司文
- 作品数：6 被引量：13H指数：2
- 供职机构：中国医科大学基础医学院病原生物学教研室更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 肺炎支原体CARDS毒素基因表达载体的构建与鉴定
- 前言 肺炎支原体(MycoplasmaPneumoniae，Mp)是人类原发性非典型肺炎的病原体，其感染的临床合并症复杂，因此，准确的临床诊断有非常重要的意义。应用重组蛋白抗原检测临床标本，有较高的特异性和敏感性，国内...
- 司文
- 关键词：肺炎支原体酶联免疫吸附试验
- 肺炎支原体感染鼠T淋巴细胞活化的动态变化被引量：2
- 2015年
- 动态观察肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,Mp)感染鼠T淋巴细胞的数量及其亚群的变化,为正确评价T淋巴细胞在Mp感染中的作用提供理论依据。Mp滴鼻感染小鼠,在感染后不同时间点采集标本,流式细胞术检测感染鼠外周血中T淋巴细胞数量变化,ELISA测定脾细胞上清中TGF-β1、IL-10含量。结果表明,Mp感染不同时间点外周血中CD4+T淋巴细胞数量变化不明显或呈下降趋势。CD4+/CD8+比值下降。初次感染和再次感染的第3天、第7天,TGF-β1、IL-10表达水平升高。肺炎支原体感染对CD4+T淋巴细胞有一定抑制作用,外周血TGF-β1、IL-10的表达与脾细胞中CD4+T淋巴细胞数量变化成反比。提示TGF-β1可能参与了对Th1细胞的负调控作用。
- 赵芝娜刘宝山冯辉杨颖司文王桂珍
- 关键词：肺炎支原体CD4+T淋巴细胞TGF-Β1
- 肺炎支原体感染鼠Th1/Th2平衡状况及Tim-3mRNA的表达
- 目的 通过检测Tim-3 mRNA的表达水平及IFN-γ、IL-4的含量,初步探讨肺炎支原体感染鼠Th1/Th2细胞的动态变化及Tim-3的免疫调控作用.
- 杨颖赵芝娜司文何梦博张晗白爽王蒙王桂珍
- 肺炎支原体感染小鼠Th1/Th2平衡状况及Tim-3 mRNA的表达被引量：4
- 2013年
- 目的通过检测Tim-3mRNA的表达水平及IFN-γ、IL-4的含量,初步探讨肺炎支原体感染鼠Th1/Th2细胞的动态变化及Tim-3的免疫调控作用。方法通过滴鼻感染建立肺炎支原体肺炎小鼠模型,观察小鼠的一般状况,分别于感染后3d、5d、7d、14d、21d取材,应用RT-PCR方法检测肺组织和脾脏Tim-3mRNA的表达;采用ELISA法检测肺泡灌洗液中细胞因子IFN-γ、IL-4的含量。结果实验组IFN-γ于3d出现升高(t=2.309,P<0.05),5dIFN-γ开始下降,而IL-4于3d开始升高并一直持续到7d(t=6.436,P<0.05),之后逐渐恢复正常,肺组织和脾脏Tim-3mRNA的表达均于5d达到峰值(t=4.727,P<0.05;t=7.962,P<0.05),且肺组织和脾脏Tim-3mRNA表达量与IL-4呈正相关(r=0.561,P<0.05;r=0.462,P<0.05),从5d开始与IFN-γ呈负相关(r=-0.379,P<0.05;r=-0.431,P<0.05)。结论小鼠感染肺炎支原体后Th1/Th2失衡,以Th2介导的免疫反应为主;Tim-3可能参与了感染后对Th1细胞的负调控。
- 杨颖赵芝娜陈楠司文王桂珍
- 关键词：肺炎支原体白细胞介素-4干扰素-Γ
- 肺炎支原体感染鼠P1特异抗原的动态检测被引量：2
- 2014年
- 通过实验动物模型探讨肺炎支原体感染动物肺泡灌洗液中特异抗原检出率的动态变化,为肺炎支原体感染的临床诊断提供理论依据。小鼠经鼻自然感染肺炎支原体,分别采集感染后不同时间点小鼠的支气管灌洗液,应用量子点标记肺炎支原体P1蛋白抗体,直接免疫荧光法检测感染鼠肺泡灌洗液中肺炎支原体P1特异抗原,同时通过PCR检测肺组织肺炎支原体DNA及肺组织病理切片观察肺部炎性变化确定小鼠感染。结果显示,感染鼠肺炎支原体特异抗原在感染后第3天检出阳性率为75%,第7天达高峰为83%,之后随病程延长,抗原检测的阳性率逐渐下降,在感染后第14、21天检出阳性率分别为58%和25%。肺炎支原体特异抗原在感染早期检出率高。应用量子点标记肺炎支原体P1蛋白抗体,直接免疫荧光法检测肺炎支原体特异抗原可应用于肺炎支原体感染的早期诊断。
- 赵芝娜张晗何梦博陈博杨颖司文王桂珍
- 关键词：肺炎支原体特异抗原动态检测
- 重组肺炎支原体CARDS毒素蛋白临床检测应用的初步研究被引量：5
- 2015年
- 目的初步探讨肺炎支原体CARDS毒素蛋白在检测肺炎支原体感染中的应用价值。方法 PCR扩增CARDS毒素基因并连接到PMD-19-T载体,经酶切、PCR及核苷酸测序分析后,将CARDS毒素基因片段克隆到pGEX-6p-1表达载体内并转入受体菌。IPTG诱导大肠埃希菌BL21重组株(pGEX-6p-1-CARDS)的表达。GST柱层析纯化重组CARDS毒素蛋白,以该重组蛋白和重组P1蛋白为抗原建立间接ELISA方法,检测85份感染肺炎支原体的血清标本,并与重组P1蛋白的ELISA结果进行比较。结果 CARDS毒素蛋白表达载体构建成功并表达大小为43kDa的重组蛋白,Western blot测定其能与兔抗Mp多价抗血清发生反应。ELISA结果显示,CARDS毒素蛋白的阳性率为70.59%(60/85),重组P1蛋白的阳性率为63.53%(54/85)。结论本研究成功构建了CARDS毒素蛋白表达载体并获得了稳定表达的重组菌株;在诊断肺炎支原体感染的血清学ELISA试验中,重组CARDS毒素蛋白的敏感性高于重组P1蛋白,为Mp感染的诊断提供了新的可用抗原。
- 司文周世冠刘宝山白爽王蒙王桂珍
- 关键词：肺炎支原体ELISA
