吕洋
- 作品数:46 被引量:40H指数:4
- 供职机构:军事医学科学院野战输血研究所更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学理学更多>>
- 细胞培养基及其用途
- 本发明涉及细胞培养基及其用途。其中,培养基包含:基础培养基,该基础培养基为AminomaxC-100培养基;bFGF;以及DMOG。利用本发明的细胞培养基对分离的毛乳头细胞进行体外培养,能够有效地使得毛乳头细胞扩增,从而...
- 裴雪涛陈琳岳文习佳飞师伟姚海雷吕洋张秀媛谢小燕刘大庆
- 神经元限制性沉默因子对人胰岛素基因转录调控作用的研究被引量:5
- 2007年
- 为了研究神经元限制性沉默因子(NRSF)调控神经元及胰岛细胞中神经特异性基因的表达,进一步寻找胰岛细胞中可能存在的其他NRSF调控基因.先用生物信息学手段对相关基因进行了分析.筛选及序列比对发现,人胰岛素核心启动子区有一段与NRSE相似的序列,提示,它可能受NRSF调控.构建了含NRSF基因的慢病毒载体,将其稳定转染于INS-1细胞.构建了3种荧光素酶报告载体:含有人胰岛素启动子-荧光素酶(hInsP-LUC)的慢病毒载体,pGL3-Basic载体和含有2拷贝NRSE样基序-荧光素酶(NRSE-LUC)的报告载体.利用稳定转染及瞬时转染实验观察NRSF对报告载体中荧光素酶活性的影响.利用电泳迁移率变动分析实验观察NRSE样基序与NRSF蛋白的结合情况,并通过竞争结合实验、引入特异性抗体实验证实探针与蛋白质结合的特异性.RT-PCR检测证实,感染空病毒的INS-1细胞不表达NRSF,感染含目的基因慢病毒的INS-1细胞能表达NRSF.将含有hInsP-LUC的慢病毒载体稳定转染于上述2种细胞,荧光素酶活性分析结果显示,NRSF的过表达能明显降低胰岛素启动子的活性.瞬时转染hInsP-LUC报告系统于上述2种细胞,结果也显示NRSF能明显抑制胰岛素启动子-荧光素酶的活性.将含有NRSE-LUC的报告载体瞬时转染于上述2种细胞,结果表明过表达NRSF的INS-1细胞组的荧光素酶相对值比对照组有明显下降.电泳迁移率变动分析实验进一步证实,此NRSE样序列可以与NRSF蛋白特异结合,这种特异结合可以被标准的NRSE序列所竞争.结果表明,人胰岛素启动子中含有NRSE样序列,该序列通过与NRSF蛋白结合从而抑制人胰岛素启动子的转录活性.这一研究工作有助于进一步了解NRSF在胰岛细胞中的调控作用.
- 刘庆斌李艳华杨印祥袁红丰张锐秦立蓬吕洋张赛男孙迪金陈琳白慈贤南雪王韫芳裴雪涛
- 关键词:胰岛素启动子
- 泊洛沙姆188对体外三维培养脐血单个核细胞向巨核细胞分化的影响被引量:1
- 2018年
- 目的观察泊洛沙姆188(P188)对体外三维(3D)培养诱导脐血单个核细胞向巨核细胞分化的影响。方法将分离的脐血单个核细胞分别接种于细胞瓶和细胞培养袋中,后者采用WIGGENS摇床模拟生物反应器进行3D培养。在巨核细胞诱导培养基中加入P188体外培养14d,观察细胞形态、计数细胞数并计算细胞存活率,采用流式细胞术观察巨核细胞表面标志表达情况。结果与采用传统的细胞培养瓶二维(2D)培养诱导巨核细胞相比,2D+P188培养组巨核系CD41+、CD41+/CD61+、CD61+细胞数明显增加(P值均〈0.01);在3D培养中加入P188,细胞体积变大,核形状不规则,胞质含紫红色颗粒,细胞分化更接近成熟。2D培养、3D培养及3D+P188培养组组间巨核细胞表面标志CD41、CD41/CD61、CD61表达水平差异有统计学意义(P值均〈0.01)。LSD—t检验两两比较显示,与2D培养相比,3D培养诱导巨核细胞存活率及细胞数均降低(P值分别为0.018、0.027),3D+P188培养组细胞数、细胞存活率与2D和3D培养组比较差异均无统计学意义(P值均〉0.05)。而3D培养组巨核细胞CD41/CD61表达水平为(36.30±1.27)%,高于2D培养组的(23.95±1.34)%(P=0.002),3D+P188培养组CD41/CD61表达水平更高[(59.45±1.20)%]。结论3D培养有利于巨核系祖细胞诱导分化,但细胞存活率低,加入P188,细胞生存状态好,且诱导效率更高。
- 陈琳岳文谢小燕张秀媛吕洋刘大庆习佳飞曲洺逸范增房芳裴雪涛
- 关键词:巨核细胞泊洛沙姆诱导分化
- 细胞培养基及其用途
- 本发明涉及细胞培养基及其用途。其中,培养基包含:基础培养基,该基础培养基为AminomaxC-100培养基;bFGF;以及DMOG。利用本发明的细胞培养基对分离的毛乳头细胞进行体外培养,能够有效地使得毛乳头细胞扩增,从而...
- 陈琳裴雪涛岳文习佳飞师伟姚海雷吕洋张秀媛谢小燕刘大庆
- 文献传递
- 白扁豆提取物、其提取方法及其在制备抗辐射皮肤损伤药物中的应用
- 本发明公开了白扁豆提取物及其提取方法与应用。其目的是提供一种白扁豆提取物及其提取方法与其在制备抗辐射皮肤损伤药物中的应用。该白扁豆提取物是将白扁豆粉碎后,先对其用生理盐水进行提取,再将提取物用饱和硫酸铵进行盐析,最后经脱...
- 裴雪涛师伟任祥亮岳文白慈贤南雪施双双陈琳吕洋
- 文献传递
- 诱导间充质干细胞和脂肪干细胞分化为神经元的方法及其专用培养基
- 本发明公开了一种诱导间充质干细胞和脂肪干细胞分化为神经元的方法及其专用培养基。该培养基是添加有体积/体积百分比浓度8-12%胎牛血清的DMEM培养基。该方法步骤:1)合成抑制神经元限制性沉默因子基因表达的小干扰RNA或构...
- 裴雪涛杨印祥李艳华刘庆斌陈琳管利东吕洋
- 文献传递
- 一类饱和胺类化合物在制备外周血造血干细胞动员药物中的应用
- 本发明提供了一类饱和胺类化合物的新用途,即其在制备外周血造血干细胞动员药物中的应用。实验证明,该化合物(代号TA01)能够有效的动员骨髓中的造血干细胞,是一类新型的造血干细胞动员剂。本发明将在外周血造血干细胞动员药物的研...
- 裴雪涛师伟李艳华任祥亮吕洋施双双陈琳南雪岳文
- 文献传递
- 白扁豆提取物、其提取方法及其在制备抗辐射皮肤损伤药物中的应用
- 本发明公开了白扁豆提取物及其提取方法与应用。其目的是提供一种白扁豆提取物及其提取方法与其在制备抗辐射皮肤损伤药物中的应用。该白扁豆提取物是将白扁豆粉碎后,先对其用生理盐水进行提取,再将提取物用饱和硫酸铵进行盐析,最后经脱...
- 裴雪涛师伟任祥亮岳文白慈贤南雪施双双陈琳吕洋
- 文献传递
- 诱导间充质干细胞和脂肪干细胞分化为神经元的方法
- 本发明公开了一种诱导间充质干细胞和脂肪干细胞分化为神经元的方法及其专用培养基。该培养基是添加有体积/体积百分比浓度8-12%胎牛血清的DMEM培养基。该方法步骤:1)合成抑制神经元限制性沉默因子基因表达的小干扰RNA或构...
- 裴雪涛杨印祥李艳华刘庆斌陈琳管利东吕洋
- 文献传递
- 泊洛沙姆在诱导造血干祖细胞增殖和/或巨核分化中的用途
- 本发明公开了泊洛沙姆在诱导造血干祖细胞增殖和/或巨核分化中的用途。在造血干祖细胞增殖和/或巨核分化体系中添加泊洛沙姆,能够诱导、促进造血干祖细胞增殖和/或巨核分化,且增殖快,巨核分化效率高。
- 裴雪涛陈琳谢小燕岳文张秀媛吕洋王静雪刘大庆李艳华何丽娟姚海雷曲洺逸
- 文献传递