叶良平
- 作品数:25 被引量:67H指数:5
- 供职机构:安徽医科大学第一附属医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金安徽省高校省级自然科学研究项目国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域:医药卫生理学文化科学更多>>
- 补体C3介导CD4~+T细胞增殖分化在SCADRs发病中的作用
- 严重皮肤药物不良反应SCADRs(也称重症药疹)临床表现多样,病情凶险,发病机制复杂,病死率高。SJS和TEN是常见的SCADRs,两者可认为是同一疾病的不同阶段,SJS和TEN病情变化快,具有较高的死亡率,SJS的病死...
- 叶良平
- 关键词:重症药疹
- 银杏叶提取物对三氯乙烯诱导人角质形成细胞线粒体损伤的保护作用
- 2008年
- 背景与目的:研究三氯乙烯(trichloroethylene,TCE)对人角质形成细胞(keratinocytes,KC)线粒体的损伤以及银杏叶提取物(ginkgo biloba extract,EGb)对其损伤的保护作用,为防治三氯乙烯药疹样皮炎提供基础资料和理论依据。材料与方法:分离制备体外培养KC,接种于培养板/皿中,分成TCE染毒组、EGb保护组,溶剂对照组和空白对照组,TCE染毒组以不同浓度TCE(0、0.125、0.5和2.0 mmoL/L)及不同时间(0、4、8、12和24 h)处理体外培养的KC,EGb保护组则以不同浓度EGb(0、10、50、100和150 mg/L)预处理2 h后再用2.0 mmoL/L TCE进行染毒,溶剂对照组和空白对照不加入TCE和EGb,以使用含1%丙酮(体积分数)的培养基为溶剂对照组,以新鲜培养基作为空白对照组。采用MTT法观察细胞活力和线粒体酶抑制率变化,检测ATP酶活力,间接反映线粒体能量变化情况,通过流式细胞术结合罗丹明123(Rh123)和碘化丙啶(PI)双染法检测线粒体膜电位的改变情况。结果:随着TCE浓度的升高和作用时间的延长,细胞活力、ATP酶活性和线粒体膜电位下降,线粒体酶抑制率升高,当TCE浓度超过0.5 mmol/L,作用时间大于8 h时,与空白对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05);EGb保护组在EGb浓度为10 mg/L时即可起到保护作用(与2.0 mmol/L TCE染毒组比较,P<0.01),当EGb浓度增加到150 mg/L时线粒体功能状态接近正常对照组水平(与溶剂对照组比较,P>0.05)。结论:TCE可引起人KC线粒体损伤,EGb对这种损害具有保护作用。
- 朱启星叶良平马泰沈彤
- 关键词:三氯乙烯角质形成细胞线粒体银杏叶提取物
- 三氯乙烯诱导人表皮角质形成细胞凋亡中依赖Caspase-9的Caspase-3激活被引量:4
- 2009年
- 目的探讨有机溶剂三氯乙烯(TCE)诱导正常人表皮角质形成细胞(NHEK)凋亡过程中可能的信号通路。方法用0.125、0.25、0.5、1.0、2.0mmol/L的TCE处理NHEK4h,并培养4、8、12、24h,分光光度法测上清中Caspase-9和Caspase-3活性,Annexin-V/PI双染后流式细胞仪(FCM)测细胞凋亡;Caspase-3抑制剂Z-DEVD-FMK和Caspase-9抑制剂Z-LEHD-FMK预处理组,用100μmol/LZ-DEVD-FMK或Z-LEHD-FMK预处理NHEK1h,再用2.0mmol/LTCE染毒4h后培养至12h。结果不同浓度TCE处理NHEK4h后培养不同时间,可诱导Caspase-3和Caspase-9活性升高,培养12、24h时,各TCE处理组Caspase-3和Caspase-9活性与溶剂对照比差异有统计学意义(P<0.05)。不同浓度TCE处理NHEK4h后培养12h,凋亡细胞(Annexin-V+/PI-)所占百分比随TCE剂量增加而升高,除0.125mmol/LTCE组外,其它各处理组Annexin-V+/PI-细胞所占百分比与对照组比差异均有统计学意义(P<0.05)。相关分析显示Annexin-V+/PI-细胞所占百分比与Caspase-3和Caspase-9活性都呈正相关(P<0.05)。100μmol/LZ-DEVD-FMK预处理明显抑制2.0mmol/LTCE诱导的Caspase-3活性上升和Annexin-V+/PI-细胞所占百分比的增加(P<0.05),对Caspase-9活性影响不明显(P>0.05)。100μmol/LZ-LEHD-FMK预处理不仅抑制2.0mmol/LTCE诱导的Caspase-3活性上升和Annexin-V+/PI-细胞所占百分比的增加,还抑制Caspase-9活性上升(P<0.01)。结论TCE诱导NHEK凋亡中,内部凋亡途径中上游关键酶Caspase-9和下游效应分子Caspase-3均激活,且Caspase-3的激活依赖Casapase-9的活化。
- 沈彤叶良平汪立杰张学军朱启星
- 关键词:半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9细胞凋亡
- 银杏叶提取物对三氯乙烯诱导人角质形成细胞线粒体损伤的保护作用
- 目的:研究三氯乙烯(TCE)对人角质形成细胞(KC)线粒体的损伤以及银杏叶提取物(EGb)的保护作用,为防治三氯乙烯药疹样皮炎提供基础资料和理论依据。
方法:体外培养的人角质形成细胞以不同浓度TCE处理不同的时...
- 朱启星叶良平马泰沈彤
- 关键词:三氯乙烯角质形成细胞线粒体损伤银杏叶提取物
- 文献传递
- 三氯乙烯诱导人皮肤角质形成细胞凋亡线粒体途径的初步研究
- 三氯乙烯/(trichloroethylene,TCE/)是一种有机溶剂,在工业上主要用做金属和电子元件的脱脂、清洗和去污。职业性皮肤接触TCE的工人中出现的严重皮肤损伤已经成为目前国内主要的职业卫生问题。但其皮肤损害的...
- 叶良平
- 关键词:三氯乙烯角质形成细胞CASPASE-9银杏叶提取物
- 文献传递
- Caspase-9在三氯乙烯诱导人表皮角质形成细胞凋亡中作用的研究
- 目的用体外研究方法,通过检测Caspase-9活性及细胞凋亡,探讨Caspase-9在有机溶剂三氯乙烯(TCE)诱导正常人表皮角质形成细胞(NHEK)凋亡中的作用。方法用0.125、0.25、0.5、1.0、2.0 mm...
- 沈彤叶良平汪立杰张学军朱启星
- 关键词:三氯乙烯角质形成细胞CASPASE-9细胞凋亡
- 文献传递
- 银杏叶提取物对三氯乙烯所致的角质形成细胞线粒体膜电位变化的影响被引量:2
- 2007年
- 目的研究三氯乙烯(TCE)对角质形成细胞(KC)线粒体膜电位的影响以及银杏叶提取物(GBE)的保护作用,为预防三氯乙烯皮肤损害提供理论依据。方法体外培养的人角质形成细胞以不同浓度TCE处理8h,GBE保护实验则以不同浓度GBE预处理2h后再进行TCE染毒,采用罗丹明123(Rh123)和碘化丙啶(PI)双染色方法,通过流式细胞仪检测线粒体膜电位的变化情况。结果空白对照组Rh123荧光强度为18.73±0.45,正常和早期凋亡细胞分别占(77.10±2.08)%和(12.33±1.39)%;2.0mmol/LTCE染毒组Rh123荧光强度下降到8.20±0.66(与空白对照相比,P<0.01),正常和早期凋亡细胞比例分别为(11.90±0.56)%和(65.33±1.45)%(与空白对照相比,均P<0.01)。10mg/L的GBE预处理对2.0mmol/LTCE所致的线粒体膜电位下降即显示有保护作用,Rh123荧光强度为13.80±0.92,正常细胞占(40.90±2.10)%,早期凋亡细胞占(32.10±1.25)%(与2.0mmol/LTCE染毒组相比差异有统计学意义,P<0.01)。随着GBE浓度的增大,保护作用渐强,100mg/L的GBE达到完全的保护作用,上述3项指标分别为18.57±0.57,(76.57±2.67)%和(11.63±1.07)%(与2.0mmol/LTCE染毒组相比,P<0.01,而与空白对照组相比差异均无统计学意义)。结论TCE可以剂量依赖性地诱导KC线粒体膜电位的下降,使细胞进入凋亡状态;GBE预处理能有效预防TCE所致的线粒体膜电位的下降,并可降低KC凋亡。研究结果提示GBE可能用作预防三氯乙烯皮肤损伤的有效保护剂。
- 朱启星马泰沈彤俞韵叶良平
- 关键词:银杏叶提取物三氯乙烯角质形成细胞线粒体膜电位
- 三氯乙烯诱导入表皮角质形成细胞凋亡的实验研究被引量:1
- 2009年
- 目的探讨有机溶剂三氯乙烯(TCE)诱导正常人表皮角质形成细胞(NHEK)凋亡的可能机制。方法TCE处理NHEK后,分光光度法测细胞上清中半胱氨酸蛋白水解酶(Caspase)-3、8和9的活性,膜联蛋白V/碘化丙啶(PI)双染后流式细胞仪(FCM)测细胞凋亡,Rhl23/PI双染后FCM测线粒体膜电位(△mm);用Caspase-3抑制剂或Caspase-9抑制剂预处理NHEK1h,验证Caspase的活化。结果不同浓度TCE处理NHEK4h后培养不同时间,Caspase-3和9活性呈剂量和时间依赖的升高,培养12、24h,各TCE处理组Caspase-3和9活性与溶剂对照比差异均有统计学意义(均P〈0.05),而Caspase-8活性变化不明显。0.125、0.25、0.5、1.0和2.0mmol/LTCE处理NHEK4h后培养12h,膜联蛋白V+/PI-为(20.1±4.1)%、(30.0±7.5)%、(42.1±8.2)%、(56.0±6.1)%和(79.1±4.3)%,除0.125mmol/L组外,其余组与溶剂对照组(9.4±3.0)%比较,差异均有统计学意义(均P〈0.05)。膜联蛋白V+/PI-与Caspase-3和9活性都呈正相关(r=0.786、0.736,均P〈0.05),Caspase-3活性与Caspase-9活性也呈正相关(r=0.845,P〈0.05),膜联蛋白V+/PI-和Caspase-3活性均与Caspase-8活性无相关。100txmol/Lz-DEVD—FMK预处理使2.0mmol/LTCE处理的NHEK中Caspase-3活性从(0.963±0.043)nmo]pNA·min-1·ml-1。下降为(0.349±0.045)nmolpNA·min-1·ml-1膜联蛋白V+/PI~从(80.0±5.5)%下降为(16.3±3.2)%(P〈0.01),Caspase-9活性变化不大(P〉0.05)。100μmol/L的Z.LEHD-FMK预处理不仅使得2.0mmol/LTCE处理的NHEK中Caspase-3活性下降为(0.338±0.011)nmolpNA·min-1·ml-1,膜联蛋白V+/PI-下降为(16.1±1.7)%,而且Caspase-9活性也从(0.821±0.031)nmo]pNA-rain~·ml。下降为(0.240±0.043)nmo|pNA·rain~·ml~,差异有统计学意义(P〈0.01
- 沈彤马泰叶良平汪立杰朱启星
- 关键词:三氯乙烯线粒体膜细胞凋亡角质形成细胞
- 高铁作业者血清HSP70水平分析及护理干预
- 2015年
- 目的探讨高铁作业者血清热应激蛋白70(HSP70)表达水平,为护理干预提供依据。方法收集职业性体检的高铁作业者176名为高温组。从同日体检人群中随机抽取176名为对照组。ELISA法检测血清HSP70含量。结果高温组血清HSP70水平(0.157±0.133)ng/ml高于对照组(0.097±0.134)ng/ml,有显著性差异(t=4.26,P<0.01)。以接毒工龄将高温组分为三组,HSP70含量组间比较,有显著性差异(F=8.26,P<0.01)。结论高铁作业者血清HSP70水平显著升高,可为高温作业制定护理对策提供指导。
- 王宏艳徐乐叶良平
- 关键词:护理干预
- 三氯乙烯诱导人角质形成细胞凋亡过程中caspase-8及caspase-9活性的变化
- 目的:观察三氯乙烯(TCE)导致体外培养的人原代角质形成细胞(KC)损伤过程中caspase-8、caspase-9活性以及细胞凋亡率变化,探讨TCE引起KC凋亡的可能机制。方法:体外培养的人角质形成细胞分别给予不同浓度...
- 朱启星叶良平汪立杰沈彤
- 文献传递