾胶原较差,前两者更适合用于工程化肝组织的构建。
- 周海洋刘巨超孙慧伟赵云山丁毅徐迎新
- 关键词：纤维蛋白凝胶
- 小鼠肝癌H22细胞不同乙醛脱氢酶表达亚群的致瘤性分析被引量：1
- 2012年
- 【目的】利用干细胞中乙醛脱氢酶(aldehyde dehydrogenase,ALDH)高表达的特性,分选小鼠肝癌H22细胞中ALDH表达不同的亚群,分析细胞球体形成与致瘤性,为针对肿瘤干/祖细胞的肿瘤靶向治疗奠定基础。【方法】流式细胞术分选小鼠肝癌H22细胞的ALDH阳性、弱阳性和阴性细胞亚群;将分选出的各亚群细胞,在干细胞培养基中培养,观察球体形成;将各亚群细胞分别以不同数量级在小鼠背部皮下注射致瘤,观察成瘤情况,绘制生长曲线。【结果】(1)小鼠H22细胞可分选出ALDHhigh,ALDHlow,ALDHneg3个亚群细胞。(2)ALDHhigh亚群细胞可形成细胞球体,ALDHlow和ALDHneg亚群细胞不能形成球体。(3)ALDHlow亚群在接种2×102个细胞和2×104个细胞时,肿瘤的生长趋势和平均体积均高于其它2个亚群。【结论】H22细胞中ALDHhigh亚群ALDH表达阳性且可以形成球体,符合干细胞特征;ALDHlow亚群呈ALDH弱表达,体外培养不能形成球体,但致瘤性高于ALDHhigh和ALDHneg亚群细胞,是出现分化并进入快速增殖状态的亚群,可能是在肿瘤生长与复发中具有重要意义的肿瘤祖细胞,应成为肿瘤治疗的重要标靶。
- 丁毅梁文涛胡鑫梁凯孙慧伟徐迎新
- 关键词：乙醛脱氢酶肿瘤干细胞动物实验
