唐恩洁
- 作品数：81 被引量：299H指数：9
- 供职机构：川北医学院分子生物学研究所更多>>
- 发文基金：四川省教育厅重点项目四川省教育厅资助科研项目四川省应用基础研究计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- bcl-2与GM-CSF的LdsRNA对肿瘤细胞生长的抑制作用
- 2005年
- 目的 探索bcl-2-9GM-CSF的长链dsRNA(Longer doublestrand RNA，LdsRNA)对肿瘤细胞生长的抑制作用。方法使用体外转录法制备地高辛标记的bcl一2和GM—CSF基因的LdsRNA，转染THP1、HL-60和K562髓系白血病细胞系，分别以MTT法、免疫组化、免疫荧光技术和紫外分光光度计检测细胞LdsRNA转染水平，细胞增殖，特异性bcl-2蛋白表达和细胞总蛋白含量。结果LdsRNA能显著抑制THP1细胞增殖(P<0．05)和蛋白质合成，对HL-60和K562细胞系也有一定的抑制作用。结论LdsRNA能抑制肿瘤细胞的增殖，为以后利用LdsRNA用于肿瘤的治疗奠定一定的理论基础。
- 唐恩洁杨健杜冰任碧轩冯莉李丽
- 关键词：肿瘤细胞生长GM-CSFK562细胞系白血病细胞系地高辛标记RNA转染
- PcDNA3.1-rhGM-CSF重组质粒的构建及生物活性鉴定
- 2010年
- 目的构建PcDNA3.1-rhGM-CSF真核细胞表达载体,初步观察其对髓系白血病细胞K562细胞生长的影响。方法采用PCR、T-A克隆及基因定向克隆技术,将rhGM-CSF基因插入PcDNA3.1(+)空载体,构建了PcD-NA3.1-rhGM-CSF真核表达载体。经限制性内切酶酶切和DNA测序进行鉴定。转染人髓系白血病细胞K562细胞72h后,采用RT-PCR方法、NBT试验、MTT试验、免疫组化技术,观察和分析PcDNA3.1-rhGM-CSF在K562细胞中的表达及其对该细胞的影响。结论成功构建了PcDNA3.1-rhGM-CSF真核细胞表达载体;重组质粒PcDNA3.1-rh-GM-CSF能在K562细胞中表达;部分K562细胞向单核细胞系、巨噬细胞系分化。
- 朱红唐恩洁
- 关键词：粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子重组表达载体
- RNAi—一种关闭基因的新方法被引量：1
- 2003年
- RNA干扰(RNA interference,RNAi)在哺乳类细胞中是利用同源双链小型干扰RNA(small interference RNA,siRNA)诱导特异性基因表达抑制,它主要发生于转录后基因水平,所以又称为转录后基因沉默(post transcription gene silencing,PTGS),它的发生机制目前虽不十分清楚,但一些实验证实了其发生过程。双链 RNA(double strand RNA,dsRNA)首先被切割为siRNA,siRNA与一些蛋白形成RNA引导的沉默复合物(RNA induced silencing complex,RISC),介导基因表达沉默。由于 RNAi的特异性、高效性、方便性,已成为研究基因功能、肿瘤基因治疗、病毒感染基因治疗的新方法。
- 杨健唐恩洁朱道银
- 关键词：RNAIRNA干扰基因表达基因治疗
- 用聚合酶链反应和地高辛系统检测t(14;18)被引量：4
- 1996年
- 目的探索聚合酶链反应(PCR)和地高辛系统检测 t(14;18)的特异性和敏感性。方法用该法检测了不同来源 DNA 标本中的 t(14;18)。结果 3株阳性对照细胞系、14例滤泡性非何杰金淋巴瘤(FNHL)中13例、4例弥漫性非何杰金淋巴瘤(DNHL)中2例的 DNA 内检出 bcl-2-JH 基因;阴性对照细胞系、正常人和其他肿瘤 DNA 中均未检出 t(14;18)。DNA 序列测定结果亦证实检出的阳性片段确实为 bcl-2-JH 基因。敏感性分析结果证实该法较单用 PCR 技术敏感1000～10000倍。结论 PCR 和地高辛系统确为敏感、特异、实用和对人体无害的检测 t(14;18)的方法。
- 唐恩洁Hodges E.Smith L.J.
- 关键词：淋巴瘤聚合酶链反应
- 重组P_(53)基因在HepG-2中的表达及作用被引量：2
- 1999年
- 为进一步探索正常Ｐ５３ 对肿瘤细胞增殖的抑制作用，本文用磷酸钙ＤＮＡ共沉淀法，将本室构建的ＰＸＴ１Ｐ５３ 真核表达细胞转移至ＨｅｐＧ２ 肝癌细胞系内，经斑点杂交技术和间接免疫荧光技术证实，外源性Ｐ５３ 基因已在ＨｅｐＧ２ 细胞中稳定表达，导入的Ｐ５３基因亦能抑制ＨｅｐＧ２ 肝癌细胞系增殖并诱导其凋亡。实验结果提示正常Ｐ５３ 基因可成为治疗不同肿瘤的重要靶分子之一。
- 任碧轩李仁冯莉唐恩洁杨晓红赵明才杨健张紫福张艳艳魏祥云
- 关键词：HEPG-2细胞肿瘤基因治疗
- PcDNA3.1-rhGM-CSF重组质粒的构建及鉴定被引量：3
- 2010年
- 目的:构建PcDNA3.1-rhGM-CSF真核细胞表达载体。方法:采用PCR、T-A克隆及基因定向克隆技术,将rhGM-CSF基因插入PcDNA3.1(+)空载体,构建了PcDNA3.1-rhGM-CSF真核表达载体。经限制性内切酶酶切和DNA测序进行鉴定。结果:双酶切及DNA测序证实PcDNA3.1-rhGM-CSF真核细胞表达载体构建成功。结论:成功构建PcDNA3.1-rhGM-CSF真核细胞表达载体。
- 朱红唐恩洁杨晓红
- 关键词：粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子重组表达载体
- 小剂量阿糖胞苷体外诱导HL-60细胞凋亡的作用被引量：2
- 2004年
- 阿糖胞苷是白血病的重要药物 ,其小剂量化疗仍用于临床治疗白血病 ,并取得了一定的疗效 ,但其作用机制尚未完全阐明 ,可能与药物诱导细胞分化或凋亡有关。文中用TUNEL法和流式细胞仪分析小剂量Ara -C(10 - 8M)对HL 6 0细胞周期和细胞凋亡的影响 ,用免疫组化法和原位杂交法分别检测P5 3蛋白和p5 3mRNA、bcl- 2mRNA表达水平的改变 ,以探讨bcl- 2和p5 3基因表达与小剂量阿糖胞苷诱导HL - 6 0细胞凋亡的关系。结果表明 :小剂量Ara -C能诱导HL - 6 0细胞凋亡 ,其分子机制可能与P5 3蛋白、p5 3mRNA表达增加和bcl-
- 杜冰朱道银唐恩洁
- 关键词：阿糖胞苷凋亡HL-60细胞BCL-2
- 针对HBs基因的shRNA表达载体的构建及鉴定
- 2009年
- 目的以PGenesil-1(Pg)为载体构建针对乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)基因的shRNA表达载体PGenesil-1-HBs(Pgs)。方法设计、合成针对HBs区的三对DNA序列,分别插入PGenesil-1中,并对重组质粒进行限制性内切酶谱和DNA序列测定分析。结果3个不同的重组shRNA表达载体经限制性酶识别和DNA序列测定完全正确。结论成功构建了3个针对HBs基因的shRNA表达载体。
- 杨尚君唐恩洁张大容
- 关键词：乙型肝炎病毒RNA干扰乙型肝炎病毒表面抗原
- 基因组免疫系统被引量：6
- 2005年
- 随着对RNAi现象及其功能的深入研究 ,揭示dsRNA/siRNA具靶向降解特异性mRNA、抑制相应基因表达作用 ,有抵抗病毒和转座子入侵基因组的重要功能 ,故被称为“基因组免疫系统”。本文综述了该系统的发现、功能、作用机制和应用前景。
- 唐恩洁杨健朱道银
- 关键词：基因组免疫系统RNAISIRNADSRNA
- 靶向HBVs和e抗原基因的shRNA表达载体共转染对HBV抗原表达的抑制作用被引量：1
- 2010年
- 目的:探索靶向乙型肝炎病毒HBsAg基因的shR-NA表达载体Pgs1、Pgs2、Pgs3及靶向HBeAg基因shRNA表达载体psiHBV4、psiHBV5、psiHBV6共转染,对体外培养HepG2.2.15细胞中的HBV抗原表达的抑制作用。方法:以质粒PTZ为阴性对照,将自行构建的靶向HBVs和e抗原基因的shRNA表达载体按不同组合共转染HepG-2.2.15细胞;继续培养24 h后用MEIA分别检测细胞裂解液和培养上清中HBsAg和HBeAg的表达水平。结果:psiHBV4+PgS2、psiH-BV4+PgS3在联合转染时,在细胞上清和裂解液中对HBsAg和HBeAg表达都有显著抑制作用(P<0.05),psiHBV5+PgS1、psiHBV6+PgS3对裂解液HBeAg表达抑制作用不显著(P>0.05)。结论:靶向HBs和HBe基因的两种载体psiH-BV4+PgS2、psiHBV4+PgS3共转染比单个载体转染更能显著减少HBV抗原的表达。
- 杨尚君王朝莉李丽唐恩洁
- 关键词：乙型肝炎病毒抗原RNA干扰SHRNA表达载体
