孔繁芳
- 作品数：15 被引量：18H指数：3
- 供职机构：河北农业大学植物保护学院更多>>
- 发文基金：河北省自然科学基金国家自然科学基金公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 嗜线虫致病杆菌HB310菌株对东亚飞蝗的生物活性被引量：4
- 2013年
- 通过生物测定比较了9种昆虫病原线虫共生菌对东亚飞蝗Locusta migratoria manilensis4龄蝗蝻的杀虫活性,其中嗜线虫致病杆菌Xenorhabdus nematophila HB310菌株(以下简称Xn HB310)对4龄蝗蝻的活性最高;采用浸叶法进一步测定了Xn HB310菌液对不同虫态的东亚飞蝗的毒力。结果表明:在饲喂96 h后,Xn HB310菌液对2龄蝗蝻、4龄蝗蝻和成虫的致死中浓度(LC50)分别为2.97×105、4.90×105和6.24×105CFU/mL,致死中时间(LT50)分别为51.48、52.59和64.34 h。研究还发现该菌株对东亚飞蝗具有明显的拒食活性,处理48 h后Xn HB310菌液对2龄蝗蝻、4龄蝗蝻和成虫的拒食中浓度(AFC50)分别为1.15×105、2.36×105和3.16×105CFU/mL。通过点滴或剪除东亚飞蝗成虫感觉器官的方法,证实了Xn HB310菌液对东亚飞蝗产生拒食作用的器官是下颚须和下唇须,剪除下颚须和下唇须及两者均剪除的拒食率分别为37.36%、51.28%和100%。研究结果表明,嗜线虫致病杆菌Xn HB310菌液对东亚飞蝗的杀虫速度快且活性高,具有开发为防治东亚飞蝗杀虫剂的潜力。
- 张园南宫自艳孔繁芳宋萍王勤英
- 关键词：东亚飞蝗杀虫活性拒食活性
- 嗜线虫致病杆菌血腔毒素Tp40的纯化和特性分析被引量：7
- 2008年
- 【目的】嗜线虫致病杆菌是一种昆虫病原线虫共生菌,它能够产生多种杀虫毒素。本研究旨在从嗜线虫致病杆菌Xenorhabdus nematophila HB310菌株的细胞内纯化新的杀虫蛋白毒素,并对其进行基因克隆和序列分析。【方法】应用盐析和制备型非变性凝胶电泳等方法纯化蛋白,再通过对5龄大蜡螟幼虫血腔注射进行活性筛选。对获得的目的蛋白与已知蛋白进行同源分析,克隆出该目的蛋白的基因序列,从而进行相应的基因和氨基酸序列分析。【结果】本研究纯化的Tp40蛋白对大蜡螟LD50为68.54ng/头,其SDS-PAGE电泳图谱只显示出一条分子量约为42kDa的多肽。Western印迹分析表明Tp40与已知的Txp40为同源蛋白,并且仅存在于细胞内。编码该蛋白的基因开放读码框全长1107bp(GenBank登录号:EU095326),编码368个氨基酸残基,预测分子量为41.5kDa,等电点为8.66,与GenBank中的其余13株昆虫病原线虫共生菌所包含的相似基因核苷酸序列及推导的氨基酸序列比较,同源性分别为85%～99%和70%～99%。【结论】Tp40蛋白具有很高的血腔杀虫活性,其基因序列具有较强的保守性,是昆虫病原线虫共生菌复合体杀虫过程中的一种关键因子。
- 杨君王勤英宋萍南宫自艳崔龙孔繁芳冯姗姗
- 关键词：嗜线虫致病杆菌大蜡螟基因克隆
- 嗜线虫致病杆菌对小菜蛾生物活性的研究
- 嗜线虫致病杆菌HB310菌株(Xenorhabdus nematophila HB310)属于肠杆菌科、革兰氏阴性菌,存在于昆虫病原线虫消化道前端的菌囊内.与小卷蛾斯氏线虫Steinernema carpocapsae ...
- 王勤英史翠红宋萍杨君冯姗姗孔繁芳
- 关键词：嗜线虫致病杆菌小菜蛾亚致死效应
- 文献传递
- 昆虫病原线虫共生菌及其应用
- 本发明公开了一种昆虫病原线虫共生菌及其应用。具体该昆虫病原线虫共生菌，为嗜线虫致病杆菌CGMCC №.3004。该菌株的发酵液、发酵液上清液、菌体或其发酵液上清液的乙酸乙酯萃取物具有对多种农业害虫的杀虫或杀卵作用。
- 王勤英孔繁芳宋萍南宫自艳曹克强
- 嗜线虫致病杆菌HB310培养基筛选和培养条件优化被引量：3
- 2014年
- 嗜线虫致病杆菌Xenorhabdus nematophila是与小卷蛾斯氏线虫Steinernema carpocapsae互惠共生的一种革兰氏阴性菌,对多种农业害虫都具有很高的杀虫活性。本研究对多种影响嗜线虫致病杆菌HB310菌株发酵培养的因素进行了筛选优化。通过单因素试验确定最佳碳源、氮源和无机盐分别为葡萄糖、牛肉蛋白胨和KH2PO4;通过正交实验确定培养基的最优组合为:葡萄糖2%、牛肉蛋白胨1%、牛肉浸膏0.3%和K2HPO41%;最佳摇瓶培养条件为:接种量6%、培养基p H 7.5、摇床转速200 rpm、培养温度28℃和培养时间48 h,在此条件下,嗜线虫致病杆菌HB310菌株生长速率最快,菌液的杀虫活性最高。
- 王永娟张杰孔繁芳南宫自艳宋萍王勤英
- 关键词：嗜线虫致病杆菌发酵优化正交试验小菜蛾
- 嗜线虫致病杆菌与七种杀虫剂混配的增效作用
- 嗜线虫致病杆菌Xenorhabdus nematophila HB310(Xn HB310)菌株是本试验室从河北省土壤中分离的小卷蛾斯氏线虫Steinernema carpocaposae HB310中分离到的共生菌。前...
- 李立涛文旭赵亚楠孔繁芳王勤英
- 关键词：嗜线虫致病杆菌杀虫剂氯氰菊酯混配
- 嗜线虫致病杆菌对Bt抗性种群小菜蛾的毒力以及与Bt协同增效作用
- 苏云金芽胞杆菌Bacillus thuringiensis,Bt是世界上应用最广泛、产量最大的微生物杀虫剂。但由于Bt制剂在田间大面积的单一使用,使得许多害虫已经对Bt产生了抗性。其中小菜蛾是田间发现的第一种对Bt产生抗...
- 杨云艳孔繁芳李立涛南宫自艳宋萍王勤英
- 关键词：小菜蛾毒力测定抗性种群
- 嗜线虫致病杆菌与七种杀虫剂混配的增效作用
- 嗜线虫致病杆菌Xenorhabdus nematophila HB310(Xn HB310)菌株是本试验室从河北省土壤中分离的小卷蛾斯氏线虫Steinernema carpocaposae HB310中分离到的共生菌。前...
- 李立涛文旭赵亚楠孔繁芳王勤英
- 关键词：嗜线虫致病杆菌杀虫剂氯氰菊酯混配
- 文献传递
- 嗜线虫致病杆菌杀虫毒素对棉铃虫幼虫几种酶活性的影响被引量：1
- 2007年
- 毒素Ⅱ是从嗜线虫致病杆菌HB310菌株分离得到的一种具有胃毒杀虫活性的复合蛋白毒素。本研究以该毒素口服饲喂棉铃虫4龄幼虫,检测了毒素Ⅱ对棉铃虫生长发育的影响,并通过生化分析研究其对棉铃虫幼虫体内几种酶活力的影响。结果表明:饲喂拌有毒素Ⅱ人工饲料的棉铃虫4龄幼虫-化蛹历期为6.65 d,比对照明显推迟2d,毒素Ⅱ对棉铃虫幼虫化蛹有明显的影响,毒素Ⅱ饲喂的幼虫化蛹率为62%,取食对照幼虫的化蛹率为98%,并且处理组蛹的平均体重也受到明显的抑制,比对照蛹的平均体重降低106.47 mg,两者差异显著;在饲毒12 h后棉铃虫幼虫中肠弱碱性类胰蛋白酶、强碱性类胰蛋白酶、类胰凝乳蛋白酶和总蛋白酶活性分别受到抑制,到36 h饲毒幼虫与对照几种蛋白酶活性差异达到最大,分别为对照幼虫酶活性的0.3708,0.1903,0.3282和0.2141倍;饲毒12 h后毒素Ⅱ开始诱导棉铃虫幼虫体内羧酸酯酶、酯酶活性和乙酰胆碱酯酶的活性,3种酶的活性均在36 h达到最高,分别为对照的15.66,9.49,6.38倍。
- 史翠红宋萍王勤英杨君崔龙孔繁芳
- 关键词：嗜线虫致病杆菌棉铃虫解毒酶乙酰胆碱酯酶
- 嗜线虫致病杆菌对棉铃虫的生物活性研究被引量：2
- 2007年
- 嗜线虫致病杆菌HB310(Xenorhabdus nematophila HB310)菌液中主要的杀虫活性物质是一种高分子量的复合蛋白-毒素Ⅱ。以该菌液和毒素Ⅱ分别饲喂棉铃虫Helicoverpa armigera幼虫,检测其对棉铃虫生长发育的影响,同时通过生化分析研究了该毒素对幼虫中肠内几种蛋白酶活力的影响。结果表明:菌液和毒素Ⅱ对棉铃虫幼虫的取食量和生长发育均有显著的影响,取食拌有菌液和毒素Ⅱ的人工饲料的棉铃虫食量明显减少,发育速度延缓,发育历期比对照明显推迟;尽管一直取食混合原菌液(6.5×108cells/mL)人工饲料的棉铃虫2龄幼虫前期死亡率很低,但是其生长发育几乎完全被抑制,该处理组所有幼虫均不能化蛹;原菌液对4龄幼虫的食量、发育历期、蛹重及化蛹率均有显著影响。菌液对棉铃虫幼虫的影响与菌液的浓度和幼虫的龄期成反比,稀释50倍的菌液对2龄和4龄幼虫的生长发育仍有一定影响;毒素Ⅱ(51.9μg/mL)对4龄棉铃虫的生长发育也有明显的抑制作用。短时间(2d)饲喂原菌液后更换正常饲料,仅延缓了棉铃虫幼虫的发育历期,而对其化蛹率、蛹重及羽化率均无明显影响。饲喂毒素Ⅱ的棉铃虫幼虫中肠主要蛋白酶的活性受到明显的抑制。
- 史翠红宋萍王勤英杨君崔龙孔繁芳
- 关键词：嗜线虫致病杆菌棉铃虫蛋白酶中肠生物活性
