姜凌 作品数:28 被引量:86 H指数:6 供职机构: 中国农业科学院生物技术研究所 更多>> 发文基金: 国家重点基础研究发展计划 国家自然科学基金 上海市科技兴农推广项目 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 医药卫生 理学 更多>>
作物叶酸代谢工程 被引量:2 2010年 叶酸是指四氢叶酸及其衍生物的一类物质,是介导一碳单位转移的重要辅助因子。人体自身不能合成叶酸,必须从食物中获取。当人体叶酸缺乏时,贫血、神经系统疾病、心血管病及癌症等发病率显著增加。结合本实验室的工作,系统阐述了番茄、水稻和玉米作物的叶酸代谢工程研究策略以及研究进展,对叶酸合成前体喋呤和对氨基苯甲酸(PABA)含量与叶酸合成之间的关系进行了深入分析,并对今后叶酸代谢工程的发展进行了展望。 刘晓宁 姜凌 王崇英 范云六 张春义关键词:作物 叶酸 生物合成 代谢工程 棉花转录因子基因GhMS3的克隆及其启动子功能的鉴定 被引量:9 2010年 【目的】从棉花无短绒突变体GZnn中分离棉纤维发育相关的转录因子,并对其转录激活功能和表达模式进行初步分析。【方法】通过RACE(rapid amplification of the cDNA ends)和染色体步行(genome walking)技术,获得GhMS3的cDNA序列及基因组DNA序列。利用生物信息学方法对获得的DNA序列及推定的氨基酸序列进行分析,采用酵母单杂交系统验证GhMS3蛋白的转录激活功能,运用GUS组织化学染色法在转基因烟草中分析该基因的表达模式。【结果】获得GhMS3的基因组DNA以及上游1174bp的启动子序列。氨基酸序列比对发现GhMS3是R2R3 MYB转录因子。酵母试验表明,GhMS3蛋白具体外转录激活功能,C端体外转录激活功能较强,在PGhMS3:GUS转基因烟草中,GUS主要在表皮毛、根毛以及细胞分裂旺盛区域表达。【结论】从棉花无短绒突变体GZnn中分离到的R2R3 MYB转录因子GhMS3,具有组织特异性表达模式并且其编码蛋白具有体外转录激活功能,是否参与植物表皮细胞分化有待于进一步研究。 孟红岩 杜雄明 张春义 范云六 姜凌关键词:转录激活 GUS染色 辅酶Ⅰ体内代谢调控研究进展 被引量:1 2021年 辅酶Ⅰ——烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide,NAD+)是一种在糖酵解、糖异生、三羧酸循环及呼吸链中发挥重要作用的辅酶,广泛参与DNA修复、组蛋白去乙酰化等生命过程。近年来研究表明NAD+合成的前体和中间化合物(具有维生素B3活性的烟酸、烟酰胺、烟酰胺核苷和烟酰胺单核苷酸)在预防糙皮病、延缓衰老,治疗神经和心血管多种疾病、调节胰岛素分泌、调控mRNA的表达等方面具有重要疗效。着重介绍了辅酶Ⅰ体内的合成代谢以及参与的调节衰老进程,以期为利用合成生物学技术在大肠杆菌中富集NAD+中间化合物提供理论依据和技术支撑。 孙卉 张春义 姜凌关键词:烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 合成代谢 衰老 一种通过基因敲除提高籽粒甲硫氨酸含量的方法 本发明公开了一种通过基因敲除提高籽粒甲硫氨酸含量的方法。通过CRISPR/Cas9技术对玉米<I>ZmMETS2</I>实施基因敲除,发现该基因敲除后玉米籽粒中甲硫氨酸含量得到一定程度的提高。本发明中玉米<I>ZmMET... 姜凌 张春义 任莹 连通 刘吉安作物叶酸检测方法的研究进展 被引量:18 2010年 叶酸是一种水溶性的维生素,是介导一碳单位转移极其重要的辅助因子。由于人类不能自身合成叶酸,而且作物中叶酸的含量通常较低,尤其是在谷物中含量更低,所以叶酸缺乏是一个全球性的问题。目前正通过基因工程或育种技术来提高作物中的叶酸水平,如何获得作物中各种叶酸衍生物含量的可靠数据非常重要。介绍了植物叶酸的提取过程,以及各种叶酸检测方法的原理、适用范围和各自的优缺点;重点阐述了微生物法和高效液相色谱法的方法学建立、原理以及目前的应用情况,并进行了展望。 常娜宁 姜凌 蒲训 范云六 张春义关键词:作物 微生物法 高效液相色谱法 硒与叶酸在抗病毒治疗中的作用及其在植物中的应用前景分析 2020年 2020年,科学家在新型冠状病毒肺炎的治疗过程中发现,治疗效果与患者体内的硒和叶酸水平有一定相关性。这说明提高人体内硒和叶酸含量的膳食方案,可以有效地增加人体免疫能力来应对病毒性疾病的冲击。通过膳食保障人体硒和叶酸的摄入是植物营养强化的主要任务之一,但目前硒和叶酸的复合营养强化工作鲜见报道。综述了硒和叶酸这两种微量营养素在抗病毒治疗中的机制、以及硒和叶酸在植物中的应用前景,为提升营养品质、创制富含硒和叶酸的营养强化植物提供理论支撑。 孙卉 张春义 姜凌关键词:硒 叶酸 抗病毒治疗 营养强化 磷酸化对UCHL3体外去泛素化酶活性的影响 被引量:3 2019年 泛素羧基末端水解酶L3(ubiquitin C-terminal hydrolase-L3,UCHL3)是真核细胞泛素羧基末端水解酶家族(ubiquitin C-terminal hydrolases,UCHs)的重要成员,参与了DNA损伤修复等过程。近期研究表明,UCHL3不仅在体外条件下可以切割C端用香豆素修饰的泛素分子(C-terminal conjugate of ubiquitin with 7-amino-4-methylcoumarin,Ub-AMC),当UCHL3上第75位的丝氨酸(Ser75)发生磷酸化后,其在细胞内切割多聚泛素链的活性也明显增强,但这种磷酸化调控尚缺乏体外证据支持。基于此,利用点突变及多种层析技术制备了野生型UCHL3(UCHL3 WT)和模拟磷酸化的UCHL3蛋白(UCHL3 S75E),在体外生化水平上研究了磷酸化对UCHL3的泛素链切割活性的影响。体外泛素切割实验显示,与UCHL3 WT相比,UCHL3 S75E切割Ub-AMC的活性提高了70%,但仍不能展现生理水平上的二泛素(di-ubiquitin,diub)切割活性,暗示UCHL3切割泛素链的机制更为复杂。同时,系统发育树与序列对比分析显示,发生磷酸化的Ser75仅存在于UCHL3中,在其他UCH家族成员中并不保守,表明基于Ser75的磷酸化调控是UCHL3所特有的。此外,UCHL3在众多真核生物中高度保守,暗示着该蛋白的磷酸化调控机制在进化上的保守性。研究结果拓展了对UCHL3磷酸化修饰调控的认识,为深入研究其生理角色奠定了基础。 丁珊 任禹静 姜凌 梅子青关键词:DNA损伤修复 植物维生素的生物强化进展 被引量:4 2018年 维生素是动植物体的生长发育所必需的微量营养素,包括A,B1,B2,B3,B5,B6,B8,B9,B12,C,D,E,K。这些物质由于人体内不能合成或合成量不足,所以虽然需要量很少,但必须从膳食中获得。因此,利用现代生物技术来提高植物合成的维生素含量可以比较有效地应对全球性维生素缺乏的问题,对人类的生存与健康具有重要意义。 姜凌 张春义关键词:维生素缺乏 植物体 生物强化 现代生物技术 微量营养素 维生素含量 拟南芥丝氨酸羟甲基转移酶(AtSHMT)的原核表达与酶活测定 被引量:2 2014年 从拟南芥叶片中克隆了定位于线粒体的拟南芥丝氨酸羟甲基转移酶基因(At SHM1),将其插入到p ET-26b(+)表达载体,并在大肠杆菌中成功表达。优化表达条件之后,获得可溶性At SHMT蛋白。用亲和色谱法成功分离纯化该蛋白,计算得到该酶酶学常数Km和Kmax分别为121μmol和21.8μmol/L·min。利用该酶催化DL-3-苯基丝氨酸裂解的产物苯甲醛在279 nm波长处有强烈吸收的性质,测定反应产物的吸光值,根据苯甲醛标准曲线测得At SHMT酶活,由此建立了一种测定真核生物丝氨酸羟甲基转移酶酶活的一种简便、快速、安全的方法。 江晶晶 张春义 姜凌关键词:丝氨酸羟甲基转移酶 酶活测定 玉米甲硫氨酸合酶基因METS的克隆及表达特性 被引量:1 2022年 在植物中,5-甲基四氢叶酸和同型半胱氨酸在甲硫氨酸合酶(methionine synthase,METS)的作用下生成甲硫氨酸,甲硫氨酸合酶是连接甲基代谢和一碳代谢的枢纽,克隆玉米甲硫氨酸合酶基因METS并分析其表达特性可为解析玉米籽粒的甲硫氨酸和叶酸的积累机制奠定基础。通过逆转录聚合酶链反应克隆得到玉米METS的编码序列,通过生物信息学方法分析其蛋白的特点,同时运用实时荧光定量技术分析了基因的组织表达特性及在萌发过程中的表达模式。结果发现玉米包含3个编码甲硫氨酸合酶的同源基因ZmMETS1、ZmMETS2、ZmMETS3,基因长度分别为2301、2298和2298 bp,编码蛋白的氨基酸数量分别为766、765和765个,蛋白质分子质量约为84.5 kD,3个蛋白均含有N端和C端2个结构域,每个结构域由α螺旋环绕平行的β片层构成立体结构。系统发育树分析3个蛋白与高粱SbMETS的相似程度最高。表达分析发现它们在玉米各组织中均表达,各组织中转录水平最高的是ZmMETS1;相对来说雌穗中3个基因的转录水平较其他组织高;另外,在萌发过程中,ZmMETS1和ZmMETS3的转录水平随着萌发的时间迅速增加,之后迅速下降。玉米中存在3个具有组成型表达特征的玉米甲硫氨酸合酶基因,ZmMETS1可能在雌穗发育和萌发过程中起主要作用。 任莹 连通 张春义 姜凌关键词:玉米 METS 萌发